Navegando por Autor "Silva, Carlos Alberto"
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Item Ação de nanopartículas de prata associada ao Imipenem aplicadas em cepas de Klebsiella pneumoniae com diferentes perfis de susceptibilidade(2023-03-09) Castilho, Maiara Lima; Ferreira-Strixino, Juliana; Silva, Carlos Alberto; Santos, Tiago Gonçalves; Silva, Inglid Fontoura da; Raniero, Leandro José; São José dos CamposKlebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) é uma bactéria oportunista que têm chamado atenção devido à resistência aos antibióticos carbapenêmicos. O tratamento em pacientes com infecções graves tem sido desafiador e novas tecnologias vem sendo investigadas entre elas as nanopartículas de prata (AgNPs) por apresentarem efeitos antimicrobianos. Este trabalho tem como objetivo analisar a associação das AgNPs ao antibiótico carbapenêmico Imipenem (IMP) contra cepas de K. pneumoniae. As AgNPs foram sintetizadas pelo método bottom-up e recobertas com ácido-alfa lipóico. Testes de susceptibilidade antimicrobiana foram realizados em formas planctônicas utilizando quatro cepas de K. pneumoniae com diferentes perfis de susceptibilidade ao IMP. A associação foi testada em biofilme e os ensaios de cristal violeta e resazurina foram realizados para a classificação e análise da concentração inibitória mínima, respectivamente. A redução da concentração do IMP com a associação as nanopartículas (NPs) foi encontrada em todas as cepas estudadas na forma planctônica e o sinergismo entre as AgNPs e o IMP foi demonstrado por meio da análise da concentração inibitória fracionada. Em biofilmes reduções significativas foram observadas e a atividade metabólica foi reduzida em índices =80% caracterizando a concentração inibitória mínima do biofilme (MBIC). Assim, a MBIC para a cepa ATCC foi de 2 µg/mL e para as cepas clínicas com perfil sensível e resistente de 1 µg/mL e para o perfil intermediário 8 µg/mL. A associação proposta no estudo obteve efeito inibitório em diferentes perfis de K. pneumoniae, tanto em formas planctônicas quanto biofilme com um comportamento peculiar no perfil resistente ao IMP.Item Caracterização do biofilme dupla-espécie de Candida Albicans/Candida Krusei: efeito do Voriconazol e da terapia fotodinâmica antimicrobiana(2023-10-17) Costa, Maricília Silva; Simioni, Andreza Ribeiro; Canevari, Renata de Azevedo; Campos, Cláudia Barbosa Ladeira de; S. Junior, José A. da; Nicolau, Juliene Cristina Passos; Silva, Carlos Alberto; São José dos CamposInfecções hospitalares por Candida spp. são frequentes e têm aumentado significativamente, apresentando altas taxas de mortalidade em pacientes imunossuprimidos. Candida albicans é a espécie mais isolada de infecções na corrente sanguínea, sendo considerada a principal do gênero relacionada às infecções. Candida krusei também tem tido notoriedade uma vez que é intrinsecamente resistente ao fluconazol, antifúngico de escolha para os tratamentos de candidemias. Um dos fatores de virulência de C. albicans e C. krusei, além do dimorfismo, é a capacidade de formar biofilmes. Biofilmes são estruturas complexas com células leveduriformes e filamentosas embebidas em uma matriz extracelular rica em polissacarídeos que dificultam a difusão e ação de drogas, e ação do sistema imunológico do seu hospedeiro. Esses biofilmes são difíceis de erradicar, principalmente quando são polimicrobianos. Os tratamentos com antifúngicos apresentam desafios, uma vez que as espécies fúngicas estão cada vez mais resistentes, devido ao seu uso indiscriminado ou profilático. Além disso, muitas vezes o antifúngico de principal escolha para os tratamentos não funciona para todos os microrganismos das coinfecções. Portanto, a compreensão do comportamento dos biofilmes e das interações entre espécies em biofilmes multiespécies é fundamental para o desenvolvimento de estratégias de prevenção e tratamento eficazes para as infecções por Candida spp. Neste trabalho foi caracterizado o biofilme dupla-espécie de Candida spp. visando compreender as interações entre espécies e a importância de aspectos essenciais para a manutenção do biofilme como: adesão, ordem de adição de espécies, meio de crescimento. Ademais, foi analisado se o meio de cultivo e as interações intra-gênero dos biofilmes mistos alterariam o resultado de uma terapia efetivamente comprovada como a Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (TFA). Além disso, verificou-se o comportamento de ambas espécies de Candida, de maneira isolada e em co-culturas, mediante o uso de um antifúngico alternativo, o Voriconazol (VOR). Aspectos como crescimento, formação de biofilmes e biofilmes em diferentes estágios de maturação foram avaliados. A viabilidade das células planctônicas foi feita por meio da análise da absorbância e os biofilmes foram avaliados quanto a atividade metabólica (XTT), biomassa produzida (coloração com Safranina) e morfologia celular por microscopia óptica. Para identificação das espécies de Candida spp. nos biofilmes mistos, foi utilizado o meio de identificação CHROMágar Candida. VOR foi capaz de inibir significativamente o crescimento de Candida spp. e suas co-culturas de modo dose-dependente da concentração celular e do antifúngico, da mesma maneira que também inibiu a viabilidade dos respectivos biofilmes. A caracterização se mostrou de extrema importância, pois esclareceu que ordem de adição de Candida spp. à placa de poliestireno, a pré-adesão e o meio em que o biofilme foi formado (RPMI-1640 ou caldo Sabouraud-dextrose) são fatores relevantes a serem considerados no estudo de um biofilme dupla-espécie de C. albicans e C. krusei. Tais fatores podem interferir na composição final desse biofilme e, também, no resultado de um tratamento, como na TFA que inibiu cerca de 40% dos biofilmes maduros mistos formados em RPMI, mas não teve efeito nos biofilmes mistos formados em meio Sabouraud.Item Comparação da mecânica respiratória e performance muscular entre indivíduos curados de SARS-CoV-2 com tratamento domiciliar e tratamento hospitalar(2022-03-17) Moreira, Natália Galvão Rocha; Costa, Maricília Silva; Lima, Fernanda Pupio Silva; Simioni, Andreza Ribeiro; Silva, Carlos Alberto; Fagundes, Alessandra de Almeida; São José dos CamposApós a descoberta feita pelas autoridades da saúde chinesa, identificando o vírus SARS-CoV-2, houve a necessidade de maiores estudos, tratando-se de uma pandemia. Apesar de alguns indivíduos com COVID-19 apresentarem sintomas leves, ou mesmo permanecerem assintomáticos, observou-se principais características clínicas, afecções de trato respiratório e de alguma forma, também, sinais e sintomas de alterações musculares (Fraqueza muscular no corpo de uma forma geral e no músculo diafragma) durante o período em que o indivíduo estava infectado, em tratamento da COVID-19 e pós. Deste modo, este estudo teve como objetivo avaliar e comparar o comportamento da mecânica respiratória e performance muscular entre os indivíduos pós-covid-19 que foram hospitalizados e daqueles que receberam tratamento domiciliar. Para este estudo foram avaliados 13 indivíduos, na faixa etária de 25 a 65 anos, divididos em 2 grupos: Grupo 1 - 5 participantes pós-diagnóstico de COVID-19 que foram submetidos a internação hospitalar devido a doença, e Grupo 2 - 5 participantes pós-diagnóstico de COVID-19, porém com tratamento domiciliar. Os participantes foram avaliados por sinais vitais, Manovacuometria (Manovacuometro®), Pico de Fluxo expiratório (Peak flow®) e performance muscular (dinamômetro isocinético®). Os dados foram analisados e apresentados em média e desvio padrão (paramétricos). Os dados de mecânica respiratória e dinamometria isocinética foram comparados entre os grupos por meio do teste T-Student não pareado com nível de significância de 5%. Os resultados deste estudo mostram uma diferença significativa apenas na comparação entre as médias de Pressão Inspiratória máxima do Grupo 1 entre os valores preditos (p=0,04), enquanto as outras comparações realizadas não mostraram diferença estatisticamente significativa. Concluindo que mesmo diante de diversas e importantes publicações relatando as diferenças na mecânica respiratória e endurance muscular, essas diferenças não foram estatisticamente significativas neste trabalho, sendo melhor apresentada com um maior número de amostra e menor tempo entre a infecção pela COVID-19 e as avaliações.Item Efeito da terapia fotodinâmica com azul de toluidina sobre biofilme multiespécie de C. albicans E C. krusei(2023-03-08) Costa, Maricília Silva; Soares, Luís Eduardo Silva; Silva, Carlos Alberto; Rodrigues, Ana Beatriz Furtado; São José dos CamposBiofilmes são agrupamentos de microrganismos que garantem vantagens e alto nível de organização, elevado índice de sobrevivência a condições adversas, além de proteção contra a ação de antimicrobianos e evasão do sistema imunológico. Podem ser formados por uma ou mais espécies, sendo que aqueles constituídos por diferentes espécies são mais resistentes a ação das drogas. Até o presente momento estão disponíveis para terapia convencional um pequeno número de antifúngicos, divididos em três classes: polienos, azóis e equinocandinas. São tratamentos que podem apresentar efeitos colaterais como nefrotoxicidade. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma técnica que se baseia na interação da luz com o fotossensibilizador (FS) e oxigênio molecular, acarretando numa reação fotoquímica que gera espécies citotóxicas que promovem morte celular. Há algum tempo vem sendo empregada no tratamento de infecções cutâneas, pois apresenta poucos efeitos adversos para o paciente. Tendo em vista o desafio de tratar infecções causadas por microrganismos resistentes e que estejam acompanhadas de biofilmes, torna-se necessária a busca por tratamentos para infecções com múltiplas espécies, sobretudo que tragam menos riscos. Com isso, o presente estudo visa analisar os efeitos da TFD com azul de toluidina (AT) sobre biofilme multiespécie formado de C. albicans e C. krusei. Para realização dos experimentos as culturas foram cultivadas em ágar Sabouraud e incubadas em estufa bacteriológica por 48h, a 37°C. Após este período, uma amostra de cada espécie foi recolhida e suspensa em solução fisiológica estéril. Como fonte de luz visível foi empregado um diodo emissor de luz (LED) com potência de 0,068 W, iluminando uma área de 0,38 cm², comprimento de onda de 630nm e densidade de energia de 30 J.cm-2, e tempo de irradiação de 2 minutos e 45 segundos. A atividade metabólica do biofilme foi determinada por reação de redução do sal XTT, além de observação ao microscópio. Pode-se concluir que, com base nos dados obtidos no presente estudo, a TFD com AT apresentou efeito sobre o biofilme multiespécie formado, promovendo redução de sua atividade metabólica.Item Efeito dos compostos de organoselênio (PhSe)2, (MeOPhSe)2, (p-Cl-PhSe)2 em biofilmes dupla-espécie de Candida albicans e Candida krusei(2024-07-31) Costa, Maricília Silva; Canevari, Renata de Azevedo; Silva, Carlos Alberto; Calvi, Gabriela de Souza; São José dos CamposO gênero Candida é o mais comumente isolado em culturas de pacientes acometidos com infecções causadas por fungos. A espécie Candida albicans é, entre o gênero, a mais comum, e a espécie Candida krusei, é considerada emergente. Ambas as espécies já demonstram resistência aos fármacos convencionais, como o fluconazol e as equinocandinas. Além disso, ambas são plenamente capazes de formar biofilmes. Biofilmes são estruturas complexas capazes de abrigar mais de uma espécie de microrganismo, alcançando características ainda mais resistentes. Os compostos de organoselênio, principalmente o disseleneto de difenila e derivados, são estruturas químicas simples que apresentam atividade antifúngica, tornando-os promissores para a inibição de biofilmes dupla-espécie. O objetivo da pesquisa foi analisar o efeito dos compostos (PhSe)2, (MeOPhSe)2, (p-Cl-PhSe)2 nas fases de adesão de ambas as espécies em conjunto, e no biofilme misto, nas fases de formação e biofilme maduro. Para a formação dos biofilmes, foram utilizados dois meios, o RPMI-1640 e o Sabouraud dextrose. Para avaliar a viabilidade dos biofilmes, foi mensurada a atividade metabólica, e a diferenciação das espécies por CHROMagar Candida® foi realizada. Os resultados demonstram que os compostos possuem capacidade de inibir os biofilmes dupla-espécie, especialmente nas fases de adesão e formação. O composto (MeOPhSe)2 demonstrou capacidade de inibir a formação dos biofilmes dupla-espécie, obtendo resultados de até 95%, sendo mais significativo que (PhSe)2 e (p-Cl-PhSe)2 que inibiram a formação em 56% e 27% respectivamente. Sendo assim, conclui-se que os compostos de organoselênio são terapias promissoras para o combate destes biofilmes.Item Efeito dos compostos organocalcogêneos disseleneto de difenila (PhSe) 2 e p-cloro disseleneto de difenila (pCl-PhSe) 2 sobre Candida albicans e Candida krusei : inibição da formação de biofilme, crescimento e adesão em células endocervicais humanas (HeLa)(2022-04-05) Costa, Maricília Silva; Simioni, Andreza Ribeiro; Ferreira-Strixino, Juliana; Masuda, Hana Paula; Silva, Bruna Graziele Marques da; Silva, Carlos Alberto; São José dos CamposO gênero Candida é considerado um fungo oportunista por causar infecções em pacientes imunossuprimidos. Sendo capaz de causar infecções superficiais até invasivas, podendo ser fatais. Dentre as espécies do gênero Candida, Candida albicans possui maior prevalência dos casos de candidoses e Candida krusei tem destaque por ser intrinsecamente resistente aos fármacos de escolha para o tratamento de fungemias. O potencial de virulência e patogenicidade desses fungos podem estar associados à sua capacidade de produzir biofilmes em superfícies abióticas e bióticas. O estudo de novas terapias é necessário uma vez que os fármacos de escolha têm se tornado menos eficazes em tratamentos dessas fungemias e sua patogenicidade. Os dois compostos orgânicos sintéticos, compostos organocalcogêneos, disseleneto de difenila (PhSe)2 e pcloro disseleneto de difenila (pCl-PhSe)2, foram utilizados neste estudo para avaliar o comportamento nas condições de crescimento, cinética de crescimento, viabilidade de biofilmes e em adesão em células endocervicais humanas (HeLa) nas duas espécies de Candida, C. albicans e C. krusei. Os dois compostos inibiram o crescimento e a adesão em células HeLa de C. albicans e C. krusei, principalmente na maior concentração utilizada dos compostos (20 µmol. L-1) e esse efeito foi maior com o (PhSe)2. A diminuição da viabilidade de biofilmes em diferentes estágios e a sua formação ocorreu em ambas as Candidas e com os dois compostos de forma dose-dependente. Em todas as condições analisadas neste estudo o composto (PhSe)2 foi significativamente mais eficaz que o (pClPhSe)2 para inibir o desenvolvimento das duas espécies de Candida. Em suma os compostos (PhSe)2 e (pCl-PhSe)2, especialmente (PhSe)2, demonstraram ser potenciais drogas antifúngicas e eficazes contra C. albicans e C. krusei.Item Estudo do efeito do composto p,p'-Methoxi-disseleneto de difenila (MeOPhSe)2 sobre Candida Krusei(2021-06-21) Costa, Maricília Silva; Simioni, Andreza Ribeiro; Ferreira-Strixino, Juliana; Silva Júnior, José Antônio; Siqueira, Victor Mendes de; Silva, Carlos Alberto; São José dos CamposA Candida krusei é uma espécie do gênero Candida que possui resistência intrínseca a antifúngicos comumente utilizados para a profilaxia e tratamento de infecções fúngicas, principalmente da classe dos azóis, como o fluconazol. Embora a C. krusei apresente uma baixa incidência, de aproximadamente 4 % dos casos em pacientes com doenças hematológicas, por conta de sua resistência aos tratamentos convencionais, o quadro clínico do paciente costuma rapidamente se agravar. O presente estudo teve como objetivo estudar o efeito do composto organocalcogênio p,p’-Methoxi-disseleneto de difenila (MeOPhSe)2 sobre C. krusei. Foram realizados ensaios para a determinação do efeito do composto sobre o crescimento celular, a cinética de crescimento, a formação de biofilme e a adesão de C. krusei em células HeLa. Ainda, foi avaliada a toxicidade do composto (MeOPhSe)2, tanto em células HeLa, como em células Vero. Foi observada uma inibição de mais de 95% do crescimento de C. krusei na presença do composto (MeOPhSe)2. O composto foi capaz de reduzir a formação de biofilmes em torno de 76% e alterar a curva de crescimento de C. krusei, prolongando a fase de latência (LAG) e reduzindo o número de células viáveis. Ainda, foi observada uma diminuição da capacidade de adesão de C. krusei em células HeLa, sendo que em concentrações de até 10 µmol.L-1 o composto não apresentou efeito citotóxico, tanto em células Hela, como em células Vero. Estes resultados demonstram o potencial do composto (MeOPhSe)2 como uma promissora terapia antifúngica.Item Local envenomation caused by a bioactive peptide fraction of Bothrops jararaca snake venom induces leukocyte influx in the lung and changes in pulmonary mechanics(Elsevier) Silva, Carlos Alberto; Querobino, Samyr Machado; Silva, Cesar Augusto Melo; Costa, Maricilia Silva; Oliveira, Luis Vicente Franco; Zamuner, Stella ReginaThe crude venom of the Bothrops jararaca snake (Bj-CV) is a complex mixture of biologically active proteins that includes a variety of peptides in the low molecular weight fraction (Bj-PF). We investigated how an intramuscular injection of Bj-CV (1.2 mg kg−1) and Bj-PF (0.24 mg kg−1) influenced lung mechanics and lung and muscle inflammation in male Swiss mice 15 min, 1, 6, and 24 h after inoculation. Pressure dissipation against lung resistive components (ΔP1) rose significantly from 1 to 24 h after Bj-CV and 6–24 h after Bj-PF inoculation. Both Bj-CV and Bj-PF increased the total pressure variation of the lung (ΔPtot) 24 h after injection. Lung static elastance increased significantly after injection in all time periods investigated by Bj-CV and from 6 to 24 h by Bj-PF. Lung static elastance increased significantly after injection in all time periods investigated by Bj-CV and from 6 to 24 h by Bj-PF. Furthermore, intramuscular inoculation of Bj-CV and Bj-PF resulted in an increase in muscle and pulmonary inflammation, as evidenced by an increase in leukocyte influx when compared to the control group. Finally, both Bj-CV and Bj-PF cause acute lung injury, as shown by pulmonary inflammation and decreased lung mechanics. Furthermore, the fact that Bj-PF produces mechanical alterations in the lungs and muscular inflammation implies that non-enzymatic compounds can cause inflammation.Item (MeOPhSe)2, a synthetic organic selenium compound, inhibits virulence factors of Candida krusei: Adherence to cervical epithelial cells and biofilm formation(Elsevier GmbH.) Siqueira, Victor Mendes de; Silva, Bruna Graziele Marques da; Passos, Juliene Cristina da Silva; Pinto, Ana Paula; Rocha, João Batista Teixeira da; Silva, Carlos Alberto; Costa, Maricília SilvaBackground: Systemic candidiasis is produced by Candida albicans or non-albicans Candida species, opportunistic fungi that produce both superficial and invasive infections. Despite the availability of a wide range of antifungal agents for the treatment of candidiasis, failure of therapy is observed frequently, which opens new avenues in the field of alternative therapeutic strategies. Methods: The effects of p,p′ -methoxyl-diphenyl diselenide [(MeOPhSe)2], a synthetic organic selenium (organochalcogen) compound, were investigated on virulence factors of C. krusei and compared with its antifungal effects on the virulence factors related to adhesion to cervical epithelial cell surfaces with C. albicans. Results: (MeOPhSe)2, a compound non-toxic in epithelial (HeLa) and fibroblastic (Vero) cells, inhibited the growth in a dose-dependent manner and changed the kinetics parameters of C. krusei and, most importantly, extending the duration of lag phase of growth, inhibiting biofilm formation, and changing the structure of biofilm. Also, (MeOPhSe)2 reduced C. albicans and C. krusei adherence to cervical epithelial cells, an important factor for the early stage of the Candida-host interaction. The reduction was 37.24 ± 2.7 % in C. krusei (p = 0.00153) and 32.84 ± 3.2 % in C. albicans (p = 0.0072) at 20 μM (MeOPhSe)2, and the effect is in a concentration-dependent manner. Surprisingly, the antifungal potential on adhesion was similar between both species, indicating the potential of (MeOPhSe)2 as a promising antifungal drug against different Candida infections. Conclusion: Overall, we demonstrated the potential of (MeOPhSe)2 as an effective antifungal drug against the virulence factors of Candida species.