Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica

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Navegando Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica por Autor "Campos, Andrea Porto Carreiro"

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    Aplicação de bionanossensor para diagnóstico da superexpressão do EGFR in vitro
    (2023-03-07) Raniero, Leandro José; Soares, Cristina Pacheco; Campos, Andrea Porto Carreiro; Vieira, Paula Fonseca Antunes; São José dos Campos
    O Receptor do Fator de Crescimento Epidérmico (EGFR) é codificado pelo gene EGFR. A superexpressão do receptor EGFR pode estar ligada a malignidades com pior prognóstico e suas vias de sinalização EGFR são ativadas pela proteína EGF, regulando as ações celulares. Como resultado, o receptor EGFR está sendo estudado para uma variedade de diagnósticos de tumores, estimulando o desenvolvimento de abordagens inovadoras para aumentar a qualidade e a eficiência dos exames diagnósticos. Os nanomateriais podem reconhecer células cancerígenas por direcionamento específico de vias moleculares, ressaltando a importância da nanomedicina. Neste estudo, bionanossensores foram sintetizados para detecção da EGFR, pelo processo de funcionalização da proteína EGF e Clorina e6 (Ce6) em nanopartículas de ouro. Essas nanopartículas utilizam o direcionamento ativo para entrega da proteína EGF ao receptor EGFR, e a Ce6 serve como uma molécula marcadora fluorescente. Bionanossensores foram examinados in vitro em linhagens celulares MDA-MB-468 e M059J. A distribuição, absorção, internalização e intensidade de fluorescência dos bionanossensores in vitro foi determinada por Microscopia Confocal e Citometria de Fluxo. Os resultados mostram que ambas as linhagens celulares analisadas acumulam bionanossensores, no entanto, a MDA-MB- 468 possui maior intensidade devido às suas propriedades de superexpressão do receptor EGFR. Os achados apontam para propriedades ideais para a concepção de um diagnóstico inovador, cuja acurácia se dará pela detecção de células superexpressas do receptor de EGFR em estágios precoces do câncer.
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    Síntese e Caracterização de Au@SPIONs Funcionalizadas com EGF para Diagnóstico do Câncer de Mama e Tratamento por Terapias Fotodinâmica e Fototérmica
    (2023-03-06) Raniero, Leandro José; Soares, Cristina Pacheco; Oliveira, Ivone Regina de; Tada, Dayane Batista; Campos, Andrea Porto Carreiro; Cândido, Marcela Aparecida; São José dos Campos
    O câncer de mama é caracterizado pela presença de neoplasias malignas, com alto grau de proliferação e, sendo a principal causa de morte em mulheres nos últimos anos. Os tratamentos disponíveis são geralmente agressivos e com baixa eficácia, dependendo do subtipo molecular. Sendo assim, se faz necessário desenvolver novos métodos de detecção, quando a nanotecnologia pode proporcionar diagnósticos precoces e tratamentos efetivos. As nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro (Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles, SPIONs) podem ser revestidas com fina camada de ouro e funcionalizadas, o que potencializa sua aplicação biomédica para formação de um biossensor sensível, rápido e preciso como agentes de terapia do câncer. As terapias fotodinâmica (TFD) e fototérmica (TFT) têm sido utilizadas no tratamento do câncer, sendo o seu mecanismo de ação baseado na interação de moléculas fotossensíveis com radiação de comprimento de onda adequado, na presença de oxigênio molecular. No entanto, cada passo deve ser controlado com precisão para obter um tratamento eficiente. Nesse contexto, a presente tese propõe a síntese de SPIONs pelo método de coprecipitação, o revestimento com ouro para obter Au@SPIONs, a funcionalização com a proteína EGF e o fotossensibilizador Clorina e6 para produção de Nanossondas Teranósticas (NTs) e sua aplicação na TFD e TFT. As dimensões das nanoestruturas foram caracterizadas por tamanhos físico e hidrodinâmico, bem como a morfologia, estabilidade coloidal, estrutura cristalina, composição química e propriedades magnéticas. Posteriormente foram realizados estudos in vitro para avaliação da atividade antitumoral e toxicológica da TFT e TFD nas linhas celulares MCF 10A e MDA-MB-468. As NTs apresentaram internalização no citoplasma e no núcleo de algumas células da linhagem celular MDA-MB-468. Após os tratamentos com as NTs obteve-se percentuais significativos de apoptose na linhagem celular MDA-MB-468 e níveis crescentes de ERO?s após TFD. No estudo com a cultura 3D da linhagem celular MDA-MB-468, as NTs apresentaram resultados que corroboraram com o estudo inicial 2D, sendo observado a capacidade de penetração das NTs nos esferoides com a variação do tempo de incubação.