Navegando por Assunto "Biofilme"
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Item Avaliação da Curcumina na terapia fotodinâmica sobre biofilme de Staphylococcus Aureus resistente à Meticilina: estudo in vitro(2021-10-05) Ferreira, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Simioni, Andreza Ribeiro; Junqueira, Juliana Campos; Ribeiro, Isabelle de Paula; Pinto, Juliana Guerra; São José dos CamposO aumento do número de bactérias multirresistentes aos antibióticos em ambientes de prestação de serviços à saúde vem se tornando um problema global de saúde pública. Os biofilmes são estruturas que conferem às bactérias uma maior resistência antimicrobiana. Por isso, os estudos com biofilmes bacterianos tornaram-se objeto de extrema relevância, uma vez que essas estruturas reduzem a penetração dos antibióticos, comprometendo a resposta imunológica do hospedeiro. A terapia fotodinâmica (TFD) é um tratamento que que combina a luz, uma substância fotossensível (FS) e o oxigênio molecular, gerando espécies reativas de oxigênio, levando à morte celular, surge como uma alternativa na inativação desses microrganismos. O objetivo deste trabalho foi avaliar, em estudo in vitro, a ação antimicrobiana da TFD, mediada pela curcumina (Curcuma Longa), em biofilme de cepa Staphylococcus aureus, resistentes à Meticilina (MRSA). Os grupos experimentais foram divididos em Controle, Controle Escuro, Fotossensibilizador (FS), Irradiado (claro), TFD. Os grupos FS e TFD foram incubados com curcumina durante 20 minutos. Em seguida, o grupo TFD foi irradiado utilizando dispositivo de LED em 450 nm, com irradiância de 110 mW/cm2 e fluência de 50 J/cm2. Foram avaliadas a internalização do FS por microscopia confocal, as unidades formadoras de colônia (UFC), a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), o metabolismo bacteriano por meio do Resazurin, a estrutura do biofilme por microscopia eletrônica de varredura (MEV), antes e após a PDT. Os resultados demonstraram que a TFD mediada pela curcumina foi capaz de reduzir o crescimento de biofilme de cepa MRSA, alterar a atividade metabólica e aumentar a produção de ERO. Pela microscopia confocal foi observada a presença da curcumina no biofilme e o MEV demonstrou que a estrutura do biofilme foi alterada após TFD. O estudo mostrou que a TFD é capaz de reduzir o crescimento do biofilme de cepa MRSA, evidenciando a eficácia da curcumina como FS a ser utilizado na TFDItem Efeito da terapia fotodinâmica com azul de toluidina sobre biofilme multiespécie de C. albicans E C. krusei(2023-03-08) Costa, Maricília Silva; Soares, Luís Eduardo Silva; Silva, Carlos Alberto; Rodrigues, Ana Beatriz Furtado; São José dos CamposBiofilmes são agrupamentos de microrganismos que garantem vantagens e alto nível de organização, elevado índice de sobrevivência a condições adversas, além de proteção contra a ação de antimicrobianos e evasão do sistema imunológico. Podem ser formados por uma ou mais espécies, sendo que aqueles constituídos por diferentes espécies são mais resistentes a ação das drogas. Até o presente momento estão disponíveis para terapia convencional um pequeno número de antifúngicos, divididos em três classes: polienos, azóis e equinocandinas. São tratamentos que podem apresentar efeitos colaterais como nefrotoxicidade. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma técnica que se baseia na interação da luz com o fotossensibilizador (FS) e oxigênio molecular, acarretando numa reação fotoquímica que gera espécies citotóxicas que promovem morte celular. Há algum tempo vem sendo empregada no tratamento de infecções cutâneas, pois apresenta poucos efeitos adversos para o paciente. Tendo em vista o desafio de tratar infecções causadas por microrganismos resistentes e que estejam acompanhadas de biofilmes, torna-se necessária a busca por tratamentos para infecções com múltiplas espécies, sobretudo que tragam menos riscos. Com isso, o presente estudo visa analisar os efeitos da TFD com azul de toluidina (AT) sobre biofilme multiespécie formado de C. albicans e C. krusei. Para realização dos experimentos as culturas foram cultivadas em ágar Sabouraud e incubadas em estufa bacteriológica por 48h, a 37°C. Após este período, uma amostra de cada espécie foi recolhida e suspensa em solução fisiológica estéril. Como fonte de luz visível foi empregado um diodo emissor de luz (LED) com potência de 0,068 W, iluminando uma área de 0,38 cm², comprimento de onda de 630nm e densidade de energia de 30 J.cm-2, e tempo de irradiação de 2 minutos e 45 segundos. A atividade metabólica do biofilme foi determinada por reação de redução do sal XTT, além de observação ao microscópio. Pode-se concluir que, com base nos dados obtidos no presente estudo, a TFD com AT apresentou efeito sobre o biofilme multiespécie formado, promovendo redução de sua atividade metabólica.Item Efeito dos compostos de organoselênio (PhSe)2, (MeOPhSe)2, (p-Cl-PhSe)2 em biofilmes dupla-espécie de Candida albicans e Candida krusei(2024-07-31) Costa, Maricília Silva; Canevari, Renata de Azevedo; Silva, Carlos Alberto; Calvi, Gabriela de Souza; São José dos CamposO gênero Candida é o mais comumente isolado em culturas de pacientes acometidos com infecções causadas por fungos. A espécie Candida albicans é, entre o gênero, a mais comum, e a espécie Candida krusei, é considerada emergente. Ambas as espécies já demonstram resistência aos fármacos convencionais, como o fluconazol e as equinocandinas. Além disso, ambas são plenamente capazes de formar biofilmes. Biofilmes são estruturas complexas capazes de abrigar mais de uma espécie de microrganismo, alcançando características ainda mais resistentes. Os compostos de organoselênio, principalmente o disseleneto de difenila e derivados, são estruturas químicas simples que apresentam atividade antifúngica, tornando-os promissores para a inibição de biofilmes dupla-espécie. O objetivo da pesquisa foi analisar o efeito dos compostos (PhSe)2, (MeOPhSe)2, (p-Cl-PhSe)2 nas fases de adesão de ambas as espécies em conjunto, e no biofilme misto, nas fases de formação e biofilme maduro. Para a formação dos biofilmes, foram utilizados dois meios, o RPMI-1640 e o Sabouraud dextrose. Para avaliar a viabilidade dos biofilmes, foi mensurada a atividade metabólica, e a diferenciação das espécies por CHROMagar Candida® foi realizada. Os resultados demonstram que os compostos possuem capacidade de inibir os biofilmes dupla-espécie, especialmente nas fases de adesão e formação. O composto (MeOPhSe)2 demonstrou capacidade de inibir a formação dos biofilmes dupla-espécie, obtendo resultados de até 95%, sendo mais significativo que (PhSe)2 e (p-Cl-PhSe)2 que inibiram a formação em 56% e 27% respectivamente. Sendo assim, conclui-se que os compostos de organoselênio são terapias promissoras para o combate destes biofilmes.Item Efeito dos compostos organocalcogêneos disseleneto de difenila (PhSe) 2 e p-cloro disseleneto de difenila (pCl-PhSe) 2 sobre Candida albicans e Candida krusei : inibição da formação de biofilme, crescimento e adesão em células endocervicais humanas (HeLa)(2022-04-05) Costa, Maricília Silva; Simioni, Andreza Ribeiro; Ferreira, Juliana; Masuda, Hana Paula; Silva, Bruna Graziele Marques da; Silva, Carlos Alberto; São José dos CamposO gênero Candida é considerado um fungo oportunista por causar infecções em pacientes imunossuprimidos. Sendo capaz de causar infecções superficiais até invasivas, podendo ser fatais. Dentre as espécies do gênero Candida, Candida albicans possui maior prevalência dos casos de candidoses e Candida krusei tem destaque por ser intrinsecamente resistente aos fármacos de escolha para o tratamento de fungemias. O potencial de virulência e patogenicidade desses fungos podem estar associados à sua capacidade de produzir biofilmes em superfícies abióticas e bióticas. O estudo de novas terapias é necessário uma vez que os fármacos de escolha têm se tornado menos eficazes em tratamentos dessas fungemias e sua patogenicidade. Os dois compostos orgânicos sintéticos, compostos organocalcogêneos, disseleneto de difenila (PhSe)2 e pcloro disseleneto de difenila (pCl-PhSe)2, foram utilizados neste estudo para avaliar o comportamento nas condições de crescimento, cinética de crescimento, viabilidade de biofilmes e em adesão em células endocervicais humanas (HeLa) nas duas espécies de Candida, C. albicans e C. krusei. Os dois compostos inibiram o crescimento e a adesão em células HeLa de C. albicans e C. krusei, principalmente na maior concentração utilizada dos compostos (20 µmol. L-1) e esse efeito foi maior com o (PhSe)2. A diminuição da viabilidade de biofilmes em diferentes estágios e a sua formação ocorreu em ambas as Candidas e com os dois compostos de forma dose-dependente. Em todas as condições analisadas neste estudo o composto (PhSe)2 foi significativamente mais eficaz que o (pClPhSe)2 para inibir o desenvolvimento das duas espécies de Candida. Em suma os compostos (PhSe)2 e (pCl-PhSe)2, especialmente (PhSe)2, demonstraram ser potenciais drogas antifúngicas e eficazes contra C. albicans e C. krusei.Item Estudo do efeito do composto p,p'-Methoxi-disseleneto de difenila (MeOPhSe)2 sobre Candida Krusei(2021-06-21) Costa, Maricília Silva; Simioni, Andreza Ribeiro; Ferreira, Juliana; Silva Júnior, José Antônio; Siqueira, Victor Mendes de; Silva, Carlos Alberto; São José dos CamposA Candida krusei é uma espécie do gênero Candida que possui resistência intrínseca a antifúngicos comumente utilizados para a profilaxia e tratamento de infecções fúngicas, principalmente da classe dos azóis, como o fluconazol. Embora a C. krusei apresente uma baixa incidência, de aproximadamente 4 % dos casos em pacientes com doenças hematológicas, por conta de sua resistência aos tratamentos convencionais, o quadro clínico do paciente costuma rapidamente se agravar. O presente estudo teve como objetivo estudar o efeito do composto organocalcogênio p,p’-Methoxi-disseleneto de difenila (MeOPhSe)2 sobre C. krusei. Foram realizados ensaios para a determinação do efeito do composto sobre o crescimento celular, a cinética de crescimento, a formação de biofilme e a adesão de C. krusei em células HeLa. Ainda, foi avaliada a toxicidade do composto (MeOPhSe)2, tanto em células HeLa, como em células Vero. Foi observada uma inibição de mais de 95% do crescimento de C. krusei na presença do composto (MeOPhSe)2. O composto foi capaz de reduzir a formação de biofilmes em torno de 76% e alterar a curva de crescimento de C. krusei, prolongando a fase de latência (LAG) e reduzindo o número de células viáveis. Ainda, foi observada uma diminuição da capacidade de adesão de C. krusei em células HeLa, sendo que em concentrações de até 10 µmol.L-1 o composto não apresentou efeito citotóxico, tanto em células Hela, como em células Vero. Estes resultados demonstram o potencial do composto (MeOPhSe)2 como uma promissora terapia antifúngica.