Dissertação-PPGEB

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Avaliação dos Efeitos da Fotobiomodulação com LEDs de Diferentes Comprimentos de Onda em Fibroblastos In Vitro
(2025-11-26) Pinto, Juliana Guerra; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Soares, Cristina Pacheco; Nicolau, Renata Amadei; Santos, Emília Pio Ferrari dos; Ferreira, Juliana; São José dos Campos
A fotobiomodulação (FBM) é uma terapia não invasiva que utiliza luz em diferentes comprimentos de onda para modular processos celulares e estimular a regeneração tecidual. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da irradiação com LED em fibroblastos L929 cultivados in vitro, empregando os comprimentos de onda de 420, 450, 530, 590 e 630 nm, todos aplicados com fluência padronizada de 5 J/cm². As análises incluíram viabilidade celular (azul de Trypan), atividade metabólica (ensaio de MTT), morfologia (Giemsa) e perfil bioquímico (FTIR-ATR), com tratamento estatístico por ANOVA/Tukey (p < 0,05). Os tempos de irradiação variaram conforme o diodo emissor: 420 nm (114 s; 43,7 mW/cm²), 450 nm (149 s; 33,6 mW/cm²), 530 nm (60 s; 83,3 mW/cm²), 590 nm (333 s; 15 mW/cm²) e 630 nm (129 s; 38,6 mW/cm²). Os resultados indicaram respostas distintas conforme o comprimento de onda. O LED de 420 nm reduziu discretamente a atividade metabólica sem comprometer a viabilidade; 450 nm manteve perfil semelhante ao controle, com alterações bioquímicas sutis; 530 nm promoveu aumento significativo da atividade metabólica e padrões compatíveis com estímulo ao reparo celular; 590 nm apresentou efeito inibitório; e 630 nm preservou a viabilidade, com indícios de incremento na síntese proteica. Conclui-se que a resposta dos fibroblastos à FBM é dependente do comprimento de onda e da parametrização utilizada, reforçando a importância da padronização dos parâmetros de irradiação para alcançar efeitos terapêuticos desejáveis sem comprometer a integridade celular. Os achados contribuem para o entendimento dos mecanismos celulares da fotobiomodulação e fornecem suporte para sua aplicação segura e eficaz em protocolos clínicos, especialmente na dermatologia regenerativa.
Terapia fotodinâmica com curcumina nanoencapsulada como fotossensibilizador associada à tetraciclina na inativação do biofilme de staphylococcus aureus resistente à meticilina : estudo in vitro
(2025-07-29) Ferreira, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Junqueira, Juliana Campos; Azevedo, Maria Clara Barbosa Silva de; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) é uma bactéria Gram-positiva que constitui um dos maiores desafios para a saúde pública global, sendo sua sobrevivência potencialmente aumentada pela formação de biofilme. Isso evidencia a urgência no desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas, como a Terapia Fotodinâmica (TFD). O objetivo do trabalho foi analisar o efeito antimicrobiano da TFD usando a curcumina nanoencapsulada em albumina sérica bovina (BSA), podendo estar associada à tetraciclina, em biofilme de MRSA. A NanoBSA nas formas catiônica e aniônica, foi avaliada nas concentrações de 3,0, 2,0 e 1,0 x 10?6 mol.L?¹, assim como sua associação com tetraciclina (30 µg.mL?¹). A irradiação foi realizada com luz LED azul (450 nm, 93,9 mW/cm², 50 J/cm², 532 segundos). A atividade metabólica foi significativamente reduzida tanto na TFD com antibióticos (ATB) quanto sem antibióticos, contudo, no ensaio de contagem de unidades formadoras de colônias, apenas os grupos tratados com TFD associada à tetraciclina apresentaram inibição do crescimento bacteriano. A concentração de 2,0 x 10?6 mol.L?¹ se destacou como a mais eficaz. A combinação de TFD com antibioticoterapia apresenta potencial terapêutico promissor no tratamento de infecções causadas por S. aureus resistente à meticilina.
Síntese e Caracterização de SPIONs@APTES Conjugados com Clorina E6 via Química Carbodiimida para Terapia Fotodinâmica
(2025-09-22) Raniero, Leandro José; Soares, Cristina Pacheco; Liu, Andréa Santos; Gonçalves, Giulia Capizzani; São José dos Campos
O câncer é uma das principais causas de morte no mundo e continua sendo um grande desafio para os sistemas de saúde, principalmente em países com poucos recursos. Os tratamentos tradicionais, como cirurgia, quimioterapia, radioterapia e terapia hormonal, ainda são amplamente utilizados, mas apresentam limitações importantes, como baixa seletividade e efeitos colaterais severos. Com os avanços no entendimento dos mecanismos do câncer, novas terapias mais específicas e menos agressivas estão sendo desenvolvidas destacando-se a Terapia Fotodinâmica (TFD). Apesar das vantagens, como menor toxicidade e maior precisão, a TFD ainda enfrenta problemas, principalmente relacionados à baixa solubilidade e instabilidade dos fotossensibilizadores. Para minimizar essas limitações, o uso de nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro (SPIONs) têm se destacado por sua biocompatibilidade, estabilidade, baixo custo e possibilidade de serem modificadas para se ligarem a moléculas específicas. Uma estratégia promissora é a incorporação da Clorina E6 (Ce6) às SPIONs. A Ce6 tem alta eficácia e baixa toxicidade, mas sua baixa solubilidade compromete seu uso. Neste contexto, essa dissertação propõe a síntese e a caracterização de SPIONs pelo método de coprecipitação, a síntese e caracterização de nanossondas funcionalizadas com o fotossensibilizador Ce6 e sua aplicação na TFD. As dimensões das nanoestruturas foram caracterizadas por diâmetro hidrodinâmico, estabilidade coloidal e composição química. Posteriormente foram realizados estudos in vitro para avaliação da atividade antitumoral e toxicológica da TFD na linhagem celular de glioblastoma humano (M059J).
Efeito sinérgico da fotobiomodulação com LED 660 E 850 nm em células L929 induzidas ao estresse oxidativo com peróxido de hidrogênio
(2025-09-09) Soares, Luís Eduardo Silva; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Oliveira, Luciane Dias de; Segismondi, Larissa Cavallieri; Soares, Cristina Pacheco; São José dos Campos
A pele está constantemente exposta a agressões externas, tornando-se um alvo para a geração excessiva de espécies reativas de oxigênio (ROS), que induzem danos oxidativos principalmente na região dérmica. A fotobiomodulação (FBM) mostra-se uma terapia eficiente para biomodulação de sistemas biológicos, capaz de modular processos oxidativos e inflamatórios. No presente estudo, buscou-se elucidar o possível efeito fotoprotetor in vitro da aplicação simultânea da FBM com LED 660 e 850 nm em células fibroblásticas L929 diante do tratamento com peróxido de hidrogênio como modelo de estresse oxidativo. Os fibroblastos foram pré-irradiados com LED e em seguida incubados com 200 µM de H2O2 diluído em meio de cultura pelo período de 3 horas. Após 24 horas dos tratamentos, foram observadas alterações quanto à atividade mitocondrial pelo ensaio colorimétrico Alamar Blue e quanto à morfologia celular por microscopia invertida. Também foi realizada a marcação de mitocôndrias e núcleos em células vivas por fluorescência utilizando Tetrametilrodamina (TMRM) e Tricloridrato de bisbenzimida (HOESCHT), além da detecção de ROS por fluorescência utilizando CellRox Orange. Os resultados obtidos indicam que o pré-tratamento com LED promove aumento da atividade mitocondrial, do potencial da membrana mitocondrial, redução da geração de ROS intracelular e induz alterações morfológicas nas células. Dessa maneira, conclui-se que o sinergismo entre os LEDs 660 e 850 nm exerce efeito protetor contra a ação do H2O2 em células fibroblásticas L929, demonstrando que a FBM pode ser utilizada para auxiliar a prevenir e mitigar danos oxidativos.
Seda de Aranha na Cultura 3D: Aplicação da Seda de Trichonephila clavipes como scaffold
(2025-10-08) Soares, Cristina Pacheco; Raniero, Leandro José; Ferreira, Juliana; Ramos, Lucas de Paula; Aranha, Guilherme Dias; São José dos Campos
Os fios de seda produzidos pelas aranhas são um material que apresenta propriedades únicas como alta elasticidade e resistência a tensão, super-contração, fluorescência, entre outras, sendo então uma fonte de inspiração para a área de pesquisa e desenvolvimento, servindo tanto como matéria prima para trabalhos com o material, como meta para trabalhos que buscam produzir materiais artificiais com propriedades análogas ou superiores. Uma espécie de aranha amplamente utilizada em estudos envolvendo seda é a Trichonephila clavipes, que tece grandes teias orbiculares que apresentam uma coloração dourada e foi escolhida como foco principal deste trabalho. O presente estudo buscou avaliar a utilidade da seda produzida por essas aranhas para aplicação na cultura 3D de células de fibroblasto de camundongo como scaffold natural. Oito espécimes foram coletados da natureza e mantidos em laboratório para obtenção dos fios de seda, que durante o período de manutenção das aranhas, apresentou mudança de coloração de dourado para branco. Foram realizadas análises dos fios por microscopia eletrônica de varredura, EDS, microscopia de fluorescência, DSC e TG para avaliar essa variação. Após isso, células L929 foram cultivadas em meio contendo a seda esfoliada, objetivando a formação de esferoides, que foram avaliados no período de 5 dias e 10 dias para observar o impacto dessa interação. As culturas foram observadas pelos mesmos métodos de microscopia anteriormente aplicados aos fios. Como resultados, foi observada uma afinidade das células com os fragmentos de seda presentes no meio de cultura, com o material não só tendo as células aderidas a ele, mas sendo englobado e até certo ponto sendo absorvido pelos esferoides. Os esferoides, além de se ancorarem a seda, também incorporaram fluoróforos presentes no material, apresentando fluorescência ao serem observados sob o microscópio de fluorescência. Conclui-se que a seda de T. clavipes apresenta potencial como scaffold para a cultura de células bem como capacidade fluorescente que deve ser aplicada dentro da área de cultura de células e na área de engenharia biomédica.
Efeitos dos métodos de preservação na morfologia das sub-regiões da membrana amniótica humana: estudo por imunohistoquímica
(2025-02-26) Sant'Anna, Luciana Barros; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Almeida, Janete Dias; Costa, João Vitor Alcântara da; São José dos Campos
A membrana amniótica (MA) tem atraído atenção como biomaterial para a medicina regenerativa, devido às suas propriedades biológicas e mecânicas, que incluem ações anti-inflamatória, imunomoduladora, antifibrótica, epitelização, estabilidade, resistência e flexibilidade. Essas propriedades são atribuídas às suas características morfológicas e aos fatores bioativos solúveis e insolúveis produzidos por suas células e presentes no estroma da membrana. Recentemente, foram detectadas diferenças nas regiões anatômicas da MA, porém ainda não está estabelecido se essas regiões apresentam diferentes potenciais na regeneração tecidual, e os efeitos dos diferentes métodos de preservação sobre a integridade e morfologia das mesmas. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a integridade estrutural e química da MA nas suas diferentes regiões anatômicas, âmnio placentário (PA) e âmnio refletido (RA), após diferentes métodos de preservação, por meio da técnica de imuno-histoquímica (IHC). Para isto, quatro placentas humanas a termo foram obtidas no Hospital Santa Casa de São José dos Campos e transportadas ao laboratório, onde, em condições estéreis, as membranas amnióticas foram processadas e divididas em 4 regiões: central (R1), intermediária (R2), periférica (R3) e âmnio refletido (R4), de acordo com sua posição em relação ao cordão umbilical. Os fragmentos foram distribuídos em 3 grupos, conforme o método de preservação: Grupo Controle: os fragmentos foram apenas fixados em formol; Grupo Fresca: os fragmentos foram imersos em meio DMEM a temperatura ambiente (24 ºC) por 18h; Grupo Criopreservada: os fragmentos foram imersos em meio DMEM/glicerol (1:1) a -80 ºC por 30 dias. Após os períodos específicos de cada grupo, os fragmentos foram processados histologicamente e incluídos em parafina para obtenção de cortes histológicos, os quais foram submetidos à análise de imuno-histoquímica e quantitativa de imagem para avaliação das proteínas constitucionais da membrana, incluindo citoqueratinas, laminina e colágeno tipo I. A análise das colorações de Hematoxilina-eosina (HE) evidenciou, no Grupo Controle, a região PA (R1, R2 e R3) com epitélio colunar simples, com células justapostas sobre a lâmina basal e núcleos na porção apical das células, contrastando com os achados da região RA (R4), a qual evidenciou epitélio com células cuboidais baixas, com núcleos centralizados. Em todas as sub-regiões anatômicas analisadas, as MA dos grupos experientais GF e GCrio eram compostas por cinco camadas estruturais (epitélio, membrana basal e as camadas compacta, fibroblástica e esponjosa) com aspectos morfológicos similares aos encontrados nas membranas do GC. As glicosaminoglicanas avaliadas por Alcian Blue, bem como as fibras colágenas, laminina e citoqueratinas avaliadas por IHC, apresentaram-se preservadas e íntegras após os diferentes métodos de armazenamento, com maior similaridade entre os grupos controle e criopreservada. Portanto, a criopreservação foi considerada eficiente para preservar a integridade epitelial e mesenquimal, nas quatro sub-regiões da MA, fundamentando seu uso na medicina regenerativa.
Análise do potencial protetor da membrana amniótica em modelo experimental de desmielinização in vitro de fatias organotípicas de cérebro de camundongos
(2025-02-28) Sant'Anna, Luciana Barros; Arisawa, Emília Angela Lo Schiavo; Silva, Tania Mara; Oliveira, Melissa Guimarães de; São José dos Campos
A membrana amniótica (MA) é amplamente reconhecida por suas propriedades regenerativas, anti-inflamatórias e imunomoduladoras, sendo uma alternativa promissora no tratamento de doenças associadas à desmielinização, como a Esclerose Múltipla (EM). A desmielinização é caracterizada pela perda da mielina, estrutura responsável pela condução de impulsos nervosos, comprometendo a funcionalidade neuronal. Neste contexto, este estudo objetivou avaliar a eficácia da MA em proteger o tecido nervoso contra os efeitos desmielinizantes da lisolecitina, utilizando fatias organotípicas de cérebro de camundongos C57BL/6 como modelo experimental in vitro. Para isso, quatro grupos experimentais foram estabelecidos: Controle Sadio/C-S (fatias sadias); Desmielinização/C-DESM (fatias desmielinizadas pela aplicação de lisolecitina); Controle Membrana/C-MA (fatias sadias que receberam apenas MA); e Membrana Desafio Lisolecitina/MA-LISO (fatias que foram recobertas pela MA e submetidas à ação da lisolecitina). As análises incluíram colorações histológicas (Hematoxilina e Eosina, Luxol Fast Blue) para avaliação da integridade estrutural, teste metabólico com TTC para mensurar viabilidade celular, e MEV para avaliação da topografia de superfície tecidual. Os resultados demonstraram que a MA preservou a integridade da mielina e a arquitetura tecidual nas fatias desafiadas pela lisolecitina, enquanto as fatias do grupo C-DESM apresentaram microcavitações, desorganização da arquitetura histológica e perda da distinção entre substância branca e cinzenta. O ensaio TTC mostrou que as fatias protegidas pela MA mantiveram alta atividade metabólica, em contraste com a baixa atividade observada no grupo C-DESM. A análise por MEV reforçou a eficácia da MA, evidenciando a preservação da estrutura tecidual do parênquima cerebral, além de evidências de interação com o tecido que podem estar associados ao seu potencial bioativo. Essas propriedades incluem a modulação do microambiente neural e a liberação de fatores solúveis, que podem contribuir para a manutenção da viabilidade celular e integridade estrutural, mesmo em condições desafiadoras como a exposição à lisolecitina. Conclui-se que a MA atuou como barreira física eficaz contra a desmielinização induzida por lisolecitina, protegendo o tecido cerebral. Além disso, sugere-se que houve possível regeneração tecidual devido às suas propriedades bioativas, que devem ser mais investigadas para potencial aplicação no tratamento de doenças desmielinizantes, como a EM.
Espectroscopia FTIR associada ao machine learning na classificação dos marcadores de predisposição a diabetes mellitus tipo 2
(2025-02-24) Canevari, Renata de Azevedo; Soares, Luís Eduardo Silva; Carvalho, Luis Felipe das Chagas e Silva de; Silva, Isabella Souza; Raniero, Leandro José; São José dos Campos
A glicose é um carboidrato essencial para o metabolismo energético celular, cuja homeostase é regulada por insulina e glucagon. Alterações nesse equilíbrio podem levar ao desenvolvimento de diabetes mellitus do tipo 2 (DM2), cuja identificação precoce é fundamental para mitigar complicações. O objetivo deste estudo é avaliar a viabilidade da técnica de espectroscopia ATR- FTIR aliada ao algoritmo machine learning como um método alternativo na detecção do SNP -866G/A do gene UCP2 e na análise glicêmica de soro humano para identificação de predisposição a DM2. Foram coletados e analisados dados clínicos e bioquímicos de 59 pacientes, incluindo glicemia, hemoglobina glicada, colesterol total e triglicerídeos A técnica de Espectroscopia no Infravermelho por Transformada de Fourier com Reflexão Total Atenuada (ATR-FTIR) foi utilizada para a obtenção dos espectros de 59 amostras de soro e 52 amostras de DNA amplificado pela PCR (reação em cadeia da polimerase). A genotipagem foi realizada pela técnica de PCR-RFLP (Polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição em 52 amostras de DNA obtido do sangue total dos pacientes. A análise de cluster hierárquico e redes neurais artificiais foram utilizadas para a separação dos grupos em relação as concentrações séricas de glicose. As técnicas de análise de componentes principais (PCA) e machine learning (KNN e SVM) foram utilizadas ,para a a classificação dos grupos em relação ao tipo de SNP (AA, GA ou GG) do gene UCP2. A análise da genotipagem revelou uma distribuição equilibrada entre as variáveis bioquímicas e os diferentes genótipos, apresentando diferença significativa apenas nos níveis de insulina, que foram mais elevados no genótipo GA (19,75 µU/mL) em comparação aos genótipos GG (11,00 µU/mL) e AA (14,48 µU/mL). A análise de cluster hierárquico demonstrou eficácia na separação das amostras de soro em grupos com concentrações de glicose acima e abaixo de 100 mg/dL, atingindo uma acurácia de 78%. Modelo redes neurais artificiais (ANN) aplicados a essas amostras obtiveram 83% de precisão, com recall de 91% para a classe 1. A análise de machine learning como o KNN-Cosine, alcançou acurácia de 74% na classificação entre os genótipos AA e GG, e de 73,5% entre GA e GG, na faixa espectral de 1170-1800 cm?¹, A análise de ATR-FTIR combinada com o alogaritmo machine learning foi demonstrada como uma abordagem promissora, menos invasiva e mais acessível que os métodos tradicionais. Essa técnica demonstrou capacidade de distinguir os grupos baseados nos diferentes níveis de glicose p e genótipos do SNP -866G/A.
Análise de glicoproteínas de superfície e matriz extracelular em esferoides de células tumorais de mama MCF-7 após terapia fotodinâmica
(2025-02-04) Pacheco-Soares, Cristina; Ferreira-Strixino, Juliana; Junqueira, Juliana Campos; Santos, Mariela Inês Batista dos; São José dos Campos
O câncer de mama é a forma mais comum de câncer entre as mulheres em todo o mundo. Estima-se que haja milhões de casos diagnosticados a cada ano, com um número significativo de mortes relacionadas à doença. No Brasil, o câncer de mama é o segundo mais diagnosticado, ficando atrás apenas do câncer de pele. A incidência é maior em mulheres entre 40 e 60 anos, mas também pode ocorrer em homens, embora em uma proporção muito menor. O diagnóstico precoce é essencial para melhorar as taxas de sobrevivência e oferecer tratamentos menos invasivos. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma abordagem terapêutica promissora no tratamento do câncer de mama, esta técnica se baseia na utilização de uma substância fotossensibilizante e uma fonte de luz que gera espécies reativas de oxigênio causando danos permanentes aos compartimentos celulares. Os objetivos do trabalho se baseiam em analisar os efeitos da terapia fotodinâmica em marcadores de células epiteliais e na fisiologia de esferoides de células tumorais de mama MCF-7 e na linhagem não tumoral MCF-10A, além de estabelecer uma metodologia para o cultivo tridimensional de células. Utilizou-se linhagens celulares de câncer de mama (MCF-7), células de tecido mamário saudável (MCF-10A) e linhagem de macrófagos (RAW-264.7). Para a TFD foi utilizado a Alumínio Ftalocianina Tetrasulfonada (AlPcS4) na concentração de 5 µM. mL-1 , com tempo de incubação de 1 h em estufa ao abrigo da luz, o tempo de irradiação foi de 1 minuto e 45 segundos no comprimento de onda de 660 nm. Para os testes foram feitos ensaios de taxa de atividade metabólica (MTT), ensaios de glicosilação para determinar a presença de glicoproteínas como manosamina, galactosamina e glucosamina, além de glicoproteínas de matriz extracelular como laminina e fibronectina. Testes de interação celular entre células e macrófagos, fotografias por microscópio eletrônico de varredura (MEV) e marcação de atividade nuclear e mitocondrial por microscopia confocal. Os resultados demonstram a efetividade da TFD nas células de câncer de mama, no qual a morte celular foi detectada em todos os testes feitos, os resultados foram obtidos por meios quantitativos pelo MTT e qualitativos pelas fotografias feitas em microscopia de fluorescência, confocal e de varredura. Conclui-se que as análises pós TFD dos marcadores celulares demonstraram a significativa redução da atividade de células de câncer. Sendo assim, a TFD é eficaz para a redução da população celular cancerígena.
Curcuma longa L. Extract and Photodynamic Therapy are Effective against Candida spp. and Do Not Show Toxicity In Vivo
(Wiley Online Library) Meccatti, Vanessa Marques; Moura, Larissa de Souza; Pinto, Juliana Guerra; Ferreira‐Strixino, Juliana; Hasna, Amjad Abu; Figueiredo-Godoi, Lívia Mara Alves; Junqueira, Juliana Campos; Marcucci, María Cristina; Ramos, Lucas de Paula; Carvalho, Cláudio Antônio Talge; Pucci, César Rogério; Oliveira, Luciane Dias de
Radiotherapy induces a higher level of Candida spp. colonization, resulting in oral candidiasis. This study aimed to evaluate the phototransformation potential of the glycolic extract of Curcuma longa (C. longa); the antifungal activity of C. longa, curcumin, and antifungal photodynamic therapy (aPDT) with blue light-emitting diodes “LED” on Candida albicans and Candida tropicalis in vitro; and the toxicity of C. longa and curcumin in Galleria mellonella model. In order to confirm the light absorption capacity of the C. longa extract, its phototransformation potential was evaluated. The antifungal effect of C. longa, curcumin, and aPDT was evaluated over Candida spp. Finally, the toxicity of C. longa and curcumin was evaluated on the Galleria mellonella model. The data were analyzed using the GraphPad Prism 5.0 software considering α = 5%. It was found that C. longa, curcumin, and aPDT using blue LED have an antifungal effect over C. albicans and C. tropicalis. The extract of C. longa 100 mg/mL and curcumin 200 μg/mL do not show toxicity on Galleria mellonella model.
Regimento dos Programas de Pós-Graduação Vinculados ao Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento Universidade do Vale do Paraíba: aprovado pela Resolução Nº 14/Consun/2019 – para vigência a partir do ano de 2020 (OFÍCIO 08/Dir. IP&D/2019)
(Univap, 2019) Universidade do Vale do Paraíba; Univap; Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento; São José dos Campos
Nanopartículas de ouro funcionalizadas aos complexos de Gadolínio e EGF para detecção precoce do câncer de mama
(2021-04-09) Castilho, Maiara Lima; Ferreira-Strixino, Juliana; Liu, Andréa Santos; Queiroz, Suélio Marinho de; Raniero, Leandro José; São José dos Campos
O câncer pode ser definido como doença heterogênea vinculada a fatores ambientais, estilo de vida e mutações, representando a segunda causa de morte no Brasil e no Mundo. Dentre os diferentes tipos, destaca-se o câncer de mama, visto ser a maior causa de morte que acometem mulheres, sendo considerado um problema de saúde pública. O carcinoma mamário exibe diferentes vias de sinalização para a sobrevivência, crescimento e tratamento. O subtipo basalóide representa aproximadamente 20% dos casos de carcinoma mamário, sendo conhecido como triplo negativo por apresentar a ausência da expressão de receptores de estrogênio, progesterona e do fator de crescimento epidérmico 2, e superexpressão do receptor do fator de crescimento epidérmico. Essas características podem ser associadas ao difícil diagnóstico e pior prognóstico. Neste contexto, o diagnóstico precoce destes tipos de câncer oferece uma possível solução para essa problemática. Assim, a ressonância magnética (RM) associada ao uso de substâncias paramagnéticas, conhecidas como os agentes de contraste, entre eles o Gadolínio (Gd) podem ser utilizados como um método alternativo para o diagnóstico precoce. Embora a RM possua uma alta sensibilidade, esta técnica apresenta baixa especificidade que podem ser superadas com o uso das nanopartículas de ouro, que se destacam como uma opção promissora para diagnóstico direcionado, visto permitir funcionalização de moléculas biológicas como a proteínas, peptídeos entre outros. Assim, o objetivo desta dissertação é desenvolver nanopartículas de ouro transportadoras do agente de contraste à base de Gd com o direcionamento ativo, por meio da proteína do fator de crescimento epidérmico. Este nanocontraste foi sintetizado utilizando a química via carbodiimida para diagnóstico precoce câncer de mama, sendo caracterizado pelas análises de Espectroscopia no Infravermelho por Transformada de Fourier, Espectroscopia no UV-visível e Espalhamento Dinâmico de Luz. Os resultados indicaram que o nanocontraste apresentou um diâmetro médio de 43 nm com boa estabilidade coloidal, a eficiência do nanocontraste para diagnóstico do câncer de mama foi determinado pela intensidade relativa de sinal produzida em uma região de interesse em comparação ao contraste comercial. Embora, o nanocontraste tenha mostrado uma intensidade de sinal inferior ao comercial, é importante ressaltar que o mesmo possui uma molécula alvo para o direcionamento o que permitirá uma maior sensibilidade e especificidade para diagnóstico precoce do câncer. A viabilidade celular e atividade mitocondrial em linhagem celular MDA-MB-468, exibiu excelente biocompatibilidade e seletividade do nanocontraste, bem como baixa citotoxicidade, o que evidência grande potencial para aplicações em diagnóstico.
Síntese e caracterização de macroesferas de vidro bioativo : estudo da osteogênese in vitro e in vivo
(2021-08-10) Oliveira, Ivone Regina de; Sant'Anna, Luciana Barros; Borges, Alexandre Luiz Souto; Costa, Karen Julie Santos Grancianinov; Vasconcellos, Luana Marotta Reis de; São José dos Campos
Esferas de vidros bioativos (BV) com formato uniforme e variação de tamanho específica promovem a dissolução e liberação de íons de forma precisamente controlada. As partículas esféricas também permitem que as estas sejam empacotadas em um arranjo 3D, o que resulta em uma porosidade aberta que melhora o crescimento ósseo através da implantação. No método de extrusão para a produção de esferas, o alginato é extrudado gota a gota na solução de gelificação, tal como CaCl2, íons Ca2+ instantaneamente reagem com os grupos carboxílicos de resíduos de ácido gulurônico na superfície da gota, então se difundem para dentro e reagem para formar o gel de alginato de Ca. Neste trabalho, o BV-58S foi sintetizado pelo método sol-gel à temperatura ambiente usando TEP (Trietilfosfato) ou ácido fosfórico (AF) como precursores de fósforo e a reação de gelificação foi catalisada pela adição de NH4OH (1 ou 2M). Os pós foram misturados com solução de alginato de sódio e extrudados gota a gota por uma bomba em solução de gelificação de cloreto de cálcio 0,1 M para produzir partículas esféricas. As macroesferas BV-58S produzidas foram caracterizadas quanto à densidade teórica, área de superfície específica / distribuição de tamanho de poro, bioatividade por um ensaio de fluido corporal simulado (SBF), experimentos de cultura de células e ensaio biológico in vivo. A partir da síntese das macroesferas observou-se que a técnica aplicada foi eficiente, pois resultou em materiais com formatos fortemente esféricos com elevados valores de área superficial e densidade, além de que os materiais exibiram caráter bioativo a partir da formação de uma camada de apatita sob a superfície dos materiais quando imersos em SBF. Os testes biológicos in vitro indicaram que as macroesferas estudadas e o material controle BV45S5 não apresentaram efeito citotóxico e permitiram que ocorresse o processo de osteogênese in vitro , pois foi detectada a presença do indicador osteogênico de fosfatase alcalina e a formação de matriz mineralizada. Os resultados referentes aos ensaios biológicos in vivo não exibiram diferença estatística entre os grupos experimentais MTEP-2M, BV45S5 e controle coágulo nos dois períodos avaliados (p>0,05). Entretanto comparando as semanas observou-se diferença entre o grupo MTEP-2M (2 semanas) e BV45S5 (2 semanas),em relação aos grupos BV45S5 (6 semanas) e coágulo (6 semanas), sendo que os grupos em 2 semanas apresentaram menor formação óssea (p<0,05). Contudo o osso neoformado do experimento in vivo foi semelhante ao observado no grupo controle no qual o método utilizado neste estudo foi capaz de preparar macroesferas de vidro bioativo que indicam ser biomateriais promissores para melhorar a regeneração do tecido ósseo.
Plano de Desenvolvimento Institucional da Univap 2021-2025
(2021) ; Beltrame Junior, Milton; Bicudo, Silene Fernandes; Solano, Edgar; Vieira, Lúcia; Aquino, Luiz Carlos Andrade de; Peixoto, Manoel Otelino da Cunha; Paula, Maria Tereza Dejuste de; Camargo, Rafaella Guimarães Moraes; Costa, Sandra Maria Fonseca da; Canhoto, Alberto Eugênio; São José dos Campos
O Plano de Desenvolvimento Institucional (PDI) é um instrumento dinâmico de reflexão, planejamento e consulta para nortear estrategicamente o conjunto das ações institucionais da Univap, visando realizar sua missão fundamentada em seus valores e princípios institucionais próprios. O PDI 2021-2025 projeta o esforço institucional da Univap, no atual momento de sua história, para consolidar sua identidade comunitária de instituição que busca acolher e ser acolhida pelo meio social no qual está inserida, tendo como eixo central a articulação entre ensino, pesquisa, extensão e gestão de excelência, voltados aos interesses da comunidade, com sustentabilidade de suas ações e processos.
Análise de dados do programa de triagem neonatal de fibrose cística através da quantificação de IRT – Tripsinogênio Imunorreativo utilizando aprendizado de máquina para reduzir falsos positivos
(2023-03-07) Oliveira, Virgínia Klausner de; Vieira, Lúcia; Sakane, Kumiko Koibuchi; Ogawa, Guilherme Maerschner; Godoy, Carlos Marcelo Gurjão de; Custódio, Paulo Rogério Siqueira; São José dos Campos
Essa pesquisa trata-se da utilização de florestas aleatórias para criação de uma metodologia para desenvolvimento de um modelo capaz de fazer previsão de casos verdadeiros positivos na triagem neonatal de fibrose cística, utilizando dados sintéticos para treinamento do modelo e variando os parâmetros do modelo para buscar aquele que retorne o melhor poder preditivo, assim tendo uma prova de conceito para utilização dessa metodologia para encontrar um modelo capaz de fazer a previsão de verdadeiros positivos para fibrose cística em um banco de dados real. A fibrose cística é uma doença, que faz parte do programa nacional de triagem neonatal brasileiro que é causada por mutações do gene de Condutância Transmembrana da Fibrose Cística (CFTR, do inglês Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator). Esta doença é caracterizada pela produção de um muco espesso podendo causar problemas respiratórios, gastrointestinais, complicações metabólicas entre outras enfermidades que variam de acordo com as mais de 2000 mutações existentes. Já a floresta aleatória é um algoritmo comum de aprendizado de máquina que consiste em utilizar um banco de dados para treinar um modelo de inúmeras árvores de decisão capazes de criar critérios para tentar explicar um dado alvo baseando-se em atributos, para poder fazer previsões em um novo banco de dados desconhecido utilizando somente os atributos. Esse tipo de tecnologia vem ganhando espaço na área da saúde principalmente na área de diagnóstico por conta de seu alto poder preditivo. A triagem dessa doença faz parte do programa de tiragem neonatal brasileiro através do teste do pezinho, que é feita com a quantificação da tripsina imunorreativa, este exame possui alta incidência de falsos positivos. Se esta prova de conceito for positiva pode-se fornecer atendimento precoce a esses pacientes, aumentando suas expectativas de vida. Para isso, foi utilizado índices gerais (número de pacientes triados e número de exames alterados) de triagens e diagnóstico do laboratório de triagem neonatal APAE (Associação de Pais e Amigos dos Excepcionais) de São Luís do Maranhão, para desenvolver uma metodologia que buscasse sempre a melhor sensibilidade para o modelo. Os resultados obtidos nesta dissertação com dados sintéticos mostram que essa metodologia pode permitir alcançar o objetivo devido a melhora que ela trouxe na sensibilidade do modelo mesmo que utilizando dados sintéticos para o treinamento, o que tende a melhorar quando utilizar dados reais de pacientes, pois a correlação desses dados será maior o que fará com que o modelo tenha melhor ajuste sobre os dados sendo capaz de explica-los com a sensibilidade e precisão superior à obtida com os dados sintéticos.
Obtenção de lipídios por rompimento de membrana celular usando plasma não-térmico: uma abordagem alternativa para produção sustentável de lipídios
(2024-08-02) Oliveira, Virgínia Klausner de; Castilho, Maiara Lima; Contini, Rita de Cássia Mendonça Sales; Cordeiro, Thainá Barbosa de Lima; Vieira, Lúcia; São José dos Campos
Leveduras oleaginosas têm se destacado como produtoras de lipídios de interesse industrial como fonte alternativa de produção de lipídios devido à necessidade de reduzir a dependência de recursos fósseis e promover o desenvolvimento de bioprodutos renováveis. Rhodosporidium toruloides (Rt) é uma levedura oleaginosa promissora porque pode acumular grandes quantidades de lipídios neutros intracelulares. Esses lipídios têm valor comercial em diversos setores, incluindo biocombustíveis, produção de alimentos, produtos químicos e farmacêuticos. Nesta dissertação, foram estudados o rendimento da Rt e o rompimento da parede celular para posterior extração lipídica. A ruptura da parede celular foi realizada de duas formas: via plasma não térmico e extração direta do óleo por meios químicos. A morfologia celular foi analisada por microscopia eletrônica de varredura (MEV) antes e depois da ruptura da parede celular por aplicação de plasma não-térmico. As análises do óleo foram realizadas após ruptura da parede celular por meio de espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), e cromatografia gasosa com detector de ionização de chama (CG-FID). O resultado de CG-FID de ambas as vias de rompimento da membrana celular apresentam maior porcentagem de ácido palmítico e ácido oleico e seus derivados, a diferença pode ser notada na quantidade desses ácidos graxos presentes em cada amostra, com tratamento a plasma é possível observar valor elevado da concentração de ácido palmítico em detrimento do tratamento com ácido. O tratamento com plasma não-térmico mostrou-se eficiente na quebra com período de exposição de 5 minutos, e o óleo extraído fica sólido à temperatura ambiente, em torno de 24 °C. Com a técnica de MEV foi possível observar a morfologia e os danos causados à parede celular do o Rt, com espectros de FTIR confirmando a presença de ácido palmítico e ácido oleico na composição dos lipídios extraídos. Por fim, as duas amostras de óleo extraídas, com rompimento via plasma e via ácido, por solventes químicos foram testadas como lubrificante entre um par tribológico de esfera e placa de aço 316L em atmosfera ambiente em uma trilha de 1 mm com força normal de 5N e frequência de 1Hz. Neste contexto, os resultados indicaram uma redução mais significativa no coeficiente de atrito para o óleo obtido via plasma não-térmico. A composição química deste óleo foi analisada para melhor elucidar os resultados obtidos.
Análise do comportamento do sistema nervoso autônomo de alunos do curso de formação em controle de tráfego aéreo durante a prática simulada de não radar
(2008-08-01) Carvalho, Regiane Albertini de; Cunha, Tatiana de Sousa da; Pacetti, Giovani Arnaldo; Silveira, Nelson José Freitas da; São José dos Campos
Objetivo. O Objetivo deste estudo foi analisar o comportamento do sistema nervoso autônomo através da análise da variabilidade da freqüência cardíaca em alunos do curso de formação militar na especialidade de controle de tráfego aéreo (BCT), na Escola de Especialista de Aeronáutica (EEAR) em Guaratinguetá. Métodos.Foram analizados 19 alunos do sexo masculino, saudáveis, com idade de 21,0 ± 1,52 anos. Os alunos foram submetidos a dois protocolos diferentes: a) Repouso; b) Prática Simulada de não Radar. Os intervalos RR foram registrados durante os 2 protocolos através de um monitor cardíaco (polarS810) e analisados através da Transformada Wavelet Contínua. Resultados. Observou que a energia calculada através da área sob a curva entre 0,04 e 0,15 Hz (LF) foi igual a 852.46 ± 519.67 para o comportamento simpático durante a prática simulada de não radar e de 332.4 ± 286.58 para o simpático durante o repouso. Quando analisou de forma estatística, esses dados apresentaram difirenças significativas p+0.05. Analisando o comportamento da freqüência cardíaca (FC) nas situações de prática simulada de não radar e repouso obtivemos 86.424 ± 12.365 e 60.8050 ± 7.3017, que apresentaram diferença significativas p=0.05. Os valores de inrensidade de energia para a faixa de freqüência de 0.15 a 0.40 Hz (HF) que representa a influiência do Sistema Nervoso Parassimpático sobre o controle da FC, foram encontrados durante a prática simulada de não radar 379.38 ± 413.76 e para o repouso 244.77 ± 260.23. Esses resultados não apresentaram diferenças, demonstrando que o ramo parassinpático do SNA não sofre grandes estimulações nas situações supracitadas, adotando como significância p=0.05. Investigando a razão (LF/HF) encontramos durante a prática simulada de não radar uma razão de 3.1534 ± 1.3141 e para o repouso a razão de 1.1069 ± 0.5329, observamos diferenças significativas p = 0.05 entre as razões impulsionadas pela grande estimulação do ramo simpático durante a prática simulada de não radar. Quando analisamos de forma isolada os dados da prática silulada de não radar para área simpática e para área parassimpatica, observamos diferença entre o ramo simpático e parassimpático do SNA nesta situação e os dados coletados no repouso também analizasoa de forma isolada para área simpática e parasimpática não indicaram diferença estatística adotando como significância p = 0.05, evidenciando um bom equilíbrio do SNA reforçando os valores expressos pela razão anteriosmente citados. Conclusão. Cintudo, podemos salientar que a transformada Wavelet Contínua possibilitou uma análise no domínio da freqüência do comportamento do SNA, se mostrando uma ferramenta eficaz na análise da VFC.
Perfil da temperatura induzida pela radiofrequência em tecidos biológicos ex vivo aferido pela termografia infravermelha computadorizada
(2020) Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; Lima, Mário Oliveira; Marcos, Rodrigo Labat; Conceição, Francileine Rodrigues da; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; São José dos Campos
A radiofrequência (RF) é um recurso utilizado no tratamento da flacidez e gordura localizada, sendo considerada eficaz e de baixo custo. A termografia infravermelha computadorizada (TIC) tem se demonstrado como uma ferramenta não invasiva de diagnóstico eficaz, que permite o monitoramento em tempo real das variações de temperatura (T) nos tecidos biológicos. Buscando estudar os efeitos da RF nos tecidos, este estudo tem por objetivo avaliar variações na massa, espessura e validar a TIC para detecção de alterações de T, antes e após aplicação da RF, em tecidos biológicos ex vivo. Foram utlizados17 corpos de prova (Susscrofa domesticus), peso entre 0,260 e0,646Kg, alocados em dois grupos: G1-potência de 60 W, seis animais, e G2-potência de 120 W, 11 animais. As aplicações de RF foram realizadas com aparelho de RF monopolar em 27,12 MHz, por 5 minutos, em uma área de 100 cm². Foram coletados dados referentes à massa, espessura e aferidas as temperaturas superficial e lateral com auxílio de termômetro infravermelho(TI), enquanto o perfil de profundidade térmica foi avaliado pela TIC (ThermaCam S65HS, FLIR ®) antes e após o tratamento com RF. Os dados coletados da TIC foram analisados pelo software ThermaCAM Researcher Pro 2.8 SR-1. Os demais resultados foram analisados utilizando o programa BioStat 5.3. Os resultados demonstraram variação média do peso dos corpos de prova antes e após a RF de 1,83±1,34g (p= 0,02) em G1 e 2,36±1,29g(p<0,0001) em G2; não houve variação da espessura em nenhum dos grupos estudados. As temperaturas aferidas com TI na região superficial dos corpos de prova apresentaram aumento de 13,6±6,01º C (p= 0,0039) em G1 e de 32,82±15,77º C(p<0,0001) emG2, após a RF. As imagens obtidas pelo TIC, após a RF, demonstraram que as áreas com maior T também se localizavam na superfície, com aumento de 12,15º C em G1 (p= 0,0083) e 22,91º C em G2 (p= 0,0033). Além disso, a avaliação dos termogramas demonstrou tendência de queda das temperaturas nas camadas mais profundas dos corpos de prova. Os resultados deste estudo pioneiro permitem concluir que tanto a TIC quanto o termômetro infravermelho demonstraram elevação da temperatura nos corpos de prova após a aplicação da RF, principalmente na região superficial das amostras estudadas. Alerta-se, ainda, que quando utilizada a potência de 120 W, detectou-se drástico aumento de temperatura na epiderme, que pode causar desconforto ou até mesmo queimaduras ao paciente. Assim, a TIC permite avaliar a profundidade do aquecimento induzida pela aplicação da RF em tecidos ex vivo, com valores semelhantes ao obtidos com o termômetro infravermelho, essa aplicabilidade pode ser utilizada para o monitoramento de procedimentos clínicos na área da estética.
O uso da inativação fotodinâmica como alternativa para descontaminação de fragmentos de pele destinados a transplantes: modelo experimental em pele de suínos
(2020-11-13) Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; Lima, Fernanda Pupio Silva; Ribeiro, Martha Simões; Núñez, Silvia Cristina; Araújo, Dhenise Mikaelly Meneses de; São José dos Campos
A cobertura temporária por pele biológica ou sintética é importante para a cura completa e mais rápida de queimaduras e outros defeitos de pele. Atualmente é utilizada a radioesterilização para garantir a qualidade dos tecidos usados em transplantes e outras aplicações clínicas. Alterações morfológicas e funcionais no tecido podem ser devido à absorção da energia ionizante liberada durante a radiação, além de acarretar danos ao profissional habilitado, como também o alto custo empregado nessa técnica. Diferentemente a inativação fotodinâmica mostra evidências de ser viável, tem baixo custo e com danos mínimos à saúde do profissional que está operando. Então levantamos a questão, a utilização da inativação fotodinâmica pode ser uma alternativa em banco de tecidos para descontaminação de pele? A inativação fotodinâmica é uma abordagem multifatorial que envolve três componentes principais, fotossensibilizador, luz e oxigênio, e tem sido utilizada como um método alternativo para erradicar microrganismos patogênicos, como bactérias e fungos. Este estudo tem por objetivo avaliar os efeitos da inativação fotodinâmica na pele suína, visando o seu uso para descontaminação da pele destinadas a transplantes. Foram utilizados umtotalde47 fragmentos de pele suína com dimensões de tamanho 1x1 cm, provenientes da região da orelha do suíno. Foi realizado o experimento em duas etapas, sendo diluído o azul de metileno na água destilada estéril a partir de 10 milimolar para concentração de 50, 75 e 100 micromolar na primeira etapa e 12,5 e 25 micromolar na segunda etapa. As placas tiveram um tempo de pré-irradiaçãode 20 minuto. Para este trabalho foi utilizado o equipamento LEDbox, emitindo660nm. As placas foram expostas à radiação durante um período de 20 minutos. Foi adotada a diluição seriada de 1:10 e o método de escorrimento na placa conforme adaptação da metodologia de Tippelskircha et al. (2018). Após 24 h de incubação, as placas foram retiradas da incubadora para fazer a contagem das unidades formadoras de colônias. Para a análise morfológica foi utilizada a tomografia por coerência óptica. Os resultados obtidos apontam que os grupos das concentrações de azul de metileno de 12,5 e 25 µM são estatisticamente diferentes (p<0,05), do grupos das concentrações de 75 e 100 µM, sendo os grupos das concentrações de 12,5 e 25 µM apresentaram-se uma maior eficácia na redução das UFCs. As imagens da tomografia de coerência óptica mostraram que é possível observar a camada do epitélio nos diferentes grupos, sem alteração ou deformação em comparação com a pele do grupo controle. A literatura apresenta poucos estudos voltados na área e com isso houve uma dificuldade maior e limitação no desenvolvimento da metodologia. Os resultados obtidos são conflitantes, pois demonstram o potencial da inativação fotodinâmica e do azul de metileno isolado, para a descontaminação da pele, embora haja a necessidade de mais ensaios laboratoriais para desempenhar uma maior inativação dos microrganismos na pele. É um estudo inovador, teve como objetivo estabelecer um modelo de protocolo de baixo custo para investigação de descontaminação da pele com o uso da inativação fotodinâmica em modelo animal. A metodologia foi bem definida e detalhada, sendo possível a repetição de mais testes, e foi alcançado objetivo de estabelecer um modelo de procedimento operacional padrão para a realização de descontaminação da pele.
Sistema microprocessado para avaliação de amplitude de movimento e da força muscular, do conjunto osteomioarticular, com a utilização de acelerômetro e giroscópio
(2020-10-05) Lima, Mário Oliveira; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Silva, Alessandro Pereira; Lemos, Sergio Luiz; São José dos Campos
Introdução: A postura estável de um indivíduo é o resultado de um equilíbrio de forças concorrentes, no conjunto musculoesquelético, onde os músculos tem a função de gerar as forças necessárias para a estabilização esquelética. A condição de movimento com o domínio da capacidade funcional, é um fator importante na qualidade de vida, estado geral de saúde, vitalidade e saúde mental. Desta forma, a amplitude de movimento (ADM) e a força muscular são dois fatores muito relevantes para avaliação do conjunto musculoesquelético de um indivíduo, permitindo diagnóstico diferencial, prognóstico e tratamento de distúrbios musculoesqueléticos e neuromusculares. Objetivo: Desenvolver e validar um sistema para medição de ADM e forçamuscular, utilizando sensores inerciais, que realizem a aquisição de dados e permitam analisar o desempenho de movimentos no conjunto musculoesquelético. Métodos: Foram colocadossensores em cinco indivíduos hígidos, ambos os gêneros, onde os mesmos serão submetidos a sériesde movimentos, de flexão de cotovelo e joelho no dinamômetro isocinético Biodex System 3TM. As séries para ensaios de ADM foram sem carga, e as séries para ensaios de força foram com carga. A validação do sistema foi realizadacom a análise e comparação com os dados obtidos no dinamômetro isocinético. Resultados: O sistemadesenvolvidomostrou resultados confiáveis para a medida angular, validando o estudo. Com relação a força, este estudo não tem o intuito de fornecer dados da força como sendo absolutos,uma vez que a mesma é calculada a partir dos dados de variação angular do movimento. Omodeloutilizado permite obter dados quantitativos para a comparação em um mesmo indivíduo ao longo do tempo.Estudos futuros podem ser conduzidos para análise do melhor modo de uso ou representação deste modelo, ou mesmo, do seu aprimoramento.Conclusão: O sistema desenvolvido é um protótipo, mas tem a possibilidade de se tornaruma boa ferramenta para a área defisioterapia,abrindo também oportunidades de estudos na área da reabilitação sensório motora.

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