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    Análise da saliva de indivíduos diagnosticados com transtorno do espectro autista por FT-IR e Elisa
    (2022-02-09) Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Lima, Fernanda Pupio Silva; Almeida, Janete Dias; Pinto, Mayara Moniz Vieira; Raniero, Leandro José; São José dos Campos
    Transtorno do Espectro Autista (TEA) é uma desordem de desenvolvimento neurológico, de difícil diagnóstico. Pesquisas avaliam o uso da espectroscopia aplicada à análise de fluidos orgânicos, como a saliva. Este estudo objetivou avaliar a eficácia da espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR) como ferramenta para o diagnóstico precoce de TEA em amostras de saliva, comparada ao teste imunoenzimático (ELISA) para quantificação da lactoferrina. Foram analisadas amostras de saliva de 38 voluntários, 19 TEA (Grupo A) e 19 Neurotípicos (Grupo N). Após centrifugação, 20 µL de sobrenadante foi depositado sobre janelas de fluoreto de cálcio (CaF 2 ) e desidratado por 10 min. Os espectros FT-IR foram obtidos por espectrofotômetro acoplado a um microscópio, no intervalo espectral de 4000 - 900 cm -1 , com 32 varreduras e resolução espectral de 4 cm -1 . Foram coletados 304 espectros e suas médias submetidas à análise de segunda derivada e deconvolução de bandas. A amostra apresentou predomínio do sexo masculino e equilíbrio entre as faixas etárias. No grupo A, houve predomínio de partos prematuros, idade materna avançada e prevalência de doenças pré-natais. Nos indivíduos com TEA, a idade média para diagnóstico era 5,3 ± 2,2 anos e o início da intervenção foi de 4,4 ± 1,4 anos. Os resultados do teste imunoenzimático não apresentaram significância estatística. Com relação a Espectroscopia FT-IR, os resultados permitiram verificar diferentes bandas de absorção e amplitude de suas áreas, para ambos os grupos. No grupo A, foram encontradas cinco bandas, 1521, 1570, 1599, 1684 e 1735 cm-1, ausentes nos espectros do grupo N, enquanto que as bandas 1493, 1515 e 1582 cm-1 foram encontradas somente nos espectros do grupo N, regiões que correspondem, respectivamente, a proteínas, amida II, amida I e estiramento C=O de ésteres de lipídios. Em relação a amplitude das áreas, a banda 1667 cm -1 apresentou maior área no grupo A, enquanto as bandas 1543 e 1637 cm -1 apresentaram maior área no grupo N. Conclui-se que a Espectroscopia FT-IR é uma ferramenta promissora para o diagnóstico precoce de Transtorno do Espectro Autista em amostras de saliva, identificando alterações na composição desse fluído, principalmente proteínas, entre indivíduos diagnosticados com TEA e neurotípicos.
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    Plasmatic and salivary biomarkers for early diagnosis of Autism Spectrum Disorder: a systematic review
    (CDRR Editors) Pinto, Mayara Moniz Vieira; Arisawa, Emília Angela Lo Schiavo; Martins, Rodrigo Alvaro Brandão Lopes; Raniero, Leandro José
    Autistic Spectrum Disorder (ASD) is considered a neurological development disorder characterized by different degrees of deficit in communication, social interaction, and learning, accompanied by repetitive and stereotyped patterns of behavior. ASD diagnosis is extremely complex due to the still unknown etiopathology, the diversity of symptoms presented by the individuals, and it is carried out solely from clinical observations of the individual's behavior. This study aims to review the main plasma and salivary biomarkers currently studied for the early diagnosis of ASD. For this systematic literature review, we used the online data directory and database “Google Scholar” and “Publish Medliner” (PubMed), respectively, with the descriptors: “Autism”, “Biomarker”, “Diagnostic”, “Saliva”, and “Plasma”. We selected 564 studies in PubMed and 185 in Google Scholar, by screening the titles. After reading the abstracts, we excluded 647 studies, either due to irrelevance or because they were review articles, genetics studies or did not use plasma or saliva samples. The remaining 102 original studies were evaluated in full, and 83 were excluded. Thus, nineteen complete articles that met the inclusion criteria were included in the qualitative analysis. Results identified Cortisol, glutamate/GABA, glutathione, Lipid peroxidation, markers of oxidative stress, mitochondrial dysfunction, and pro-inflammatory cytokines, especially IL-6, as the main plasma and salivary biomarkers currently studied for the early diagnosis of ASD. However, considering that several results were controversial and inconclusive, further studies are needed to validate specific biomarkers as diagnostic tools. The current findings encourage studies that are controlled, multicentric, prospective, and of greater diagnostic precision.