Navegando por Autor "Beltrame Júnior, Milton"

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    Desenvolvimento e caracterização de nanopartículas de poli-ԑ-caprolactona contendo cloro-alumínio-ftalocianina para potencial uso na terapia fotodinâmica em células
    (2022-03-08) Pinto, Bruna Cristina dos Santos; Beltrame Júnior, Milton; Gonçalves, Érika Peterson; Liu, Yao Cho; Naal, Rose Mary Zumstein Georgetto; Rosseti, Isabela Bueno; Simioni, Andreza Ribeiro; São José dos Campos
    Neste trabalho, nanopartículas do polímero poli-ԑ-caprolactona (PCL) foram desenvolvidas para encapsular a cloro-alumínio ftalocianina (ClAlPc), como modelo fotossensibilizador para aplicação em terapia fotodinâmica (TFD). O método de nanoprecipitação foi aplicado para produzir nanopartículas de PCL-ClAlPc que foram caracterizadas por medidas no estado estacionário, tamanho de partícula, potencial zeta, espalhamento dinâmico de luz, morfologia e eficiência de carregamento. A análise da microscopia eletrônica de varredura (MEV) mostra claramente a formação de nanopartículas uniformes, de formato esférico, com superfície regular e lisa. O tamanho médio das nanopartículas apresentadas foi de 266,7 ± 83,1 nm com índice de polidispersidade (PDI) de 0,105 nm e com a eficiência de encapsulamento de 81,8%. As formulações de nanopartículas apresentaram valores de potencial zeta negativos (-28,31 ± 1,25 mV), explicando sua estabilidade coloidal. O perfil espectral de absorção mostrou que o fotossensibilizador carregado nas nanopartículas não sofre alteração em suas propriedades fotofísicas após o processo de encapsulamento. A ClAlPc encapsulada nas nanopartículas poliméricas apresentou estabilidade física adequada, boas propriedades fotofísicas e fotoquímicas demonstrando a eficiência do carregamento do fármaco. O estudo de liberação de drogas in vitro constatou uma taxa de liberação inicial de forma sustentada e eficiente, típica para os medicamentos carregados nas nanopartículas de PCL. A biocompatibilidade e o efeito fotodinâmico das nanopartículas de PCL-ClAlPc foram avaliados por experimentos in vitro utilizando a linhagem celular HeLa CCL-2, adenorcarcinoma, como modelo biológico. Os estudos mostraram que o sistema não é citotóxico no escuro, mas possuem uma fototoxicidade significativa a 3 μmol.L-1 de concentração de fotossensibilizador encapsulado e 10J.cm-2 de luz, mostrando, nestas condições, diminuição de sobrevida maior que 95%. A localização intracelular demonstrou que as nanopartículas encapsuladas com a cloro- alumínio ftalocianina podem ser internalizadas nas células de adenocarcinoma de maneira efetiva. Com isso, os resultados permitem reforçar a proposta de que as nanopartículas de PCL encapsuladas com ClAlPc é um sistema promissor para o uso em protocolos de aplicação em TFD.
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    Uso da espectroscopia vibracional no infravermelho por transformada de fourier (FT-IR) na análise das alterações dos componentes biomoleculares em pseudomonas aeruginosa e acinetobacter baumannii após a aplicação da terapia fotodinâmica com curcumina
    (2022-11-03) Sakane, Kumiko Koibuchi; Simioni, Andreza Ribeiro; Beltrame Júnior, Milton; Liu, Andréa Santos; Marques, Camila Monteiro Santos; Ferreira, Juliana; São José dos Campos
    Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii demonstram grande resistência intrínseca aos antibióticos, tornando-se necessárias novas abordagens terapêuticas para tratamento. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro a ação antimicrobiana da Terapia Fotodinâmica (TFD) mediada pelo fotossensibilizador curcumina. Os grupos experimentais foram divididos em controle (CTL), curcumina (CUR), Irradiado (IRR) e Terapia Fotodinâmica (TFD). Os grupos CUR e TFD foram incubados com curcumina durante 20 minutos. Em seguida, os grupos TFD e IRR foram irradiados utilizando dispositivo de LED em 450 nm com densidade de potência de 50 mW.cm2, totalizando densidade energética de 30,6 J.cm2.Foram avaliadas as Unidades Formadoras de Colônia (UFC/mL) e as alterações em biomoléculas destes patógenos quantificados pela técnica de FT-IR (Espectroscopia Infravermelha por Transformada de Fourier). Resultados mostram predominância de estrutura a-hélice com diminuição drástica desta proteína e aumento das proteínas de estrutura secundária amida I desordenada e ß folha em P. aeruginosa após TFD em comparação ao grupo CTL. Em contrapartida, a estrutura amida I desordenada predominou em A. baumannii apresentando aumento desta área após TFD, além de aumento de ß folha e diminuição de ?? hélice e voltas. Neste trabalho, o objetivo foi atingindo uma vez que corroboraram com os resultados avaliados através da contagem de Unidade Formadora de Colônia, demonstrando que TFD com curcumina é capaz de reduzir estatisticamente o crescimento bacteriano in vitro. No entanto, o mecanismo para entendimento de TFD em biomoléculas necessitam de novos estudos.