Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica

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Análise do comportamento do sistema nervoso autônomo de alunos do curso de formação em controle de tráfego aéreo durante a prática simulada de não radar
(2008-08-01) Carvalho, Regiane Albertini de; Cunha, Tatiana de Sousa da; Pacetti, Giovani Arnaldo; Silveira, Nelson José Freitas da; São José dos Campos
Objetivo. O Objetivo deste estudo foi analisar o comportamento do sistema nervoso autônomo através da análise da variabilidade da freqüência cardíaca em alunos do curso de formação militar na especialidade de controle de tráfego aéreo (BCT), na Escola de Especialista de Aeronáutica (EEAR) em Guaratinguetá. Métodos.Foram analizados 19 alunos do sexo masculino, saudáveis, com idade de 21,0 ± 1,52 anos. Os alunos foram submetidos a dois protocolos diferentes: a) Repouso; b) Prática Simulada de não Radar. Os intervalos RR foram registrados durante os 2 protocolos através de um monitor cardíaco (polarS810) e analisados através da Transformada Wavelet Contínua. Resultados. Observou que a energia calculada através da área sob a curva entre 0,04 e 0,15 Hz (LF) foi igual a 852.46 ± 519.67 para o comportamento simpático durante a prática simulada de não radar e de 332.4 ± 286.58 para o simpático durante o repouso. Quando analisou de forma estatística, esses dados apresentaram difirenças significativas p+0.05. Analisando o comportamento da freqüência cardíaca (FC) nas situações de prática simulada de não radar e repouso obtivemos 86.424 ± 12.365 e 60.8050 ± 7.3017, que apresentaram diferença significativas p=0.05. Os valores de inrensidade de energia para a faixa de freqüência de 0.15 a 0.40 Hz (HF) que representa a influiência do Sistema Nervoso Parassimpático sobre o controle da FC, foram encontrados durante a prática simulada de não radar 379.38 ± 413.76 e para o repouso 244.77 ± 260.23. Esses resultados não apresentaram diferenças, demonstrando que o ramo parassinpático do SNA não sofre grandes estimulações nas situações supracitadas, adotando como significância p=0.05. Investigando a razão (LF/HF) encontramos durante a prática simulada de não radar uma razão de 3.1534 ± 1.3141 e para o repouso a razão de 1.1069 ± 0.5329, observamos diferenças significativas p = 0.05 entre as razões impulsionadas pela grande estimulação do ramo simpático durante a prática simulada de não radar. Quando analisamos de forma isolada os dados da prática silulada de não radar para área simpática e para área parassimpatica, observamos diferença entre o ramo simpático e parassimpático do SNA nesta situação e os dados coletados no repouso também analizasoa de forma isolada para área simpática e parasimpática não indicaram diferença estatística adotando como significância p = 0.05, evidenciando um bom equilíbrio do SNA reforçando os valores expressos pela razão anteriosmente citados. Conclusão. Cintudo, podemos salientar que a transformada Wavelet Contínua possibilitou uma análise no domínio da freqüência do comportamento do SNA, se mostrando uma ferramenta eficaz na análise da VFC.
Regimento dos Programas de Pós-Graduação Vinculados ao Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento Universidade do Vale do Paraíba: aprovado pela Resolução Nº 14/Consun/2019 – para vigência a partir do ano de 2020 (OFÍCIO 08/Dir. IP&D/2019)
(Univap, 2019) Universidade do Vale do Paraíba; Univap; Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento; São José dos Campos
Perfil da temperatura induzida pela radiofrequência em tecidos biológicos ex vivo aferido pela termografia infravermelha computadorizada
(2020) Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; Lima, Mário Oliveira; Marcos, Rodrigo Labat; Conceição, Francileine Rodrigues da; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; São José dos Campos
A radiofrequência (RF) é um recurso utilizado no tratamento da flacidez e gordura localizada, sendo considerada eficaz e de baixo custo. A termografia infravermelha computadorizada (TIC) tem se demonstrado como uma ferramenta não invasiva de diagnóstico eficaz, que permite o monitoramento em tempo real das variações de temperatura (T) nos tecidos biológicos. Buscando estudar os efeitos da RF nos tecidos, este estudo tem por objetivo avaliar variações na massa, espessura e validar a TIC para detecção de alterações de T, antes e após aplicação da RF, em tecidos biológicos ex vivo. Foram utlizados17 corpos de prova (Susscrofa domesticus), peso entre 0,260 e0,646Kg, alocados em dois grupos: G1-potência de 60 W, seis animais, e G2-potência de 120 W, 11 animais. As aplicações de RF foram realizadas com aparelho de RF monopolar em 27,12 MHz, por 5 minutos, em uma área de 100 cm². Foram coletados dados referentes à massa, espessura e aferidas as temperaturas superficial e lateral com auxílio de termômetro infravermelho(TI), enquanto o perfil de profundidade térmica foi avaliado pela TIC (ThermaCam S65HS, FLIR ®) antes e após o tratamento com RF. Os dados coletados da TIC foram analisados pelo software ThermaCAM Researcher Pro 2.8 SR-1. Os demais resultados foram analisados utilizando o programa BioStat 5.3. Os resultados demonstraram variação média do peso dos corpos de prova antes e após a RF de 1,83±1,34g (p= 0,02) em G1 e 2,36±1,29g(p<0,0001) em G2; não houve variação da espessura em nenhum dos grupos estudados. As temperaturas aferidas com TI na região superficial dos corpos de prova apresentaram aumento de 13,6±6,01º C (p= 0,0039) em G1 e de 32,82±15,77º C(p<0,0001) emG2, após a RF. As imagens obtidas pelo TIC, após a RF, demonstraram que as áreas com maior T também se localizavam na superfície, com aumento de 12,15º C em G1 (p= 0,0083) e 22,91º C em G2 (p= 0,0033). Além disso, a avaliação dos termogramas demonstrou tendência de queda das temperaturas nas camadas mais profundas dos corpos de prova. Os resultados deste estudo pioneiro permitem concluir que tanto a TIC quanto o termômetro infravermelho demonstraram elevação da temperatura nos corpos de prova após a aplicação da RF, principalmente na região superficial das amostras estudadas. Alerta-se, ainda, que quando utilizada a potência de 120 W, detectou-se drástico aumento de temperatura na epiderme, que pode causar desconforto ou até mesmo queimaduras ao paciente. Assim, a TIC permite avaliar a profundidade do aquecimento induzida pela aplicação da RF em tecidos ex vivo, com valores semelhantes ao obtidos com o termômetro infravermelho, essa aplicabilidade pode ser utilizada para o monitoramento de procedimentos clínicos na área da estética.
Estudo da terapia fotodinâmica utilizando alumínio ftalocianina tetrasulfonada: uma análise química, física e biológica dos componentes terapêuticos
(2020-02-05) Soares, Cristina Pacheco; Castilho, Maiara Lima; Vasconcellos, Luana Marotta Reis de; Godoi, Bruno Henrique; Ferreira-Strixino, Juliana; São José dos Campos
A terapia fotodinâmica (TFD) é uma técnica descoberta no início do século XX, que utiliza a luz como catalisador de uma reação de oxidação no órgão, tecido ou célula alvo. Para que ocorra a reação fotodinâmica é necessário oxigênio ao nível molecular, fotossensibilizante e uma fonte de luz. A técnica é utilizada em inúmeros tratamentos estéticos e dermatológicos sendo atualmente empregue como tratamento antimicrobiano e antifúngico, em infecções virais causadas pelos vírus Herpes e Papilloma, além de patologias como periodontite, tratamento de leishmaniose cutânea e alguns casos de câncer. Contudo, um dos obstáculos no emprego da técnica como tratamento contínuo ou de longa duração para doenças de alta complexidade, é o possível mecanismo de resistência às drogas, que as células podem apresentar quando são expostas ao fármaco fotossensibilizante por sucessivas vezes ou longos períodos, há ainda a divergência dos métodos aplicados em estudos e procedimentos clínicos, resultando assim em respostas variadas e fragilidade nos resultados divulgados, acarretando inúmeros questionamentos sobre a sua aplicabilidade nos procedimentos clínicos. O presente estudo tem por finalidade avaliar a capacidade de sobrevivência de células da linhagem HEp-2 após a TFD e evidenciar critérios para elaboração de um guia de boas práticas para aplicação da TFD utilizando o fotossensibilizante de segunda geração AlPcS4. Assim utilizando análises espectroscópicas e testes colorimétricos foi possível delinear a concentração de trabalho do fotossensibilizante de 5 µM em conjunto da densidade mínima de energia necessária para ativa-lo de 5 J/cm². Após determinar os parâmetros para os testes, utilizou-se os ensaios colorimétricos e imunológicos em conjunto com a quantificação gênica das HSP’s e da enzima SOD2, e para avaliara a resposta biológica pós a TFD. Os resultados dos ensaios colorimétrico, coloração de cristal violeta, coloração de vermelho neutro e conversão do sal de MTT, demonstram uma redução na viabilidade celular após a TFD consolidando a escolha dos parâmetros de concentração do fotossensibilizante e dose de energia. Já a avaliação imunológica das citocinas IL-6 e TNF – a não permitiu uma conclusão clara sobre o ambiente tumoral pós a TFD devido ao baixo poder de correlação entre os resultados obtidos. Por fim a expressão genica demonstrou redução significativa dos genes das HSP’s, glicoproteínas e enzima SOD2, evidenciando um potencial destrutivo da TFD, sugerindo que o tratamento uma vez padronizado não pode gerar clones resistentes a terapia, assegurando assim sua eficácia utilizando a linhagem celular HEp-2 como objeto de estudo. Acredita-se que este estudo fornece critérios para implantação de práticas mais eficientes utilizando a terapia fotodinâmica.
Avaliação do processo inflamatório no tendão do calcâneo utilizando a termografia infravermelha
(2020-02-19) Lima, Mário Oliveira; Lima, Fernanda Pupio Silva; Carvalho, Regiane Albertini de; Pinto, Ana Paula; Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; São José dos Campos
As lesões tendíneas tem aumentado significativamente nas últimas décadas pelo aumento da prática de atividade física, mas também acometem indivíduos sedentários e podem estar relacionadas às atividades laborais. Elas acarretam grande impacto socioeconômico, uma vez que geram gastos tanto em tratamento quanto a afastamento da rotina de trabalho, a atividades de lazer e de vida diária. O tendão calcâneo (TC) é o segundo tendão mais afetado e é o mais largo e forte tendão do corpo humano, com a maior capacidade de suportar carga, importante para o movimento funcional e rápido. Porém, mesmo com essa característica de tolerar estresse, o TC é vulnerável às lesões por esforço repetitivo. Tendinopatia é uma síndrome clínica relacionada ao tendão e tecidos ao redor, podendo ser caracterizada por inflamação, deformação, microrrupturas ou rupturas. O diagnóstico atual da tendinopatia do TC é baseado principalmente na história, exame clínico e exames de imagem, como o ultrassom e ressonância magnética. Entretanto, a termografia por infravermelho é um recurso promissor para diagnóstico de doenças inflamatórios pelos seus benefícios de agilidade no exame e processamento de dados, não emiti radiação ionizante e pode ser empregado em praticamente qualquer voluntário. Por este motivo, o objetivo do trabalho foi identificar um processo inflamatório no tendão calcâneo por meio de testes e exames convencionais, e associar com a termografia infravermelha comparando indivíduos com e sem tendinopatia do calcâneo e assim demonstrar que esta técnica é válida para diagnóstico de doenças inflamatórias do tendão. Participaram do estudo 28 indivíduos: 15 no grupo controle (GC) e 13 no grupo tendinopatia (GT). Os participantes passaram por vários exames clínicos e funcionais (testes de sensibilidade à palpação, sinal do arco, dorsiflexão passiva com a articulação do joelho em flexão, Test Hospital Royal London, dor referida, algometria, Teste da Ponta dos Pés e Single Leg Hop Test) e de imagem convencional (ultrassom) para o diagnóstico de tendinopatia e pela avaliação da câmera termográfica por infravermelho. Os resultados demonstraram que sujeitos do GC praticamente não apresentaram alterações na região do TC, entretanto, os indivíduos do GT apresentaram várias alterações relacionadas a parte estrutural, clínica e funcional, confirmando o diagnóstico de tendinopatia. O padrão de temperatura na região do TC (diferença entre os membros) encontrado no GC é de 0,38ºC (±0,02), enquanto que no GT, essa diferença de temperatura foi em média de 2,15ºC (±0,5), correspondendo aos demais resultados obtidos por meio de teste clínicos, funcionais e de imagem de ultrassom, os quais indicaram injúrias do TC. O presente trabalho é pioneiro na área de diagnóstico do tendinopatia TC por termografia infravermelha, os quais os resultados demonstraram a robustez da técnica de Termografia Infravermelha para a identificação rápida e eficiente de tendinopatia do TC, uma vez que o aumento da temperatura foi consistente com os sinais clínicos da inflamação (calor, dor, edema e perda de função).
Aplicação das técnicas de PCR, micronúcleo e espectroscopia FT-IR no diagnóstico do HPV na prevenção do câncer cervical
(2020-02-28) Canevari, Renata de Azevedo; Soares, Luís Eduardo Silva; Castilho, Maiara Lima; Batista, Nelson Jorge Carvalho; Koga-ito, Cristiane Yumi; Viana, Magda Rogéria Pereira; Raniero, Leandro José; São José dos Campos
O câncer de colo de útero é considerado o terceiro tumor mais frequente e a segunda causa de mortalidade de mulheres no Brasil, sendo considerado um problema de saúde pública. A infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV) é um dos principais fatores de risco que contribui para o desenvolvimento desta neoplasia. O principal método para o diagnóstico é a análise citológica pelo exame de Papanicolaou, mas a alta taxa de casos falso-negativos inviabiliza uma avaliação adequada, sendo importante o uso de técnicas auxiliares de detecção do HPV e, consequentemente, no diagnóstico desta doença. Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia, aplicabilidade, sensibilidade e especificidade dos métodos alternativos para a detecção do HPV na prevenção do câncer cervical. As técnicas MN e FT-IR são indiretas, mas podem fornecer resultados úteis na detecção do HPV em pacientes submetidas ao exame citopatológico. As amostras de fluido cervical foram obtidas de 50 pacientes com citológica normal, posteriormente analisada pela PCR, teste de MN e análise de FT-IR. A análise molecular consistiu de extração do DNA das amostras endocervicais pelo protocolo QIAamp® Virus Spin kit (Qiagen), seguida da realização da PCR do gene viral L1 utilizandose os iniciadores MY09 e MY11. As amostras foram divididas com base nos resultados da PCR em dois grupos, HPV positivo (sete amostras) e HPV negativo (43 amostras). As análises dos testes de MN das amostras ectocervicais foram realizadas pelas leituras das frequências absoluta (N) e relativa (%), obtidas as médias, desvios padrões e analisadas pelos testes Shapiro-Wilk, Mann-Whitney e Qui-quadrado (X2). As análises de FT-IR das amostras endocervicais foram realizadas no equipamento Spectrum 400. A partir da matriz de covariância foram obtidos os componentes principais (PCs), e por meio das análises discriminantes linear e quadrática, supervisionada pelos resultados da PCR (grupos HPVpositivo e HPV negativo), foram calculados os valores de sensibilidade e especificidade. Os resultados das análises de PCR das 50 amostras permitiram validar 43 exames citológicos, mas sete amostras de resultado citológico negativo estavam infectadas pelo HPV. Os testes de MN mostraram maiores frequências de MN em amostras com HPV positivo, fatores relacionados a idade, ao abortamento e o uso de bebidas alcoólicas. Os espectros de análise FT-IR mostraram variações nas bandas de DNA e proteínas em amostras com alta frequência de MN, provavelmente devido à presença de histonas nucleossômicas e DNA que formam o MN. A análise dos componentes principais dos espectros de FT-IR não foi capaz de separar eficientemente as amostras HPV positivas das HPV negativas, mostrando-se inespecífico para diagnosticar o vírus. Assim, com a realização do estudo observou-se que a técnica de PCR pode ser considerada padrão ouro para a detecção do HPV por sua alta sensibilidade, que o aumento da frequência de MN observado neste estudo em amostras infectadas pelo HPV, pode ser devido à instabilidade genômica, causada pela presença do vírus, e que, apesar da espectroscopia FT-IR apresentar grande potencial, por ser um teste de alta sensibilidade e especificidade no rastreamento do câncer cervical, neste estudo não demonstrou ser eficiente na discriminação de amostras infectadas pelo HPV. Dessa forma, enfatiza-se que, estudos adicionais devem ser conduzidos para a aplicação da espectroscopia FT-IR e o teste de MN no diagnóstico da infecção pelo HPV e consequente aplicação na prevenção de câncer cervical.
Comparação dos efeitos do photodithazine, fotoenticine e protoporfirina IX aplicado à terapia fotodinâmica em gliossarcoma
(2020-03-02) Ferreira-Strixino, Juliana; Nicolau, Renata Amadei; Tada, Dayane Batista; Inada, Natalia Mayumi; Fontana, Letícia Corrêa; Soares, Cristina Pacheco; São José dos Campos
A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma terapia promissora, que emprega um agente fotossensível (FS), luz e oxigênio molecular, produzindo espécies reativas de oxigênio(ERO’s)com o objetivo de induzir a célula cancerígena à morte, sendo um tratamento de interesse à Tumores Cerebrais. O objetivo desse trabalho foi avaliar a ação da TFD em células de gliossarcoma, utilizando como FS as clorinas russa (Photodithazine -PDZ) e espanhola (Fotoenticine -FTC)e o precursor da protoporfirina IX, ácido aminolevulínico (ALA). Foram realizados testes in vitro, a fonte de luz foi um dispositivo LED (Biopdi/Irrad-Led 660) para as clorinas e um dispositivo LED (Biopdi/Irrad-Led 630) para o ALA. Foram realizados testes de viabilidade celular com células 9L (gliossarcoma) e L929 (fibroblastos), e foi demonstrado que o sucesso da terapia é dependente da concentração do FS utilizado. Para o ALA, o período de incubação mínimo para que haja resposta eficaz, foi o período de 4h. Por meio do teste de internalização das clorinas, foi constatado a presença dos FSs no interior das células após 1h de incubação. Ao se observar os tipos de morte celular induzidos pela TFD com os três FSs, foi demonstrada a prevalência de morte celular por necrose ou apoptose tardia, com ausência de apoptose inicial. Por fim, houve um aumento na produção de ERO’s após a TFD para todos os FSs, porém quando visto o ALA, o tempo de incubação é fator chave para a produção dessas espécies. Entre as clorinas, o PDZ apresentou maior rendimento quântico de oxigênio singleto, sendo considerado o melhor fármaco entre os 3 testados. O PDZ foi utilizado para análise in vivo de acúmulo da clorina em tumores xenográficos induzidos em ratos Fischer, com células 9L.Com 1h observou-se acúmulo do FS no tumor, sendo crescente no tempo de 3h. Além disso, se apresentou um fármaco de fácil transporte via sistêmica ou local. Por fim, foi constatado presença do FS na região do crânio, porém novos estudos devem ser realizados para comprovar sua passagem pela barreira hematoencefálica.
Efeito da membrana de polihidroxibutirato à base de norbixina associada à terapia led de baixa intensidade no processo de reparo tendíneo pós-tenotomia: estudo in vivo
(2020-03-30) Nicolau, Renata Amadei; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Lima, Mário Oliveira; Oliveira, Luciane Dias de; Cunha, Tatiana de Sousa da; Nascimento, Lízia Daniela e Silva; São José dos Campos
A ruptura do tendão calcâneo apresenta uma elevada incidência, podendo resultar em redução severa da funcionalidade do tornozelo. O tratamento cirúrgico dessa lesão possibilita tanto a reparação como menor índice de recidiva da ruptura. Diversos estudos apontam o sucesso da terapia com LED no reparo da tenotomia, contudo sem a associação com membranas biológicas. O presente estudo teve como objetivo investigar o efeito da membrana de polihidroxibutirato (PHB) à base de norbixina associada à terapia com LED no reparo tendíneo após tenotomia calcânea em ratos. Foram utilizados 60 ratos machos, com aproximadamente 10 semanas de vida e 250g, divididos em 12 grupos, sendo 4 grupos: LC1 (Lesionado-controle), MNo1 (Membrana), LED1 (LED) e MNo+LED1 (Membrana+LED) eutanasiados 7 dias após a cirurgia, 4 grupos: LC2, MNo2, LED2 e MNo+L2 eutanasiados com 14 dias de PO e 4 grupos: LC3, MNo3, LED3 e MNo+LED3 eutanasiados 21 dias após o início do experimento. Nos grupos MNo e MNo+LED foram colados fragmentos de membranas no local da transecção tendínea, enquanto os grupos LC e LED não receberam a membrana. A terapia com LED foi realizada em um único ponto nos grupos LED e MNo+LED com a dosagem de 6 J/cm2 a cada 24 horas, durante 214,3 segundos por vez. No final dos experimentos os tendões foram removidos para análise histológica utilizando os programas Image-J® e Image J Pro-plus. Este estudo apresentou redução significativa de células inflamatórias no grupo MNo+LED em relação ao grupo LC (p<0,0001) nos três períodos de tempo. Foi verificada também proliferação significativa de fibroblastos no grupo MNo+LED em relação ao LC (p<0,0001) aos 7 e 14 dias, bem como um expressivo aumento de fibroblastos no grupo LED em todos os tempos experimentais. Observou-se também a formação do colágeno tipo I com resultados estatisticamente significativos nos grupos MNo1 (p=0,0133), MNo+LED1 (p=0,0002) e MNo2 (p=0,0210) quando comparados aos respectivos LC. A concentração de colágeno tipo III foi maior em todos os grupos aos 7, 14 e 21 dias do estudo. Conclui-se, assim, que O emprego da membrana de PHB à base de norbixina associada à terapia LED de baixa intensidade no tratamento de tenotomia total calcânea de ratos reduziu os níveis de infiltrado inflamatório na lesão, favoreceu a proliferação de fibroblastos nas duas primeiras semanas, porém não otimizou a formação de colágeno tipo I no estágio esperado do processo de reparação, indicando que houve pouca efetividade no uso simultâneo dos dois elementos terapêuticos.
Fotobiomodulação aplicada à neuralgia pós-herpética: estudo clínico, randomizado, duplo cego e controlado
(2020-03-30) Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Lima, Mário Oliveira; Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; Marcos, Rodrigo Labat; Silva, Erick Giovanni Reis da; São José dos Campos
A neuralgia, sintoma mais comum em pacientes acometidos por Herpes zoster (Hz), caracteriza-se por dor neuropática crônica no trajeto do nervo afetado, com persistência mínima de um mês, e início entre um e seis meses após a cura das erupções cutâneas. Após o desaparecimento das lesões, o paciente pode desenvolver neuralgia pós-herpética (NPH), com prejuízos expressivos à qualidade de vida. A terapia convencional medicamentosa não fornece resultados satisfatórios em curto prazo, deixando o paciente, na maioria dos casos, em estado contínuo de dores neurais. Diante disso, o uso da Terapia a Laser de Baixa Intensidade (TLBI) surge como nova abordagem terapêutica à neuralgia pós-herpética. O objetivo do presente estudo é avaliar a ação da laserterapia no tratamento da neuralgia pós herpética, com relação ao alívio da dor e melhora da qualidade de vida. É um estudo clínico prospectivo, randomizado, controlado e duplo cego, aplicado a uma população composta por 12 participantes diagnosticados com NPH. Os participantes foram alocados aleatoriamente em 2 grupos: Grupo Placebo (P- tratamento medicamentoso padrão) e Fotobiomodulação (PBM- cluster com três lasers de GaAlAs, 660 nm, 100mW, irradiação pontual, 40 s/ponto, total de 4 J/cm2 por ponto). A dor foi avaliada pela Escala Visual Analógica da dor (EVA) e a algometria, utilizando o analgesímetro digital. Para avaliar a qualidade de vida, foi aplicado o Questionário de Avaliação da Qualidade de Vida (SF-36). Os dados coletados, foram tabulados e analisados com o auxílio do programa GraphPad Prism®, versão 7, e o teste de Kolmogorov-Smirnov, para análise da distribuição dos dados de todos os parâmetros do estudo (EVA, algometria e SF36), com nível de significância de 5% (p<0,05). Os resultados do presente estudo demostraram que a análise da dor, pelo EVA apresentou diferenças estatísticas significativas na comparação intergrupo, e tanto grupo P quanto o grupo PBM apresentaram melhora da dor. Os resultados da algometria não apresentaram significância estatística (p>0,05) em relação à redução da dor em ambos os grupos. Por outro lado, na análise da qualidade de vida, o grupo P apresentou melhora significativa somente em um dos oito domínios analisados, enquanto o grupo PBM apresentou melhora em cinco dos oito domínios analisados. Portanto, nas condições e com a metodologia utilizada no presente estudo, conclui-se que o protocolo clínico proposto apresentou redução na percepção da dor, com consequente melhora na qualidade de vida na maioria (62,5%) de todos os aspectos avaliados. Esses resultados são importantes e podem nortear novas pesquisas clínicas que objetivem o uso da fotobiomodulação no tratamento da NPH.
Mecanismos de respostas na linhagem celular HEP-2 após tratamentos com terapia fotodinâmica e ciclofosfamida
(2020-03-31) Silva, Newton Soares da; Ferreira-Strixino, Juliana; Milhan, Noala Vicensoto Moreira; Moraes, Carlos Dailton Guedes de Oliveira; Soares, Cristina Pacheco; São José dos Campos
O câncer é a segunda doença mais letal no mundo, dentre eles pode ser destacado o câncer de laringe, visto que apresenta grande perspectiva de aumento para as próximas décadas. Deste modo são necessários estudos para o desenvolvimento de novas terapias, bem como a combinação de tratamentos já estabelecidos para melhor prognóstico dos pacientes. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a resposta da célula tumoral submetidas à Terapia Fotodinâmica (TFD), Ciclofosfamida (CFM) e aos tratamentos associados. A CFM é um quimioterápico já estabelecido na rotina clínica, pelo seu caráter alquilante e ciclo regulador utilizado para remissão do tumor. A TFD é um tratamento promissor, visto que proporciona a formação de espécies reativas de oxigênio capazes de induzir a morte celular, por meio da interação entre um fotossensibilizante, luz visível em um comprimento de onda adequado ao fotossensibilizante e o oxigênio molecular. Neste trabalho foram utilizadas células de carcinoma epidermoide de laringe (HEp-2), que foram divididas em grupos (Controle +, LED, AlPcS4, LED + CFM, CFM, TFD, TFD + CFM, Morte), sendo avaliadas neste estudo pelos ensaios de Cristal Violeta, MTT e, imunomarcação para GRP-78. O fotossensibilizante alumínio ftalocianina tetrassulfonada (AlPcS4 na concentração de 5µM ), foi utilizado para a TFD, e após 1 hora de incubação as células foram irradiadas com LED Biopdi / Irrad-Led5 660 com 660 nm de comprimento de onda, potência por área de 25 mW/cm2, fluência de 5 J/cm2, por 3 minutos e 20 segundos. A CFM foi utilizada na concentração de 200 µg/mL. Após os tratamentos, nos tempos de incubação de 24, 48 e 72 horas, foi possível verificar redução da densidade celular, pelo cristal violeta, dos grupos CFM, TFD e TFD + CFM em comparação ao Grupo Controle +. Ademais, observamos redução na atividade mitocondrial, pelo teste de MTT, nos grupos TFD e TFD + CFM em relação ao Grupo Controle + nos três períodos analisados. O grupo CFM, por outro lado, apresentou aumento na atividade mitocondrial em relação ao Grupo Controle + nos períodos 24 h e 48 h. O grupo CFM, no período de 72 h, não apresentou diferença estatística quando comparado ao Grupo Controle +. Além disso, pode ser verificado por imunomarcação a presença da proteína de choque térmico GRP-78 nos grupos CFM, TFD e TFD + CFM, já o Grupo Controle + foi negativo para esta imunomarcação. Assim, podemos concluir que os tratamentos tanto com a CFM, quanto com a TFD provocaram dano celular. Embora não apresente melhor eficiência na redução da densidade celular, o tratamento TFD + CFM foi mais promissor, visto que inibe a CFM inibe a proliferação celular de possíveis células sobreviventes a TFD.
Reabilitação sensório-motora associada à fotobiomodulação transcraniana em pacientes com lesão no sistema nervoso central
(2020-05-21) Lima, Mário Oliveira; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Meneguzzo, Daiane Thais; Guimarães, Carolina Lobo; Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; São José dos Campos
As doenças neurológicas podem acometer o tecido nervoso em qualquer fase da vida e geralmente estão associadas a importantes déficits funcionais. A gravidade dos sinais e sintomas clínicos relacionam-se diretamente a extensão e local da lesão, afetando diretamente a execução de atividades de vida diária e auto cuidado. Pesquisas recentes demonstraram os benefícios da Fotobiomodulação Transcraniana (FBM-T) em diferentes condições clínicas como Alzheimer, Traumatismo Cranioencefálico, Acidente Vascular Encefálico e alterações psicológicas, com efeitos positivos para cognição e memória, melhora do quadro comportamental e atenuação sintomas de depressão e ansiedade. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar se a aplicação da fotobiomodulação transcraniana em associação ao treinamento aeróbico pode promover mudanças na função do sistema musculoesquelético. Participaram do estudo 16 voluntários com lesões adquiridas do SNC, de ambos os sexos e idade média de 50,6±13,1 anos, com marcha preservada. Os voluntários foram divididos aleatoriamente em 2 grupos: Laser + Treinamento aeróbico e Laser placebo + Treinamento aeróbico. Para estímulo do tecido cortical foi utilizado um cluster (DMC Therapy, MED Light Laser VIV) composto por 6 lasers (3 lasers no ?= 650nm e 3 Lasers no ?= 808nm), com potência de 100mW e 36J. A aplicação foi realizada em 3 pontos, sendo estes F7, F8 e AFz segundo o Sistema Internacional 10-20 de EEG. Foram avaliados a ativação muscular, lactimetria e cognição antes, durante e ao final do processo de reabilitação, com duração de 12 semanas e freqüência de 2 vezes por semana. Os resultados sugerem que os indivíduos pertencentes ao grupo Laser obtiveram um aumento do recrutamento de fibras musculares pela análise do RMS nas coletas isotônica e isométrica, e redução do sinal em ortostatismo, ao final das 12 semanas. Diferenças significativas entre grupos foram encontradas durante o período de avaliação inicial, para as coletas em ortostatismo (p=0,009), isotonia (p=0,02) e isometria (p=0,01). Nota-se aumento significativo da velocidade de treinamento para o Grupo Laser (p=0,03) e Placebo (p=0,005). Aumento nos valores reais da concentração de lactato sanguíneo foram percebidos ao final da primeira e última sessão de tratamento, porém sem alterações significativas. Diferenças significativas foram encontradas nos escores da avaliação cognitiva MEEN para o grupo Laser, nas comparações: inicial x 8 semanas (p=0,0009), inicial x 8 semanas (p=<0,0001) e 8 semanas x 12 semanas (p=0,0003), e para o grupo Placebo: basal x 8 semanas (p=0,01). Estes resultados sugerem que a FBM-T associada ao treinamento aeróbico pode influenciar no recrutamento de fibras, na modulação da hiperatividade muscular em repouso e no desempenho cognitivo de pacientes com lesões do sistema nervoso central. Acreditamos que a FBM será uma técnica promissora para a neuroreabilitação nos próximos anos.
Análise dos efeitos da fotobiomodulação na fadiga do músculo bíceps braquial de indivíduos hígidos: avaliação por eletromiografia e dinamometria
(2020-06-03) Lima, Fernanda Pupio Silva; Lima, Mário Oliveira; Filoni, Eduardo; Souza, Gabriela Aparecida da Silveira; Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; São José dos Campos
A fadiga muscular é ocasionada por meio de alterações bioquímicas que modificam a mecânica da contração muscular, as quais resultam em alterações negativas na performance da contração. Diversos recursos são estudados com o intuito de atenuar este quadro, dentre eles pode-se citar a fotobiomodulação. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da fotobiomodulação na fadiga do músculo bíceps braquial de indivíduos hígidos. Foi realizado um ensaioclínico, cruzado, comparativo, randomizado, placebo, duplo-cego. O estudo foi composto por 14 voluntáriosdo gêneromasculino com idade entre 20 e 30 anos (22±3,7), altura média de 165±7,7 cm, peso de 71±14kg e índice de massa corporal (IMC) de 16±0 kg/m2.Os voluntários foram divididos em dois grupos (grupo placebo e grupo PBMT) e todos os indivíduos passaram por todos os grupos. Para a indução da fadiga muscular foram realizadas três Contrações Isométricas Voluntárias Máximas com duração de 50 segundos e intervalo de 50 segundos, utilizando um dinamômetro computadorizado acoplado ao eletromiógrafo de superfície. Durante a CVMI foi avaliado o sinal eletromiográfico e a forçamuscular.A intensidade dolorosa foi avaliada antes do protocolo, imediatamente,24 horas e 48 horas após o protocolo. A fotobiomodulação foi aplicada antes do protocolo de indução de fadiga (diodo laser, 808nm, 100mW, 3J/ponto, 9 pontos). Foi possível observar nos resultados que o grupo PBMT apresentou queda menos acentuada da força muscular e dos sinais eletromiográficos. Em relação a intensidade dolorosa não houve diferença entre os grupos. Conclui-se, portanto,que a aplicação da fotobiomodulação no comprimento do infravermelho possui efeitos positivos na redução da fadiga muscular.
Estudo da aplicação do laser de diodo na prevenção e controle da erosão dentária extrínseca
(2020-07-01) Soares, Luís Eduardo Silva; Sant'Anna, Luciana Barros; Espírito Santo, Ana Maria do; Seefeldt, Vanessa Borelli; São José dos Campos
A erosão dentária é uma lesão de origem não cariosa, crônica e pontual. Pode ter como causa extrínsecaadissolução de minerais da superfície dental poração química de ácidos e quelantes presentes em alimentos industrializados, alimentos ácidos ealguns medicamentos. Dentre asfontes intrínsecas pode-se citar asdoenças que acometem o trato gastrointestinal. A desmineralizaçãodecorrente por erosãotorna o elemento dental mais suscetível aos desgastes mecânicos da escovação, mastigação, apertamento ebruxismo, resultando emsintomatologia álgica e fragilidade dentária. A terapia mais tradicional e acessível para os pacientes é a utilização do flúor.Como alternativa para prevenir os possíveis sinais e sintomas da erosão dentária, pode-se lançar mão da irradiação laser, paramodificar quimicamente a superfíciedental e aumentar a resistência à desmineralização. Neste sentido, o presente estudo tevecomo objetivo avaliar,in vitro, a influência da irradiação com laser de Diodo (?=830nm), naprevençãoe controleda erosão dentária induzida, em esmalte de dentes bovinos. Noventa e seisamostras de esmalte bovino foram preparadas edivididas em 8 grupos experimentais (n = 12): grupo 1 –controle negativo (saliva, AS), grupo 2 –controle positivo (flúor gel neutro, FG), grupo 3 –laser Diodo1 (L1), grupo 4 –laser Diodo 2 (L2), grupo 5 -flúor + laser1 (FG-L1), grupo 6 –flúor + laser2 (FG-L2), grupo 7 –laser1 + flúor (L1-FG), grupo 8 –laser2 + flúor (L2-FG). As amostras dos grupos2, 5 e 6 receberamuma aplicação de flúor gel anterior aos procedimentos experimentais e ciclagem erosiva.Nos grupos 7 e 8, o flúor foiaplicado após a irradiação laser. Após os tratamentos as amostras foram submetidas à ciclagem erosiva em suco de laranja (desmineralização) e saliva artificial (remineralização). As amostras foram submetidas às análises por espectroscopia de micro fluorescência de raios x por energia dispersiva (µ-EDXRF), rugosidade de superfície e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Diferenças significativasnas comparações iniciais e finais para o elemento cálcio (Ca) foram encontradas nos grupos G3 (P<0,01) e G8 (P<0,001) e para o fósforo, somente no grupo G8 (P<0,01). Entre arelação Ca/P, foram observadas diferenças significativas nos grupos G1 (P<0,05), G2(P<0,01), G3 (P<0,001), G4 (P<0,001) e G6 (P<0,001). Nas comparações entre o grupo controle negativo(G1)eos demais grupos, foram observadas diferenças significativas paraG8, com menores valores de Ca, P e Ca/P (P<0,001), e maiores valores de Ca e P paraG3 (P<0,001).Entre o grupo controle positivo(G2)e os demais grupos, foram constatados valores significativamente menores de Ca e P para G8 (P<0,001) emaiores valores de Cae Ppara G3 (P<0,01). Entre a relação Ca/P, foram constatadas diferenças significativas e menores valores nas comparações entre o grupo G2 e G8 (P<0,001), G5 (P<0,05) e G7 (P<0,05).Nos mapeamentos em área, maiores teores de Ca e Pforam observados nos grupos 3 e 4 e o menores valores de Capara os grupos 2, 5, 6, 7 e 8. Tais resultados foram mantidos para o elemento P, contudo, com menor evidência.Os tratamentos com a associação laser / flúor resultaram em valores médios de rugosidade mais baixos (Ra, µm) do que no controle negativo (P<0,05). O tratamento com L1 produziu valores mais altos de Ra no esmalte do que no controle positivo (P<0,05). As micrografias obtidas por MEV mostraram evidente desmineralização noesmalte após os tratamentos com AS (controle negativo) e FG (controle positivo) e erosão no suco de laranja em comparação com os grupos irradiados por laser.Deste modo, a irradiação com laser de Diodo de 830 nm em baixas potências, com ou sem associação ao flúor, e nos parâmetros adequados, promove modificações na estrutura cristalina do esmalte, tendo sido observadas melhores coberturas de superfícies nos grupos G4 (L2) e G6 (LF-2).
Avaliação in vitro de nanopartículas de ouro em células de GBM irradiadas em aparelhos de tomografia e radioterapia
(2020-07-23) Raniero, Leandro José; Soares, Cristina Pacheco; Liu, Andréa Santos; Gialluca, Vanessa Dias; Castilho, Maiara Lima; São José dos Campos
s neoplasias malignas representam um grupo de mais de 100 doenças diferentes que apresentam como característica, a diferenciação genética do tecido de origem, levando ao crescimento desordenado de células, que invadem tecidos e órgãos normais. Embora tenham ocorrido avanços significativos dessas modalidades tradicionais terapêuticas, as neoplasias malignas representam ainda um grande desafio, considerando, especialmente os subtipos de maior agressividade e letalidade. Entre os tumores mais agressivos encontramos o Glioblastoma Multiforme, com mortalidade de cerca de 95% e sobrevida mediana de 15 meses. A Temozolomida é o quimioterápico até o momento testado e aprovado com melhor resposta neste subtipo tumoral. O objetivo desta dissertação foi avaliar a potencialização desta modalidade terapêutica associada as nanopartículas de ouro quando irradiadas com radioterapia e tomografia. Para tanto a Temozolomida foi caracterizada quimicamente, realizada a sintetização de nanopartículas de ouro e, posteriormente foi testada a citotoxidade isolada do quimioterápico e dos conjuntos da Temozolomida com as nanopartículas de ouro em diferentes concentrações e, por fim foi avaliado a potencialização dos efeitos citotóxicos em placas irradiadas em aparelho de tomografia e radioterapia. Os resultados demonstram que houve um efeito citotóxico quando as nanopartículas de ouro foram utilizadas isoladamente e em conjunto com a Temozolomida e irradiadas com aparelho de tomografia e as nanopartículas de ouro potencializaram significativamente o efeito citotóxico da radioterapia quando associado a Temozolomida. Conclui-se, portanto que as nanopartículas de ouro potencializam o efeito da Temozolomida no tratamento de células de GBM, tanto quando irradiado com tomografia, quanto com radioterapia, com grande potencial para uso terapêutico em associação com as terapias tradicionais.
Fibrous PCL composites with nanoceramics produced by electrospinning and rotary jet spinning for regenerative bone applications
(2020-08-24) Lobo, Anderson de Oliveira; Ferreira-Strixino, Juliana; Vieira, Lúcia; Corat, Marcus Alexandre Finzi; Vasconcellos, Luana Marotta Reis de; Paula, Mirian Michele Machado de; São José dos Campos
Na prática clínica, o reparo de defeitos do tecido ósseo continua sendo um desafio significativo devido às limitações encontradas nos tratamentos atuais para substituição ou reparo de tecido ósseo. Biomateriais sintéticos estão sendo explorados como uma alternativa promissora para suprir tais limitações. Novas estrategias baseadas em combinações bem deliniadas entre materias osteocondutores, suporte e populações de células osteogênicas são vistos como uma abordagem para melhorar a regeneração óssea. Aqui, a eficácia de fibras de policaprolactona(PCL) com nanotubo de carbono (CNT) e nanopartículas de hidroxiapatita (nHap) incorporadas, usando dois métodos diferentes de fabricação: eletrofiação (ES) e rotofiação (RJS), foram investigadas. Além disso, células-tronco mesenquimais da medula ossea (BMMSCs) foram semadas sobre os scaffolds e implantadas em defeito ósseo crítico na calvária de ratos para avaliar seu potencial no processo de reparo ósseo, em comparação com scaffolds acelulares. Diferentes morfologias foram determinadas através do método de fabricação utilizada. Fibras rotofiadas apresentaram uma topografia especial (fibras rugosas) em comparação com fibras eletrofiadas (fibras lisas). Mostramos que os scaffolds de PCL produzidos pela RJS tem um potencial em diminuir a colonização de bactérias, no qual pode estar relacionado a mecanismos físicos (morfologia dos scaffolds) e/ou biológicos (superfície bacteriana). Posteriormente, vários parâmetros foram analisados após a incorporacao das nanoparticulas nos scaffolds. As fibras de PCL com nanoparticulas denHap: CNT mostraram um potencial em estimular atividade biológica em células de osteoblasto comparado com o PCL puro. Além disso, evidenciamos que aumento da formação óssea ocorreu através da combinação de três características: presença de nanoparticulas de nHap:CNT, superfície rugosa evidenciada pelas fibras RJS e revestimento dos scaffols com BMMSCs. Neste estudo mostramos que a escolha do biomaterial e a topografia de superfície combinados com células de interesse são fatores-chave que podem favorecer a reparação óssea.
Efeitos da fotobiomodulação no crescimento de bactérias intestinais
(2020-10-02) Silva, Newton Soares da; Ferreira-Strixino, Juliana; Junqueira, Juliana Campos; Supino, Carolina; São José dos Campos
Introdução: A enterocolite necrotizante é uma doença inflamatória intestinal que ocorre no récem-nascido, mais comumente no prematuro. É a principal causa de morte por doenças gastrointestinais em neonatos, e caracterizada pelo desenvolvimento de necrose intestinal difusa no prematuro submetido a estresse. A alta incidência e a falta de estratégias de tratamentos efetivas sugerem que novas abordagens para o tratamento da doença são necessárias. É neste contexto que surge a possibilidade do uso da fotobiomodulação como modalidade terapêutica. Porém, os estudos sobre a utilização da fotobiomodulação em bactérias intestinais são escassos. Objetivo: Estudar o efeito da fotobiomodulação utilizado em parâmetros clínicos no crescimento de bactérias comumente presentes na microbiota do recém nascido. Metodologia: Foram escolhidos 4 cepas de bactérias para serem estudadas, sendo duas pertencentes a microbiota intestinal saudável, Lactobacillus acidophilus e Lactobacillus reuteri e duas baterias patogênicas, Escherichia coli e Staphylococcus aureus. Essas bactérias foram cultivadas em crescimento planctônico e irradiadas com LED em comprimento de onda 660 nm e uma densidade de potência de 0,025 W/cm2, em fluências de 1, 5 e 10 J/cm2. A avaliação do crescimento celular foi realizada através de leituras por absorvância nos períodos de 4h, 24h e 48h após irradiação. Resultados: O crescimento de L. acidophilus, L. reuteri e S. aureus não sofreu biomodulação em nenhuma das fluências. O crescimento de E. coli foi estimulado em 1 J/cm2 quando comparado ao grupo Controle, com significância estatística (p<0,005). Nas demais fluências não houve bioestimulação para a bactéria E.coli. Conclusão: O uso do comprimento de onda de 660 nm nas fluências de 5 J/cm2 e 10 J/cm2 nas bactérias estudadas não levou a uma alteração na velocidade de crescimento significativo.
Sistema microprocessado para avaliação de amplitude de movimento e da força muscular, do conjunto osteomioarticular, com a utilização de acelerômetro e giroscópio
(2020-10-05) Lima, Mário Oliveira; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Silva, Alessandro Pereira; Lemos, Sergio Luiz; São José dos Campos
Introdução: A postura estável de um indivíduo é o resultado de um equilíbrio de forças concorrentes, no conjunto musculoesquelético, onde os músculos tem a função de gerar as forças necessárias para a estabilização esquelética. A condição de movimento com o domínio da capacidade funcional, é um fator importante na qualidade de vida, estado geral de saúde, vitalidade e saúde mental. Desta forma, a amplitude de movimento (ADM) e a força muscular são dois fatores muito relevantes para avaliação do conjunto musculoesquelético de um indivíduo, permitindo diagnóstico diferencial, prognóstico e tratamento de distúrbios musculoesqueléticos e neuromusculares. Objetivo: Desenvolver e validar um sistema para medição de ADM e forçamuscular, utilizando sensores inerciais, que realizem a aquisição de dados e permitam analisar o desempenho de movimentos no conjunto musculoesquelético. Métodos: Foram colocadossensores em cinco indivíduos hígidos, ambos os gêneros, onde os mesmos serão submetidos a sériesde movimentos, de flexão de cotovelo e joelho no dinamômetro isocinético Biodex System 3TM. As séries para ensaios de ADM foram sem carga, e as séries para ensaios de força foram com carga. A validação do sistema foi realizadacom a análise e comparação com os dados obtidos no dinamômetro isocinético. Resultados: O sistemadesenvolvidomostrou resultados confiáveis para a medida angular, validando o estudo. Com relação a força, este estudo não tem o intuito de fornecer dados da força como sendo absolutos,uma vez que a mesma é calculada a partir dos dados de variação angular do movimento. Omodeloutilizado permite obter dados quantitativos para a comparação em um mesmo indivíduo ao longo do tempo.Estudos futuros podem ser conduzidos para análise do melhor modo de uso ou representação deste modelo, ou mesmo, do seu aprimoramento.Conclusão: O sistema desenvolvido é um protótipo, mas tem a possibilidade de se tornaruma boa ferramenta para a área defisioterapia,abrindo também oportunidades de estudos na área da reabilitação sensório motora.
O uso da inativação fotodinâmica como alternativa para descontaminação de fragmentos de pele destinados a transplantes: modelo experimental em pele de suínos
(2020-11-13) Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; Lima, Fernanda Pupio Silva; Ribeiro, Martha Simões; Núñez, Silvia Cristina; Araújo, Dhenise Mikaelly Meneses de; São José dos Campos
A cobertura temporária por pele biológica ou sintética é importante para a cura completa e mais rápida de queimaduras e outros defeitos de pele. Atualmente é utilizada a radioesterilização para garantir a qualidade dos tecidos usados em transplantes e outras aplicações clínicas. Alterações morfológicas e funcionais no tecido podem ser devido à absorção da energia ionizante liberada durante a radiação, além de acarretar danos ao profissional habilitado, como também o alto custo empregado nessa técnica. Diferentemente a inativação fotodinâmica mostra evidências de ser viável, tem baixo custo e com danos mínimos à saúde do profissional que está operando. Então levantamos a questão, a utilização da inativação fotodinâmica pode ser uma alternativa em banco de tecidos para descontaminação de pele? A inativação fotodinâmica é uma abordagem multifatorial que envolve três componentes principais, fotossensibilizador, luz e oxigênio, e tem sido utilizada como um método alternativo para erradicar microrganismos patogênicos, como bactérias e fungos. Este estudo tem por objetivo avaliar os efeitos da inativação fotodinâmica na pele suína, visando o seu uso para descontaminação da pele destinadas a transplantes. Foram utilizados umtotalde47 fragmentos de pele suína com dimensões de tamanho 1x1 cm, provenientes da região da orelha do suíno. Foi realizado o experimento em duas etapas, sendo diluído o azul de metileno na água destilada estéril a partir de 10 milimolar para concentração de 50, 75 e 100 micromolar na primeira etapa e 12,5 e 25 micromolar na segunda etapa. As placas tiveram um tempo de pré-irradiaçãode 20 minuto. Para este trabalho foi utilizado o equipamento LEDbox, emitindo660nm. As placas foram expostas à radiação durante um período de 20 minutos. Foi adotada a diluição seriada de 1:10 e o método de escorrimento na placa conforme adaptação da metodologia de Tippelskircha et al. (2018). Após 24 h de incubação, as placas foram retiradas da incubadora para fazer a contagem das unidades formadoras de colônias. Para a análise morfológica foi utilizada a tomografia por coerência óptica. Os resultados obtidos apontam que os grupos das concentrações de azul de metileno de 12,5 e 25 µM são estatisticamente diferentes (p<0,05), do grupos das concentrações de 75 e 100 µM, sendo os grupos das concentrações de 12,5 e 25 µM apresentaram-se uma maior eficácia na redução das UFCs. As imagens da tomografia de coerência óptica mostraram que é possível observar a camada do epitélio nos diferentes grupos, sem alteração ou deformação em comparação com a pele do grupo controle. A literatura apresenta poucos estudos voltados na área e com isso houve uma dificuldade maior e limitação no desenvolvimento da metodologia. Os resultados obtidos são conflitantes, pois demonstram o potencial da inativação fotodinâmica e do azul de metileno isolado, para a descontaminação da pele, embora haja a necessidade de mais ensaios laboratoriais para desempenhar uma maior inativação dos microrganismos na pele. É um estudo inovador, teve como objetivo estabelecer um modelo de protocolo de baixo custo para investigação de descontaminação da pele com o uso da inativação fotodinâmica em modelo animal. A metodologia foi bem definida e detalhada, sendo possível a repetição de mais testes, e foi alcançado objetivo de estabelecer um modelo de procedimento operacional padrão para a realização de descontaminação da pele.
Avaliação dos efeitos, em fibroblastos, da irradiação com LED em diferentes comprimentos de onda isolados e combinados
(2020-12-10) Ferreira-Strixino, Juliana; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Soares, Cristina Pacheco; Souza, Carla; Barbosa, Lívea Fujita; Ribeiro, Maria Emilia de Oliveira Brenha; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
Diversos trabalhos no campo da fotobiologia têm focado nos efeitos, na pele, da luz visível, compreendida entre 400 –700 nm. Dentre os comprimentos de onda mais estudados, estão o azul (em torno de 455 nm) e vermelho (em torno de 630 nm), para os quais já foram descritos benefícios tanto no tratamento de patologias, como acne, quanto para efeitos anti-envelhecimento, estimulando a expressão de proteínas relacionadas à manutenção da estrutura da pele. O uso combinado dos diferentes comprimentos de onda, no entanto, ainda não foi explorado, apesar de já existirem equipamentos com esta característica em uso tanto por médicos quanto consumidores. O objetivo deste trabalho foi aprofundar o conhecimento na combinação de três diferentes comprimentos de onda: região de 525 nm (luz verde), 630 nm(luz vermelha) e 455 nm (luz azul). A primeira etapa consistiu na idealização, montagem e testagem da operação de um aparato para irradiação, pois não há disponível comercialmente para estudos in vitro. O aparato foi construído e apresentou-se preciso na irradiação dentro dos comprimentos de onda de interesse. Para ele, foi solicitado um Registro de Software, já concedido, e também depositada uma Patente de Invenção. Os efeitos da irradiação foram caracterizados sob três aspectos: 1) citotoxicidade, por meio de ensaios de exclusão por azul de Trypan e micronúcleo; 2) formação de radicais livres, pelo marcador H2DCF-DA e, 3) análise do conteúdo proteico, pelo SDS-PAGE. Três fluências foram testadas: 80 J/cm2, 40 J/cm2e 4 J/cm2. A fluência80 J/cm2apresentou mortalidade celular em torno de 11%e foi excluída. A fluência de 40 J/cm2apresentou resultados similares ao controle negativo nos ensaios de Micronúcleo e Formação de Espécies Reativas de Oxigênio, sendo a escolhida para análise do conteúdo proteico. Neste, foram encontradas bandas referentes à colágeno, laminina e elastina, além de metaloproteinases de matriz e fatores de crescimento de fibroblasto (FGF). O colágeno I foi positivamente regulado pelo LED vermelho, mas negativamente pelo LED verde. Para Laminina, não foram encontradas diferenças qualitativas entre os grupos. Demonstrou-se diminuição de MMP-1 nas condições onde havia incidência de luz vermelha corroborando os achados de literatura, além de diminuição na expressão de MMP-7 e MMP-14, resultados ainda não descritos. Para FGF demonstrou-se, pela primeira vez, possível efeito inibitório do LED verde. Já o LED vermelho, por sua vez, apresentou-se similar ao controle, diferentemente do descrito em literatura, muito provavelmente devido à compensação do efeito dos LEDs verde e azul. Conclui-se que a interação entre os diferentes comprimentos de onda pode levar a interferências nos resultados, como é o caso da expressão de FGF sendo afetada pela irradiação conjunta com outros LEDs. Sugere-se uso de marcadores específicos e técnicas quantitativas para confirmação destes achados.
Análise termográfica do fibro-edema gelóide (FEG) após a irradiação com laser
(2021) Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; Marques, Ricardo Henrique; Lima, Mário Oliveira; Barbosa, Elaine da Silva; Lima, Fernanda Pupio Silva; São José dos Campos
Na busca pela beleza e estética o cuidar da pele é muito importante, visto ser o maior órgão do corpo. Nos últimos anos a estética desenvolveu novos métodos, que associam técnicas manuais, cosmetologia e tecnologia para a busca do“corpo perfeito”,da pele lisa, sem irregularidades e discromias. Entre as alterações consideradas inestéticas, a celulite é a que mais incomoda as mulheres. Na tentativa de esclarecer o termo “celulite”, ou Fibro-edema Gelóide (FEG) alguns autores iniciaram estudos sobre a pele humana e o tecido subcutâneo. Por meio da biópsia (até a fáscia lata) das coxas e nádegas, observaram o tecido subcutâneo da região é composto por três camadas de gordura com dois planos de tecido conjuntivo entre eles. Além das alterações histológicas, a FEG apresenta também disfunções multifatoriais, com presença de alterações vasculares, inflamatórias, hormonais e estruturais. No dia a dia clínico, o diagnóstico é baseado na história do paciente, exame clínico, mas avaliações mais detalhadas podem ser realizadas como biopsias, exames de imagens termográficas e vasculares, entre outros. A Termografia Infravermelha Computadorizada (TIC), técnica não invasiva e não radioativa, avalia funções fisiológicas envolvidas no controle da temperatura da pele. A tecnologia registra apenas a radiação natural emitida pelo corpo, sem apresentar nenhum efeito ionizante ou prejudicial, sendo perfeitamente seguro para uso clínico. A Terapia de fotobiomodulação utilizando lasers e LEDs tem sido utilizada para o tratamento do FEG. Laser e LEDs de baixa intensidade são utilizados, e demonstram razoável efetividade. No entanto, a questão da penetração da luz em tecidos mais profundos sempre é uma pergunta a ser respondida. Desta forma, os Lasers Classe IV surgem como uma nova opção de tratamento para disfunções estéticas como o FEG. Diversos autores questionam o uso desta tecnologia, tendo em vista a ausência de estudos de segurança térmica para o paciente. Para responder a essa questão, este estudo propõe avaliar os efeitos térmicos do laser Classe IV na região de latero-posterior de coxa, além de diferenciar áreas com e sem FEG, comparando perfil térmico entre homens e mulheres. O resultado deste estudo permite concluir que a TIC é uma ferramenta útil para diagnosticar o FEG. Além disso, evidencia as diferenças clássicas já descritas entre homens e mulheres quanto ao padrão termográfico. Especialmente, respondendo a questão inicialmente formulada, demonstramos que o laser Classe IV, quando aplicado em modo varredura é uma tecnologia totalmente segura e não causa qualquer aquecimento significativo em homens e mulheres, na região do quadril.

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