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    Síntese e Caracterização de Au@SPIONs Funcionalizadas com EGF para Diagnóstico do Câncer de Mama e Tratamento por Terapias Fotodinâmica e Fototérmica
    (2023-03-06) Raniero, Leandro José; Soares, Cristina Pacheco; Oliveira, Ivone Regina de; Tada, Dayane Batista; Campos, Andrea Porto Carreiro; Cândido, Marcela Aparecida; São José dos Campos
    O câncer de mama é caracterizado pela presença de neoplasias malignas, com alto grau de proliferação e, sendo a principal causa de morte em mulheres nos últimos anos. Os tratamentos disponíveis são geralmente agressivos e com baixa eficácia, dependendo do subtipo molecular. Sendo assim, se faz necessário desenvolver novos métodos de detecção, quando a nanotecnologia pode proporcionar diagnósticos precoces e tratamentos efetivos. As nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro (Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles, SPIONs) podem ser revestidas com fina camada de ouro e funcionalizadas, o que potencializa sua aplicação biomédica para formação de um biossensor sensível, rápido e preciso como agentes de terapia do câncer. As terapias fotodinâmica (TFD) e fototérmica (TFT) têm sido utilizadas no tratamento do câncer, sendo o seu mecanismo de ação baseado na interação de moléculas fotossensíveis com radiação de comprimento de onda adequado, na presença de oxigênio molecular. No entanto, cada passo deve ser controlado com precisão para obter um tratamento eficiente. Nesse contexto, a presente tese propõe a síntese de SPIONs pelo método de coprecipitação, o revestimento com ouro para obter Au@SPIONs, a funcionalização com a proteína EGF e o fotossensibilizador Clorina e6 para produção de Nanossondas Teranósticas (NTs) e sua aplicação na TFD e TFT. As dimensões das nanoestruturas foram caracterizadas por tamanhos físico e hidrodinâmico, bem como a morfologia, estabilidade coloidal, estrutura cristalina, composição química e propriedades magnéticas. Posteriormente foram realizados estudos in vitro para avaliação da atividade antitumoral e toxicológica da TFT e TFD nas linhas celulares MCF 10A e MDA-MB-468. As NTs apresentaram internalização no citoplasma e no núcleo de algumas células da linhagem celular MDA-MB-468. Após os tratamentos com as NTs obteve-se percentuais significativos de apoptose na linhagem celular MDA-MB-468 e níveis crescentes de ERO?s após TFD. No estudo com a cultura 3D da linhagem celular MDA-MB-468, as NTs apresentaram resultados que corroboraram com o estudo inicial 2D, sendo observado a capacidade de penetração das NTs nos esferoides com a variação do tempo de incubação.
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    Specific nanomarkers fluorescence: in vitro analysis for EGFR overexpressed cells in triple-negative breast cancer and malignant glioblastoma
    (Elsevier) Vieira, Paula Fonseca Antunes; Jesus, Viviane Paula dos Santos; Cândido, Marcela Aparecida; Pacheco-Soares, Cristina; Castilho, Maiara Lima; Raniero, Leandro José
    Background: Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR receptor) is encoded by the EGFR gene. EGFR receptor signaling pathways are activated by EGF protein, regulating cell actions. Overexpression of EGFR receptor may be linked to malignancies with a poor prognosis. As a result, EGFR receptor is being studied for a variety of tumor diagnostics, spurring the development of innovative approaches to increase quality and efficiency. Nanomaterials can recognize cancer cells by specifically targeting of molecular pathways, underscoring the importance of nanomedicine. In this study, we synthesized EGFR-specific nanomarkers by functionalizing EGF protein and Chlorin e6 in gold nanoparticles. These nanoparticles use active targeting to deliver EGF protein to EGFR receptor, and Chlorin e6 serves as a fluorescent marker molecule Methods: Nanomarkers were examined in vitro in MDA-MB-468 and M059J cell lines. Confocal microscopy and flow cytometry were used to examine the distribution, uptake, internalization, and fluorescence intensity of nanomarkers in vitro Results: The results show that both lines examined accumulate nanomarkers. However, MDA-MB-468 had the highest intensity due to its EGFR receptor overexpression properties Conclusion: The findings point to ideal properties for detecting EGFR receptor overexpressed cells.
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    Synthesis of iron oxide nanoparticles stabilized with sodium citrate and TMAOH
    (CDRR Editors) Cândido, Marcela Aparecida; Rost, Nathanne Cristina Vilela; Ferreira, Virginia Rezende; Raniero, Leandro José
    Iron oxide nanoparticles (IONPs) represents a class of magnetic and biocompatible nanomaterials that have been widely used in research and medical applications, such as hyperthermia studies, as contrast agents for magnetic resonance imaging, biosensors, among others. However, their application depends on factors as surface properties, size, and morphology being appropriately balanced. IONPs can be obtained by different synthesis methods, however, chemical coprecipitation represents a simpler, easier and faster route, in which aqueous solutions of precursors containing iron (Fe3+) and ferrous (Fe2+) ions are alkalized under control of temperature and pH. This study proposes to synthesize iron oxide nanoparticles by the chemical coprecipitation methodand to stabilize them with sodium citrate (IONPs-CIT) and tetramethylammonium hydroxide (IONPs-TMAOH). Furthermore, to characterize the hydrodynamic diameter and the Zeta Potential of the samples by Dynamic Light Scattering. The cytotoxicity of IONPs-CIT in the MDA-MB-468 cell line was evaluated through the analysis of mitochondrial activity.