Mecanismos de respostas na linhagem celular HEP-2 após tratamentos com terapia fotodinâmica e ciclofosfamida

O câncer é a segunda doença mais letal no mundo, dentre eles pode ser destacado o câncer de laringe, visto que apresenta grande perspectiva de aumento para as próximas décadas. Deste modo são necessários estudos para o desenvolvimento de novas terapias, bem como a combinação de tratamentos já estabelecidos para melhor prognóstico dos pacientes. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a resposta da célula tumoral submetidas à Terapia Fotodinâmica (TFD), Ciclofosfamida (CFM) e aos tratamentos associados. A CFM é um quimioterápico já estabelecido na rotina clínica, pelo seu caráter alquilante e ciclo regulador utilizado para remissão do tumor. A TFD é um tratamento promissor, visto que proporciona a formação de espécies reativas de oxigênio capazes de induzir a morte celular, por meio da interação entre um fotossensibilizante, luz visível em um comprimento de onda adequado ao fotossensibilizante e o oxigênio molecular. Neste trabalho foram utilizadas células de carcinoma epidermoide de laringe (HEp-2), que foram divididas em grupos (Controle +, LED, AlPcS4, LED + CFM, CFM, TFD, TFD + CFM, Morte), sendo avaliadas neste estudo pelos ensaios de Cristal Violeta, MTT e, imunomarcação para GRP-78. O fotossensibilizante alumínio ftalocianina tetrassulfonada (AlPcS4 na concentração de 5µM ), foi utilizado para a TFD, e após 1 hora de incubação as células foram irradiadas com LED Biopdi / Irrad-Led5 660 com 660 nm de comprimento de onda, potência por área de 25 mW/cm2, fluência de 5 J/cm2, por 3 minutos e 20 segundos. A CFM foi utilizada na concentração de 200 µg/mL. Após os tratamentos, nos tempos de incubação de 24, 48 e 72 horas, foi possível verificar redução da densidade celular, pelo cristal violeta, dos grupos CFM, TFD e TFD + CFM em comparação ao Grupo Controle +. Ademais, observamos redução na atividade mitocondrial, pelo teste de MTT, nos grupos TFD e TFD + CFM em relação ao Grupo Controle + nos três períodos analisados. O grupo CFM, por outro lado, apresentou aumento na atividade mitocondrial em relação ao Grupo Controle + nos períodos 24 h e 48 h. O grupo CFM, no período de 72 h, não apresentou diferença estatística quando comparado ao Grupo Controle +. Além disso, pode ser verificado por imunomarcação a presença da proteína de choque térmico GRP-78 nos grupos CFM, TFD e TFD + CFM, já o Grupo Controle + foi negativo para esta imunomarcação. Assim, podemos concluir que os tratamentos tanto com a CFM, quanto com a TFD provocaram dano celular. Embora não apresente melhor eficiência na redução da densidade celular, o tratamento TFD + CFM foi mais promissor, visto que inibe a CFM inibe a proliferação celular de possíveis células sobreviventes a TFD.