Navegando por Autor "Junqueira, Juliana Campos"
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Item Análise de glicoproteínas de superfície e matriz extracelular em esferoides de células tumorais de mama MCF-7 após terapia fotodinâmica(2025-02-04) Pacheco-Soares, Cristina; Ferreira-Strixino, Juliana; Junqueira, Juliana Campos; Santos, Mariela Inês Batista dos; São José dos CamposO câncer de mama é a forma mais comum de câncer entre as mulheres em todo o mundo. Estima-se que haja milhões de casos diagnosticados a cada ano, com um número significativo de mortes relacionadas à doença. No Brasil, o câncer de mama é o segundo mais diagnosticado, ficando atrás apenas do câncer de pele. A incidência é maior em mulheres entre 40 e 60 anos, mas também pode ocorrer em homens, embora em uma proporção muito menor. O diagnóstico precoce é essencial para melhorar as taxas de sobrevivência e oferecer tratamentos menos invasivos. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma abordagem terapêutica promissora no tratamento do câncer de mama, esta técnica se baseia na utilização de uma substância fotossensibilizante e uma fonte de luz que gera espécies reativas de oxigênio causando danos permanentes aos compartimentos celulares. Os objetivos do trabalho se baseiam em analisar os efeitos da terapia fotodinâmica em marcadores de células epiteliais e na fisiologia de esferoides de células tumorais de mama MCF-7 e na linhagem não tumoral MCF-10A, além de estabelecer uma metodologia para o cultivo tridimensional de células. Utilizou-se linhagens celulares de câncer de mama (MCF-7), células de tecido mamário saudável (MCF-10A) e linhagem de macrófagos (RAW-264.7). Para a TFD foi utilizado a Alumínio Ftalocianina Tetrasulfonada (AlPcS4) na concentração de 5 µM. mL-1 , com tempo de incubação de 1 h em estufa ao abrigo da luz, o tempo de irradiação foi de 1 minuto e 45 segundos no comprimento de onda de 660 nm. Para os testes foram feitos ensaios de taxa de atividade metabólica (MTT), ensaios de glicosilação para determinar a presença de glicoproteínas como manosamina, galactosamina e glucosamina, além de glicoproteínas de matriz extracelular como laminina e fibronectina. Testes de interação celular entre células e macrófagos, fotografias por microscópio eletrônico de varredura (MEV) e marcação de atividade nuclear e mitocondrial por microscopia confocal. Os resultados demonstram a efetividade da TFD nas células de câncer de mama, no qual a morte celular foi detectada em todos os testes feitos, os resultados foram obtidos por meios quantitativos pelo MTT e qualitativos pelas fotografias feitas em microscopia de fluorescência, confocal e de varredura. Conclui-se que as análises pós TFD dos marcadores celulares demonstraram a significativa redução da atividade de células de câncer. Sendo assim, a TFD é eficaz para a redução da população celular cancerígena.Item Antimicrobial Photodynamic Therapy Mediated by Fotenticine and Methylene Blue on Planktonic Growth, Biofilms, and Burn Infections of Acinetobacter baumannii(MDPI) Figueiredo-Godoi, Lívia Mara Alves; Garcia, Maíra Terra; Pinto, Juliana Guerra; Ferreira-Strixino, Juliana; Faustino, Eliseu Gabriel; Pedroso, Lara Luise Castro; Junqueira, Juliana CamposAntimicrobial photodynamic therapy (aPDT) is considered a promising alternative strategy to control Acinetobacter baumannii infections. In this study, we evaluated the action of aPDT mediated by a new photosensitizer derivative from chlorin e-6 (Fotoenticine—FTC) on A. baumannii, comparing its effects with methylene blue (MB). For this, aPDT was applied on A. baumannii in planktonic growth, biofilms, and burn infections in Galleria mellonella. The absorption of FTC and MB by bacterial cells was also evaluated using microscopic and spectrophotometric analysis. The results of planktonic cultures showed that aPDT reduced the number of viable cells compared to the non-treated group for the reference and multidrug-resistant A. baumannii strains. These reductions varied from 1.4 to 2 log10 CFU for FTC and from 2 log10 CFU to total inhibition for MB. In biofilms, aPDT with MB reduced 3.9 log10 CFU of A. baumannii, whereas FTC had no effect on the cell counts. In G. mellonella, only MB-mediated aPDT had antimicrobial activity on burn injuries, increasing the larvae survival by 35%. Both photosensitizers were internalized by bacterial cells, but MB showed a higher absorption compared to FTC. In conclusion, MB had greater efficacy than FTC as a photosensitizer in aPDT against A. baumannii.Item Avaliação da Curcumina na terapia fotodinâmica sobre biofilme de Staphylococcus Aureus resistente à Meticilina: estudo in vitro(2021-10-05) Ferreira-Strixino, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Simioni, Andreza Ribeiro; Junqueira, Juliana Campos; Ribeiro, Isabelle de Paula; Pinto, Juliana Guerra; São José dos CamposO aumento do número de bactérias multirresistentes aos antibióticos em ambientes de prestação de serviços à saúde vem se tornando um problema global de saúde pública. Os biofilmes são estruturas que conferem às bactérias uma maior resistência antimicrobiana. Por isso, os estudos com biofilmes bacterianos tornaram-se objeto de extrema relevância, uma vez que essas estruturas reduzem a penetração dos antibióticos, comprometendo a resposta imunológica do hospedeiro. A terapia fotodinâmica (TFD) é um tratamento que que combina a luz, uma substância fotossensível (FS) e o oxigênio molecular, gerando espécies reativas de oxigênio, levando à morte celular, surge como uma alternativa na inativação desses microrganismos. O objetivo deste trabalho foi avaliar, em estudo in vitro, a ação antimicrobiana da TFD, mediada pela curcumina (Curcuma Longa), em biofilme de cepa Staphylococcus aureus, resistentes à Meticilina (MRSA). Os grupos experimentais foram divididos em Controle, Controle Escuro, Fotossensibilizador (FS), Irradiado (claro), TFD. Os grupos FS e TFD foram incubados com curcumina durante 20 minutos. Em seguida, o grupo TFD foi irradiado utilizando dispositivo de LED em 450 nm, com irradiância de 110 mW/cm2 e fluência de 50 J/cm2. Foram avaliadas a internalização do FS por microscopia confocal, as unidades formadoras de colônia (UFC), a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), o metabolismo bacteriano por meio do Resazurin, a estrutura do biofilme por microscopia eletrônica de varredura (MEV), antes e após a PDT. Os resultados demonstraram que a TFD mediada pela curcumina foi capaz de reduzir o crescimento de biofilme de cepa MRSA, alterar a atividade metabólica e aumentar a produção de ERO. Pela microscopia confocal foi observada a presença da curcumina no biofilme e o MEV demonstrou que a estrutura do biofilme foi alterada após TFD. O estudo mostrou que a TFD é capaz de reduzir o crescimento do biofilme de cepa MRSA, evidenciando a eficácia da curcumina como FS a ser utilizado na TFDItem Curcuma longa L. Extract and Photodynamic Therapy are Effective against Candida spp. and Do Not Show Toxicity In Vivo(Wiley Online Library) Meccatti, Vanessa Marques; Moura, Larissa de Souza; Pinto, Juliana Guerra; Ferreira‐Strixino, Juliana; Hasna, Amjad Abu; Figueiredo-Godoi, Lívia Mara Alves; Junqueira, Juliana Campos; Marcucci, María Cristina; Ramos, Lucas de Paula; Carvalho, Cláudio Antônio Talge; Pucci, César Rogério; Oliveira, Luciane Dias deRadiotherapy induces a higher level of Candida spp. colonization, resulting in oral candidiasis. This study aimed to evaluate the phototransformation potential of the glycolic extract of Curcuma longa (C. longa); the antifungal activity of C. longa, curcumin, and antifungal photodynamic therapy (aPDT) with blue light-emitting diodes “LED” on Candida albicans and Candida tropicalis in vitro; and the toxicity of C. longa and curcumin in Galleria mellonella model. In order to confirm the light absorption capacity of the C. longa extract, its phototransformation potential was evaluated. The antifungal effect of C. longa, curcumin, and aPDT was evaluated over Candida spp. Finally, the toxicity of C. longa and curcumin was evaluated on the Galleria mellonella model. The data were analyzed using the GraphPad Prism 5.0 software considering α = 5%. It was found that C. longa, curcumin, and aPDT using blue LED have an antifungal effect over C. albicans and C. tropicalis. The extract of C. longa 100 mg/mL and curcumin 200 μg/mL do not show toxicity on Galleria mellonella model.Item Efeitos da fotobiomodulação no crescimento de bactérias intestinais(2020-10-02) Silva, Newton Soares da; Ferreira-Strixino, Juliana; Junqueira, Juliana Campos; Supino, Carolina; São José dos CamposIntrodução: A enterocolite necrotizante é uma doença inflamatória intestinal que ocorre no récem-nascido, mais comumente no prematuro. É a principal causa de morte por doenças gastrointestinais em neonatos, e caracterizada pelo desenvolvimento de necrose intestinal difusa no prematuro submetido a estresse. A alta incidência e a falta de estratégias de tratamentos efetivas sugerem que novas abordagens para o tratamento da doença são necessárias. É neste contexto que surge a possibilidade do uso da fotobiomodulação como modalidade terapêutica. Porém, os estudos sobre a utilização da fotobiomodulação em bactérias intestinais são escassos. Objetivo: Estudar o efeito da fotobiomodulação utilizado em parâmetros clínicos no crescimento de bactérias comumente presentes na microbiota do recém nascido. Metodologia: Foram escolhidos 4 cepas de bactérias para serem estudadas, sendo duas pertencentes a microbiota intestinal saudável, Lactobacillus acidophilus e Lactobacillus reuteri e duas baterias patogênicas, Escherichia coli e Staphylococcus aureus. Essas bactérias foram cultivadas em crescimento planctônico e irradiadas com LED em comprimento de onda 660 nm e uma densidade de potência de 0,025 W/cm2, em fluências de 1, 5 e 10 J/cm2. A avaliação do crescimento celular foi realizada através de leituras por absorvância nos períodos de 4h, 24h e 48h após irradiação. Resultados: O crescimento de L. acidophilus, L. reuteri e S. aureus não sofreu biomodulação em nenhuma das fluências. O crescimento de E. coli foi estimulado em 1 J/cm2 quando comparado ao grupo Controle, com significância estatística (p<0,005). Nas demais fluências não houve bioestimulação para a bactéria E.coli. Conclusão: O uso do comprimento de onda de 660 nm nas fluências de 5 J/cm2 e 10 J/cm2 nas bactérias estudadas não levou a uma alteração na velocidade de crescimento significativo.Item Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana com photodithazine® sobre Staphylococcus aureus resistente à Meticilina (MRSA): estudos em biofilmes e modelo experimental de Galleria mellonella(2022-02-24) Souza, Beatriz Müller Nunes; Ferreira-Strixino, Juliana; Simioni, Andreza Ribeiro; Junqueira, Juliana Campos; Pacheco-Soares, Cristina; Miñán, Alejandro Guillermo; Pinto, Juliana Guerra; São José dos CamposInfecções por Staphylococcus aureus são consideradas um grave problema de saúde, gerando altos índices de mortalidade. O tratamento convencional para essas infecções é feito por meio da administração de antibióticos, porém o uso indiscriminado destes fármacos pode selecionar microrganismos resistentes. Por este motivo, é necessário o desenvolvimento de alternativas para a antibioticoterapia, como a Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) que se baseia em um método terapêutico que emprega um fotossensibilizador (FS) e uma fonte de luz com comprimento de onda adequado ao FS, capazes de interagir com o oxigênio molecular formando espécies reativas de oxigênio, responsáveis pela inativação celular. O trabalho teve como objetivo analisar, in vitro e in vivo, a ação da TFDa com Photodithazine® (PDZ) em cepa de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA). Para o método in vitro, o biofilme de S. aureus foi incubado com PDZ nas concentrações de 50 e 75 µg.mL-1 durante 15 minutos e a irradiação foi realizada com as fluências de 25, 50 e 100 J/cm². Foram avaliadas a internalização do FS, a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL), a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), o metabolismo bacteriano, a aderência e a estrutura do biofilme por microscopia eletrônica de varredura, antes e após aplicação da terapia. No método in vivo, inicialmente a cepa foi inoculada em modelos de Galleria mellonella e após a aplicação da TFDa foi analisada curva de sobrevivência, escala de saúde, análise hemócitária e UFC/mL de S. aureus na hemolinfa. Nos resultados in vitro, foi observada a redução bacteriana nas diferentes concentrações de PDZ, destacando os parâmetros de 75 µg.mL-1 de PDZ e 100 J/cm². Já nos resultados in vivo, a TFDa aumentou a sobrevida e estimulou o sistema imune das larvas de G. mellonella infectadas por S. aureus. A TFDa em ambos os métodos foi eficaz, demonstrando o potencial da terapia como uma alternativa no tratamento de infecções bacterianas por MRSA.Item Effects of antimicrobial photodynamic therapy with photodithazine® on methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA): Studies in biofilms and experimental model with Galleria mellonella(Elsevier) Souza, Beatriz Müller Nunes; Miñán, Alejandro Guillermo; Brambilla, Isabelle Ribeiro; Pinto, Juliana Guerra; Garcia, Maíra Terra; Junqueira, Juliana Campos; Ferreira-Strixino, JulianaStaphylococcus aureus infections are a severe health problem due to the high mortality rate. Conventional treatment of these infections is via the administration of antibiotics. However, its indiscriminate use can select resistant microorganisms. Thus, it is necessary to develop alternatives for antibiotic therapy. Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT), a therapeutic method that associates a photosensitizer (PS), a light source with adequate wavelength to the PS, interacts with molecular oxygen generating reactive oxygen species responsible for cell inactivation, is a viable alternative. This work aimed to analyze, in vitro and in vivo, the action of aPDT with PS Photodithazine® (PDZ) on the methicillin-resistant S. aureus (MRSA) strain. In the in vitro method, the S. aureus biofilm was incubated with PDZ at 50 and 75 μg.mL−1 for 15 min, adopting the light dose of 25, 50, and 100 J/cm2. In addition, PS interaction, formation of reactive oxygen species (ROS), bacterial metabolism, adhesion, bacterial viability, and biofilm structure were evaluated by scanning electron microscopy. Subsequently, the strain was inoculated into models of Galleria mellonella, and the survival curve, health scale, blood cell analysis, and CFU/mL of S. aureus in the hemolymph were analyzed after aPDT. In the in vitro results, bacterial reduction was observed in the different PDZ concentrations, highlighting the parameters of 75 μg.mL−1 of PDZ and 100 J/cm2. As for in vivo results, aPDT increased survival and stimulated the immune system of G. mellonella infected by S. aureus. aPDT proved effective in both models, demonstrating its potential as an alternative therapy in treating MRSA bacterial infections.