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Navegando por Autor "Ferreira-Strixino, Juliana"

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Ação da terapia fotodinâmica com curcumina na interação de macrófagos e amastigotas de L. braziliensis e L. major
(2021-09-21) Ferreira-Strixino, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Silva, Newton Soares da; Ribeiro, Martha Simões; Lindoso, José Angelo Lauletta; Pereira, André Henrique Correia; São José dos Campos
A leishmaniose tegumentar (LT) é uma doença negligenciada que está entre as 10 doenças infecciosas mais importantes do mundo. O tratamento convencional é feito com antimoniais pentavalentes e anfotericina, medicamentos que apresentam diversos efeitos colaterais e contraindicações. A terapia fotodinâmica (TFD) com curcumina surge como alternativa no tratamento da LT, visto que se baseia em aplicação local, não invasiva e seletiva, enquanto utiliza um composto natural de baixo custo como fotossensibilizador. Esse trabalho teve por objetivo a avaliação, in vitro, da TFD aplicada sobre amastigotas de L. braziliensis e L. major em interação com macrófagos por meio de análise de viabilidade, morfologia, internalização do FS, atividade e potencial de membrana mitocondrial e recuperação de parasitos pósTFD. Foram utilizadas concentrações de curcumina em diluições seriadas, de 500 a 7,8 µg.mL-1, e irradiação com luz azul (450 nm), irradiância de 36 mW/cm² e fluência de 10 J/cm². Os resultados demonstram ampla inativação e baixa citotoxicidade da TFD com curcumina em macrófagos infectados e não infectados nas concentrações de 15,6 e 7,8 µg.mL-1. A internalização do FS demonstrou localização do composto em todo o citoplasma da célula, além de concentração no núcleo, e nos amastigotas intracelulares. A morfologia pós-tratamento se mostrou alterada, exibindo destruição celular nos grupos submetidos à TFD, enquanto os grupos não tratados permaneceram com a morfologia dos macrófagos preservada. Foi observada elevação do potencial de membrana mitocondrial e diminuição da atividade mitocondrial nos grupos que receberam a terapia. Além disso, a contagem de parasitos recuperados pós-TFD demonstrou que houve diminuição do número de parasitos viáveis, indicando que a terapia pôde inativar não só os macrófagos, mas também os amastigotas intracelulares para as duas espécies de Leishmania estudadas. Os testes realizados demonstraram potencial da TFD com curcumina nas concentrações de 15,6 e 7,8 µg.mL-1, promovendo a inativação de macrófagos infectados com Leishmania, bem como alterações celulares morfológicas e nopotencial de membrana e atividade mitocondrial.
Ação da Terapia Fotodinâmica em linhagem celular de gliossarcoma 9L/lacZ utilizando baixas fluências e concentrações de Fotoenticine e Photodithazine
(2022-03-22) Ferreira-Strixino, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Castilho, Maiara Lima; Tada, Dayane Batista; Vitório, Gabrielle dos Santos; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
O Gliossarcoma é um câncer agressivo, com alta propensão metastática. Atualmente seu tratamento consiste em ressecção cirúrgica seguida de radio-quimioterapia, oferecendo baixa expectativa e qualidade de vida. Como proposta alternativa, a Terapia Fotodinâmica (TFD) se apresenta como método seletivo de tratamento, combinando o uso de um fotossensibilizador (FS), oxigênio molecular e luz. Esses três elementos geram as espécies reativas de oxigênio, levando à morte celular. O objetivo desse estudo foi avaliar a ação da TFD utilizando as clorinas Fotoenticine (FTC) e Photodithazine (PDZ) em baixas concentrações e fluências, verificando a diferença entre seus efeitos. Foram utilizadas células 9L/lacZ e concentrações de 1,55 µg.mL -12,50 µg.mL -1 e 50,00 µg.mL-1de ambas clorinas. As células foram irradiadas com um dispositivo a base de LED em 660 nm nas fluências de 1 J/cm², 5 J/cm² e 10 J/cm², em 25 mW/cm². Observou-se que ambas clorinas apresentam indícios da formação de fotoprodutos após irradiação e são internalizadas em toda extensão citoplasmática, com restrição ao núcleo. Os testes de citotoxicidade demonstraram redução >98% da viabilidade celular e queda na atividade mitocondrial >86% nas concentrações de 50,00 µg.mL-1 e 12,50 µg.mL-1 em todas as fluências de luz testadas, entretanto a concentração de 1,55 µg.mL-1não apresentou um resultado tão eficaz na fluência de 1 J/cm². Houve alteração na adesão celular após TFD conforme diminuição da concentração, no qual as células desprendidas se apresentavam mortas, indicando que o desprendimento celular corresponde à uma característica do processo de morte celular, assim como as alterações morfológicas apresentadas, como a perda da extensão citoplasmática, adquirindo formato arredondado. A imunodetecção de HSP70 diminuiu, enquanto a de HSP27 aumentou após TFD com o FTC. Com isso, conclui-se que ambos FS foram eficazes na TFD em células de gliossarcoma, com destaque para a concentração de 50,00 µg.mL-1 na fluência de 5 J/cm². Além disso, levando em consideração a elevada imunodetecção da HSP27 na TFD com o FTC, o PDZ se apresenta como um promissor FS para ser empregado na TFD com células 9L/lacZ, encorajando estudos in vivo.
Ação de nanopartículas de prata associada ao Imipenem aplicadas em cepas de Klebsiella pneumoniae com diferentes perfis de susceptibilidade
(2023-03-09) Castilho, Maiara Lima; Ferreira-Strixino, Juliana; Silva, Carlos Alberto; Santos, Tiago Gonçalves; Silva, Inglid Fontoura da; Raniero, Leandro José; São José dos Campos
Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) é uma bactéria oportunista que têm chamado atenção devido à resistência aos antibióticos carbapenêmicos. O tratamento em pacientes com infecções graves tem sido desafiador e novas tecnologias vem sendo investigadas entre elas as nanopartículas de prata (AgNPs) por apresentarem efeitos antimicrobianos. Este trabalho tem como objetivo analisar a associação das AgNPs ao antibiótico carbapenêmico Imipenem (IMP) contra cepas de K. pneumoniae. As AgNPs foram sintetizadas pelo método bottom-up e recobertas com ácido-alfa lipóico. Testes de susceptibilidade antimicrobiana foram realizados em formas planctônicas utilizando quatro cepas de K. pneumoniae com diferentes perfis de susceptibilidade ao IMP. A associação foi testada em biofilme e os ensaios de cristal violeta e resazurina foram realizados para a classificação e análise da concentração inibitória mínima, respectivamente. A redução da concentração do IMP com a associação as nanopartículas (NPs) foi encontrada em todas as cepas estudadas na forma planctônica e o sinergismo entre as AgNPs e o IMP foi demonstrado por meio da análise da concentração inibitória fracionada. Em biofilmes reduções significativas foram observadas e a atividade metabólica foi reduzida em índices =80% caracterizando a concentração inibitória mínima do biofilme (MBIC). Assim, a MBIC para a cepa ATCC foi de 2 µg/mL e para as cepas clínicas com perfil sensível e resistente de 1 µg/mL e para o perfil intermediário 8 µg/mL. A associação proposta no estudo obteve efeito inibitório em diferentes perfis de K. pneumoniae, tanto em formas planctônicas quanto biofilme com um comportamento peculiar no perfil resistente ao IMP.
Action of Photodynamic Therapy at Low Fluence in 9 L/lacZ Cells after Interaction with Chlorins
(MDPI) Vitorio, Gabrielle dos Santos; Godoi, Bruno Henrique; Pinto, Juliana Guerra; Ferreira, Isabelle; Pacheco Soares, Cristina; Ferreira-Strixino, Juliana
Gliosarcoma (GS) is a primary malignant neoplasm of the central nervous system, treated with an unfavorable prognosis with surgery, radiotherapy, and chemotherapy. The treatment for GS consists of surgical resection, almost always accompanied by radiotherapy and/or chemotherapy, given the invasive behavior of the tumor. Photodynamic Therapy (PDT) is studied as an alternative method that combines light, a photosensitizer (PS), and molecular oxygen. This study aimed to compare the effects of PDT using the photosensitizers Fotoenticine (FTC) and Photodithazine (PDZ) at low concentrations and fluences. For this study, 9 L/lacZ cells, concentrations of 1.55 µg mL−1 , 12.5 µg mL−1 , and 50 µg mL−1 of chlorins and fluences of 1, 5, and 10 J/cm2 were used. A test was also carried out with Trypan Blue in L929 cells at the mentioned concentrations at 5 J/cm2 . Both chlorins were internalized in the cytoplasm, with a significant reduction in viability (>95%) in almost all groups and altered cell adhesion and morphology after PDT. HSP70 expression decreased in both PS, while HSP27 increased only in PDT with FTC, and although there was a change in cell adhesion in the 9 L/LacZ lineage it was not observed in the L929 fibroblast lineage. Both chlorins were effective, highlighting the concentration of 50 µg mL−1 at the fluence of 5 J/cm2 ; according to the present study, the PDZ showed better results.
Adverse effects of topical photodynamic therapy in rosacea: Case report
(Elsevier) Sebbe-Santos, Priscilla Fróes; Miquilini, Patrícia; Pinto, Juliana Guerra; Menezes, Priscila Fernanda Campos de; Ferreira-Strixino, Juliana
Rosacea is a chronic and inflammatory skin condition, with relapses being a common characteristic. Its treatments are based on cosmetics, drugs, and the application of procedures based on high-powered light. Photodynamic Cosmetic Therapy (PCT) combines light, a photosensitizer (PS), and molecular oxygen present in tissues, generating photochemical reactions capable of causing tissue and vascular destruction, stimulating tissue repair. We report a case with an adverse effect caused by applying PCT, using 2 % 5-aminolevulinic acid (ALA 2 %), and irradiated with amber LED light associated with infrared radiation for the control of rosacea. A patient with subtype II rosacea underwent PCT treatment of 3 sessions at 21-day intervals, being evaluated using photographic images and Wood’s lamp. In the first session of the therapy, an exacerbated inflammatory process was observed. Such an adverse event is estimated to be as a result of the patient using ointment containing corticosteroids for a short period. With the use of medications, it was possible to recover the appearance of the skin thoroughly, and after 21 days, the treatment sessions were performed again. Despite the complication that affected the patient in this study, positive effects were found after the pharmacological therapeutic measures were adopted.
Análise de glicoproteínas de superfície e matriz extracelular em esferoides de células tumorais de mama MCF-7 após terapia fotodinâmica
(2025-02-04) Pacheco-Soares, Cristina; Ferreira-Strixino, Juliana; Junqueira, Juliana Campos; Santos, Mariela Inês Batista dos; São José dos Campos
O câncer de mama é a forma mais comum de câncer entre as mulheres em todo o mundo. Estima-se que haja milhões de casos diagnosticados a cada ano, com um número significativo de mortes relacionadas à doença. No Brasil, o câncer de mama é o segundo mais diagnosticado, ficando atrás apenas do câncer de pele. A incidência é maior em mulheres entre 40 e 60 anos, mas também pode ocorrer em homens, embora em uma proporção muito menor. O diagnóstico precoce é essencial para melhorar as taxas de sobrevivência e oferecer tratamentos menos invasivos. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma abordagem terapêutica promissora no tratamento do câncer de mama, esta técnica se baseia na utilização de uma substância fotossensibilizante e uma fonte de luz que gera espécies reativas de oxigênio causando danos permanentes aos compartimentos celulares. Os objetivos do trabalho se baseiam em analisar os efeitos da terapia fotodinâmica em marcadores de células epiteliais e na fisiologia de esferoides de células tumorais de mama MCF-7 e na linhagem não tumoral MCF-10A, além de estabelecer uma metodologia para o cultivo tridimensional de células. Utilizou-se linhagens celulares de câncer de mama (MCF-7), células de tecido mamário saudável (MCF-10A) e linhagem de macrófagos (RAW-264.7). Para a TFD foi utilizado a Alumínio Ftalocianina Tetrasulfonada (AlPcS4) na concentração de 5 µM. mL-1 , com tempo de incubação de 1 h em estufa ao abrigo da luz, o tempo de irradiação foi de 1 minuto e 45 segundos no comprimento de onda de 660 nm. Para os testes foram feitos ensaios de taxa de atividade metabólica (MTT), ensaios de glicosilação para determinar a presença de glicoproteínas como manosamina, galactosamina e glucosamina, além de glicoproteínas de matriz extracelular como laminina e fibronectina. Testes de interação celular entre células e macrófagos, fotografias por microscópio eletrônico de varredura (MEV) e marcação de atividade nuclear e mitocondrial por microscopia confocal. Os resultados demonstram a efetividade da TFD nas células de câncer de mama, no qual a morte celular foi detectada em todos os testes feitos, os resultados foram obtidos por meios quantitativos pelo MTT e qualitativos pelas fotografias feitas em microscopia de fluorescência, confocal e de varredura. Conclui-se que as análises pós TFD dos marcadores celulares demonstraram a significativa redução da atividade de células de câncer. Sendo assim, a TFD é eficaz para a redução da população celular cancerígena.
Análise de qualidade de medicamentos que contenham paracetamol por meio da espectroscopia no infravermelho (FTIR-UATR) acoplada a análises estatísticas multivariadas
(2024-02-27) Sakane, Kumiko Koibuchi; Ferreira-Strixino, Juliana; Simioni, Andreza Ribeiro; Liu, Andréa Santos; Lyra, Lucas Ferreira; São José dos Campos
O Paracetamol (PCT) é um medicamento anti-inflamatório não esteroide, extensamente utilizado pela população brasileira, em todas as faixas etárias, tendo destaque no tratamento infantil, sendo um fármaco de primeira escolha por possuir, relativamente, poucos efeitos colaterais tóxicos. Em comparação a várias técnicas analíticas utilizadas para a avaliação da autenticidade e da qualidade de preparações farmacêuticas, como as técnicas cromatográficas, as técnicas espectroscópicas destacam-se, por serem relativamente mais seguras, ecológicas e menos custosas, pois não necessitam de solventes para que sejam realizadas. A união de técnicas espectroscópicas a métodos quimiométricos, como por exemplo, as análises estatísticas multivariadas, como a análise por agrupamento hierárquico (HCA) e a análise por componentes principais (PCA), é cada vez mais frequente, pois resulta em uma ferramenta analítica ainda mais poderosa. O presente estudo teve como objetivo demonstrar a capacidade da utilização da espectroscopia vibracional no infravermelho com transformada de Fourier, com tecnologia de refletância total atenuada universal (FTIR-UATR), acoplada às análises multivariadas HCA e PCA, como uma análise de qualidade preliminar rápida e eficiente, que direcione o uso de técnicas demoradas e trabalhosas, complementando o controle de qualidade de medicamentos que contenham PCT. Neste estudo, o uso do FTIR-UATR, não só possibilitou a construção e utilização de curvas padrão, para selecionar a melhor banda analítica dos espectros obtidos do medicamento de referência (MR) e dos medicamentos genéricos (MGs), do PCT, que estão localizadas em 1439 cm-1, mas também permitiu a aquisição das intensidades relativas dessas bandas analíticas, assim como sua comparação, que por sua vez, foi capaz de demonstrar a intercambialidade entre o MR e seus MGs. Juntamente ao uso do FTIR-UATR, a utilização da HCA e da PCA, mostrou-se de extrema importância, pois ao analisar e comparar as regiões de 1700 a 530 cm-1 e de 1470 a 1390 cm-1, que são regiões importantes dos espectros, pois contêm a ³impressão digital´ de cada amostra e a banda analttica do PCT, respectivamente. Pode-se concluir também, que foram os recursos matemáticos e computacionais, da HCA e da PCA, que possibilitaram a diferenciação e a análise dessas regiões, permitindo demonstrar, com mais clareza, a intensidade e as alterações causadas nelas, pelas variações de quantidades e de tipos de excipientes utilizados no MR e em cada um dos MGs analisados, assim como, as variações geradas pelo vencimento do MR, pois em ambos os casos, nenhuma amostra apresentou uma região que fosse semelhante à de uma outra amostra, tanto nas comparações entre o MR e os MGs ou somente entre os MGs, como também, nas comparações entre um MR não vencido e todas as amostras, de MR, vencidas há mais de 1 mês. Por fim, a Metodologia Analítica para o uso do FTIR-UATR, acoplado às análises multivariadas HCA e PCA, desenvolvida neste estudo, apresenta grande utilidade e potencial na complementação do controle de qualidade de medicamentos, pois conseguiu demonstrar a capacidade do FTIR-UATR de detectar possíveis mudanças e degradações, nos excipientes e no princípio ativo, analisando ambos dentro de seus respectivos medicamentos, sem precisar extraí-los.
Antimicrobial Effect of the Amniotic Membrane Isolated and Associated with Photodynamic Therapy
(MDPI) Santos, Amanda Cerquearo Rodrigues dos; Teodoro, Guilherme Rodrigues; Ferreira-Strixino, Juliana; Sant’Anna, Luciana Barros
Microbial control through alternative therapies, such as the amniotic membrane (AM) and antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), has been gaining prominence with the advancement of bacterial resistance to conventional treatments. This study aimed to evaluate the antimicrobial effect of AM isolated and associated with aPDT using the PHTALOX® as a photosensitizer (PS) against Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa biofilms. The groups studied were: C+; L; AM; AM+L; AM+PHTX; and AM+aPDT. The irradiation parameters were 660 nm, 50 J.cm−2, and 30 mW.cm−2. Two independent microbiological experiments were carried out in triplicate, and the results were analyzed by CFU/mL counting and a metabolic activity test, both statistically analyzed (p < 0.05). The integrity of the AM was verified after the treatments by a scanning electron microscope (SEM). The groups AM, AM+PHTX, and, mainly, AM+aPDT showed a statistical difference When compared to C+ regarding the decrease in CFU/mL and metabolic activity. SEM analysis showed significant morphological alterations in the AM+PHTX and AM+aPDT groups. The treatments with AM isolated or associated with PHTALOX® were adequate. The association had potentiated the biofilm effect, and the morphological differences presented by AM after treatment did not hinder its antimicrobial effect, encouraging its use in biofilm formation locals.
Antimicrobial Photodynamic Therapy Mediated by Fotenticine and Methylene Blue on Planktonic Growth, Biofilms, and Burn Infections of Acinetobacter baumannii
(MDPI) Figueiredo-Godoi, Lívia Mara Alves; Garcia, Maíra Terra; Pinto, Juliana Guerra; Ferreira-Strixino, Juliana; Faustino, Eliseu Gabriel; Pedroso, Lara Luise Castro; Junqueira, Juliana Campos
Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) is considered a promising alternative strategy to control Acinetobacter baumannii infections. In this study, we evaluated the action of aPDT mediated by a new photosensitizer derivative from chlorin e-6 (Fotoenticine—FTC) on A. baumannii, comparing its effects with methylene blue (MB). For this, aPDT was applied on A. baumannii in planktonic growth, biofilms, and burn infections in Galleria mellonella. The absorption of FTC and MB by bacterial cells was also evaluated using microscopic and spectrophotometric analysis. The results of planktonic cultures showed that aPDT reduced the number of viable cells compared to the non-treated group for the reference and multidrug-resistant A. baumannii strains. These reductions varied from 1.4 to 2 log10 CFU for FTC and from 2 log10 CFU to total inhibition for MB. In biofilms, aPDT with MB reduced 3.9 log10 CFU of A. baumannii, whereas FTC had no effect on the cell counts. In G. mellonella, only MB-mediated aPDT had antimicrobial activity on burn injuries, increasing the larvae survival by 35%. Both photosensitizers were internalized by bacterial cells, but MB showed a higher absorption compared to FTC. In conclusion, MB had greater efficacy than FTC as a photosensitizer in aPDT against A. baumannii.
Avaliação da ação antimicrobiana da água ativada por plasma sobre membrana amniótica
(2023-03-07) Almeida, Felipe Santos de; Sant'Anna, Luciana Barros; Ferreira-Strixino, Juliana; Doria, Anelise Cristina Osório César; Pessoa, Rodrigo Sávio; São José dos Campos
O potencial de utilização da Membrana Amniótica (MA) em diferentes aplicações tem sido amplamente estudado, e a necessidade de garantir a esterilidade desse material é essencial para o seu uso. Por causa do aumento da resistência bacteriana é importante a pesquisa de novas técnicas de esterilização, sendo o uso de água ativada por plasma (PAW) uma alternativa, que consiste em uma técnica onde se aplica o plasma elétrico na água a fim de funcionalizá-la, eliminando assim os pontos negativos do uso direto do plasma, como a temperatura. O objetivo do trabalho foi analisar a ação antimicrobiana da água de osmose reversa (OR) ativada por plasma, sobre Membrana Amniótica contaminada com cepa padrão ATCC® de Escherichia coli (25922), Klebsiella pneumoniae (13883), e Staphylococcus aureus (6538). A MA foi contaminada por um inóculo a 1x106 UFC/mL em salina, que ficou em contato por 3 min, após esse período a PAW foi colocada em contato com a MA por 90 min. Para a ativação da água foi utilizado o plasma, gliding arc de Argônio e ar comprimido com um tempo de ativação de 30 min, estudando a viabilidade celular após a exposição das amostras da Membrana Amniótica à ação da PAW. Os principais resultados obtidos foi a viabilidade celular de 11% com a PAW refrigerada e 15% com a PAW ambiente para a K. pneumoniae, 9% com a PAW refrigerada e 13% com a PAW ambiente para o S. aureus e 10% com a PAW refrigerada e 14% com a PAW ambiente para a E. coli, observando uma melhor ação antimicrobiana da PAW refrigerada. Foi observado uma maior redução das UFC quando utilizado a PAW refrigerada + MA e uma redução do pH de 7,04 para 3,41 da PAW refrigerada e uma redução de 7,05 para 3,61 com a PAW ambiente. A utilização da MA + PAW apresentou um melhor resultado do que utilizando apenas a PAW e a MA. Assim, conclui-se que as PAWs possuem uma ação antimicrobiana significativa, porém não o suficiente para realizar a esterilização da MA.
Avaliação da Curcumina na terapia fotodinâmica sobre biofilme de Staphylococcus Aureus resistente à Meticilina: estudo in vitro
(2021-10-05) Ferreira-Strixino, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Simioni, Andreza Ribeiro; Junqueira, Juliana Campos; Ribeiro, Isabelle de Paula; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
O aumento do número de bactérias multirresistentes aos antibióticos em ambientes de prestação de serviços à saúde vem se tornando um problema global de saúde pública. Os biofilmes são estruturas que conferem às bactérias uma maior resistência antimicrobiana. Por isso, os estudos com biofilmes bacterianos tornaram-se objeto de extrema relevância, uma vez que essas estruturas reduzem a penetração dos antibióticos, comprometendo a resposta imunológica do hospedeiro. A terapia fotodinâmica (TFD) é um tratamento que que combina a luz, uma substância fotossensível (FS) e o oxigênio molecular, gerando espécies reativas de oxigênio, levando à morte celular, surge como uma alternativa na inativação desses microrganismos. O objetivo deste trabalho foi avaliar, em estudo in vitro, a ação antimicrobiana da TFD, mediada pela curcumina (Curcuma Longa), em biofilme de cepa Staphylococcus aureus, resistentes à Meticilina (MRSA). Os grupos experimentais foram divididos em Controle, Controle Escuro, Fotossensibilizador (FS), Irradiado (claro), TFD. Os grupos FS e TFD foram incubados com curcumina durante 20 minutos. Em seguida, o grupo TFD foi irradiado utilizando dispositivo de LED em 450 nm, com irradiância de 110 mW/cm2 e fluência de 50 J/cm2. Foram avaliadas a internalização do FS por microscopia confocal, as unidades formadoras de colônia (UFC), a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), o metabolismo bacteriano por meio do Resazurin, a estrutura do biofilme por microscopia eletrônica de varredura (MEV), antes e após a PDT. Os resultados demonstraram que a TFD mediada pela curcumina foi capaz de reduzir o crescimento de biofilme de cepa MRSA, alterar a atividade metabólica e aumentar a produção de ERO. Pela microscopia confocal foi observada a presença da curcumina no biofilme e o MEV demonstrou que a estrutura do biofilme foi alterada após TFD. O estudo mostrou que a TFD é capaz de reduzir o crescimento do biofilme de cepa MRSA, evidenciando a eficácia da curcumina como FS a ser utilizado na TFD
Avaliação da eficácia do LED azul na permeação de ingredientes cosméticos na fibra capilar
(2023-04-04) Ferreira-Strixino, Juliana; Canevari, Renata de Azevedo; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Lima, Cibele Rosana de Castro; Fugimoto, Priscila Vareschi Cardoso; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
A luz emissora de diodo (LED) azul apresenta diferentes aplicações clínicas potenciais e tem sido amplamente utilizada com o objetivo de facilitar a permeação de produtos cosméticos na haste capilar com a proposta de intensificar a ação do tratamento cosmético. Entretanto, não foi observado na literatura artigos científicos que avaliem e discutam a interação da irradiação do LED azul e sua influência na permeação de cosméticos no fio de cabelo. A fibra capilar é composta por células mortas e não pode ser renovada biologicamente, a única forma de melhorar as propriedades estruturais da haste capilar é por meio de cosméticos que promovam a manutenção da saúde e beleza dos cabelos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia da irradiação do LED azul na permeação de ingredientes cosméticos em fios de cabelos de diferentes etnias e as alterações das propriedades físico-químicas após tratamento com cosmético e LED azul. Para o estudo foram utilizados cabelos virgens do tipo caucasiano, africano e asiático livres de quaisquer tratamentos químicos. Para as análises foram preparadas 6 mechas de cabelo de cada grupo étnico: 1- ?controle? sem tratamento; 2- tratado com cosmético sem enxágue; 3- tratado com cosmético sem enxágue e irradiado com LED azul no modo varredura; 4- tratado com cosmético sem enxágue e irradiado com LED azul no modo pontual; 5- fibra capilar sem tratamento irradiada com LED azul no modo de varredura; 6- fibra capilar sem tratamento irradiada com LED azul no modo pontual. Notou-se que a interação do LED azul é divergente nas diferentes etnias de cabelo. O grupo de cabelo africano irradiado com LED azul no modo pontual e varredura obteve o menor índice de resistência, menor aumento de diâmetro da fibra capilar e permeação de ingredientes cosméticos quando comparado ao grupo tratado com cosmético. Os grupos caucasiano e asiático irradiados com LED azul pontual apresentaram um elevado índice de aumento na permeação de ingredientes cosméticos no fio de cabelo, melhora da resistência e aumento de diâmetro da fibra capilar quando comparado ao grupo tratado com cosmético. Desta forma podemos concluir que a aplicação do LED azul utilizado em uma dosimetria de 9,6 joules contribui com a permeação de ingredientes cosméticos em cabelos asiáticos e caucasianos.
Avaliação dos efeitos, em fibroblastos, da irradiação com LED em diferentes comprimentos de onda isolados e combinados
(2020-12-10) Ferreira-Strixino, Juliana; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Soares, Cristina Pacheco; Souza, Carla; Barbosa, Lívea Fujita; Ribeiro, Maria Emilia de Oliveira Brenha; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
Diversos trabalhos no campo da fotobiologia têm focado nos efeitos, na pele, da luz visível, compreendida entre 400 –700 nm. Dentre os comprimentos de onda mais estudados, estão o azul (em torno de 455 nm) e vermelho (em torno de 630 nm), para os quais já foram descritos benefícios tanto no tratamento de patologias, como acne, quanto para efeitos anti-envelhecimento, estimulando a expressão de proteínas relacionadas à manutenção da estrutura da pele. O uso combinado dos diferentes comprimentos de onda, no entanto, ainda não foi explorado, apesar de já existirem equipamentos com esta característica em uso tanto por médicos quanto consumidores. O objetivo deste trabalho foi aprofundar o conhecimento na combinação de três diferentes comprimentos de onda: região de 525 nm (luz verde), 630 nm(luz vermelha) e 455 nm (luz azul). A primeira etapa consistiu na idealização, montagem e testagem da operação de um aparato para irradiação, pois não há disponível comercialmente para estudos in vitro. O aparato foi construído e apresentou-se preciso na irradiação dentro dos comprimentos de onda de interesse. Para ele, foi solicitado um Registro de Software, já concedido, e também depositada uma Patente de Invenção. Os efeitos da irradiação foram caracterizados sob três aspectos: 1) citotoxicidade, por meio de ensaios de exclusão por azul de Trypan e micronúcleo; 2) formação de radicais livres, pelo marcador H2DCF-DA e, 3) análise do conteúdo proteico, pelo SDS-PAGE. Três fluências foram testadas: 80 J/cm2, 40 J/cm2e 4 J/cm2. A fluência80 J/cm2apresentou mortalidade celular em torno de 11%e foi excluída. A fluência de 40 J/cm2apresentou resultados similares ao controle negativo nos ensaios de Micronúcleo e Formação de Espécies Reativas de Oxigênio, sendo a escolhida para análise do conteúdo proteico. Neste, foram encontradas bandas referentes à colágeno, laminina e elastina, além de metaloproteinases de matriz e fatores de crescimento de fibroblasto (FGF). O colágeno I foi positivamente regulado pelo LED vermelho, mas negativamente pelo LED verde. Para Laminina, não foram encontradas diferenças qualitativas entre os grupos. Demonstrou-se diminuição de MMP-1 nas condições onde havia incidência de luz vermelha corroborando os achados de literatura, além de diminuição na expressão de MMP-7 e MMP-14, resultados ainda não descritos. Para FGF demonstrou-se, pela primeira vez, possível efeito inibitório do LED verde. Já o LED vermelho, por sua vez, apresentou-se similar ao controle, diferentemente do descrito em literatura, muito provavelmente devido à compensação do efeito dos LEDs verde e azul. Conclui-se que a interação entre os diferentes comprimentos de onda pode levar a interferências nos resultados, como é o caso da expressão de FGF sendo afetada pela irradiação conjunta com outros LEDs. Sugere-se uso de marcadores específicos e técnicas quantitativas para confirmação destes achados.
Comparação de abordagens terapêuticas para gerenciamento de rosácea: estudo clínico
(2023-12-13) Ferreira-Strixino, Juliana; Simioni, Andreza Ribeiro; Canevari, Renata de Azevedo; Nicolau, Renata Amadei; Tada, Dayane Batista; Sebbe-Santos, Priscilla Fróes; Menezes, Priscila Fernanda Campos de; São José dos Campos
A rosácea é uma disfunção estética que apresenta um quadro inflamatório crônico que afeta predominantemente a face. A Terapia Fotodinâmica Tópica (TFD Tópica) combina uma fonte de luz, um fotossensibilizador (FS) e oxigênio molecular presente nos tecidos, gerando uma reação fotoquímica capaz de promover uma destruição tecidual e vascular, levando ao reparo tecidual, estruturando a barreira cutânea comprometida, diminuindo a vascularização excessiva. O procedimento inclui aplicação tópica cosmética de uma substância precursora do FS endógeno, o Ácido-5-aminolevulínico (ALA) e o Metilaminolevulinato (MAL), que são metabolizados no tecido em protoporfirina IX (PpIX). O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da TFD Tópica utilizando-se ALA e MAL a 2% em diferentes grupos associados ao LED âmbar e laser Infravermelho, simultaneamente, para o tratamento de rosácea subtipo I e II. Com aprovação do Parecer Consubstanciado do CEP nº4.539.318, vinte e quatro participantes foram submetidas a três sessões de tratamento, com intervalo de 15 dias entre elas, e avaliação final, 15 dias após a última aplicação. Os parâmetros usados na irradiação, nos grupos TFD Tópica e Fotobiomodulação foram: LED âmbar (590 nm ±10 nm) na fluência de 81 J/cm2 e laser Infravermelho (808 nm ±10 nm) na fluência de 2 J/cm2. No grupo controle foi utilizado cosmético Melan Clean® com aplicações diárias. Foram realizadas análises fotográficas, por fluorescência e termografia. Pode-se inferir que os tratamentos com a aplicação do Melan Clean®, Fotobiomodulação e TFD Tópica, apresentam benefícios no tratamento da rosácea, melhorando o quadro inflamatório e vascular da pele, sendo apresentados pelas análises termográficas e lâmpada de wood. A melhora clínica utilizando TFD Tópica com ALA 2% e MAL 2% associados ao LED âmbar e laser Infravermelho na rosácea é comprovada. Embora a Fotobiomodulação e o Melan Clean®, também tenham apresentado resultados no tratamento da rosácea, a TFD Tópica demonstrou ser uma alternativa melhor para rosácea, uma vez que é capaz de induzir a produção de espécies reativas de oxigênio molecular gerando uma reação fotoquímica que leva a destruição tecidual, favorecendo a melhora da vascularização e gerenciamento da rosácea modulando o processo inflamatório.
Comparação dos efeitos do photodithazine, fotoenticine e protoporfirina IX aplicado à terapia fotodinâmica em gliossarcoma
(2020-03-02) Ferreira-Strixino, Juliana; Nicolau, Renata Amadei; Tada, Dayane Batista; Inada, Natalia Mayumi; Fontana, Letícia Corrêa; Soares, Cristina Pacheco; São José dos Campos
A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma terapia promissora, que emprega um agente fotossensível (FS), luz e oxigênio molecular, produzindo espécies reativas de oxigênio(ERO’s)com o objetivo de induzir a célula cancerígena à morte, sendo um tratamento de interesse à Tumores Cerebrais. O objetivo desse trabalho foi avaliar a ação da TFD em células de gliossarcoma, utilizando como FS as clorinas russa (Photodithazine -PDZ) e espanhola (Fotoenticine -FTC)e o precursor da protoporfirina IX, ácido aminolevulínico (ALA). Foram realizados testes in vitro, a fonte de luz foi um dispositivo LED (Biopdi/Irrad-Led 660) para as clorinas e um dispositivo LED (Biopdi/Irrad-Led 630) para o ALA. Foram realizados testes de viabilidade celular com células 9L (gliossarcoma) e L929 (fibroblastos), e foi demonstrado que o sucesso da terapia é dependente da concentração do FS utilizado. Para o ALA, o período de incubação mínimo para que haja resposta eficaz, foi o período de 4h. Por meio do teste de internalização das clorinas, foi constatado a presença dos FSs no interior das células após 1h de incubação. Ao se observar os tipos de morte celular induzidos pela TFD com os três FSs, foi demonstrada a prevalência de morte celular por necrose ou apoptose tardia, com ausência de apoptose inicial. Por fim, houve um aumento na produção de ERO’s após a TFD para todos os FSs, porém quando visto o ALA, o tempo de incubação é fator chave para a produção dessas espécies. Entre as clorinas, o PDZ apresentou maior rendimento quântico de oxigênio singleto, sendo considerado o melhor fármaco entre os 3 testados. O PDZ foi utilizado para análise in vivo de acúmulo da clorina em tumores xenográficos induzidos em ratos Fischer, com células 9L.Com 1h observou-se acúmulo do FS no tumor, sendo crescente no tempo de 3h. Além disso, se apresentou um fármaco de fácil transporte via sistêmica ou local. Por fim, foi constatado presença do FS na região do crânio, porém novos estudos devem ser realizados para comprovar sua passagem pela barreira hematoencefálica.
Comparison of the Photodynamic Effect of Two Chlorins, Photodithazine and Fotoenticine, in Gliosarcoma Cells
(MDPI) Fontana, Letícia Corrêa; Pinto, Juliana Guerra; Magalhães, Jéssica Aparecida; Tada, Dayane Batista; Almeida, Rainara Moreno Sanches de; Pacheco-Soares, Cristina; Ferreira-Strixino, Juliana
The treatment and prognosis of cancers of the nervous system remain unfavorable to the patient, which makes it necessary to study alternative therapies as primary or adjuvant treatments to existing methods. Photodynamic Therapy (PDT) is a method that consists of combining a photosensitizer (PS), a light source at the appropriate wavelength, and molecular oxygen, forming reactive oxygen species (ROS), leading to death in the target cell. The objective of this work was to compare the effects of PDT with two chlorins, Photodithazine (PDZ) and Fotoenticine (FTC), in 9L/lacZ gliosarcoma cell lines. Both chlorins, together with an LED device at 660 nm with a fluence of 10 J/cm2 , were included in the study. It was observed that the response to therapy depends on the concentration and type of PS used. In addition, PDZ showed a higher quantum yield of singlet oxygen generation than FTC.
Desenvolvimento de método de detecção múltipla e simultânea de anticorpos da classe IGM contra Toxoplasma Gondii, rubéola e citomegalovírus
(2022-12-14) Soares, Cristina Pacheco; Ferreira-Strixino, Juliana; Raniero, Leandro José; Ogawa, Guilherme Maerschner; Almeida, Rainara Moreno Sanches de; Silva, Newton Soares da; São José dos Campos
O diagnóstico sorológico durante a triagem pré e neonatal é de extrema importância na prevenção de doenças. Dentre as doenças infecciosas, as mais comuns são a toxoplasmose, rubéola e citomegalovírus. Os métodos tradicionais de diagnóstico utilizados na triagem neonatal detectam por ensaio um único agente infeccioso. A utilização de métodos de detecção múltipla e simultânea aumenta a produtividade e diminui a quantidade de material utilizado, resultando em um ensaio mais eficiente do ponto de vista técnico, ambiental e econômico. O objetivo do nosso estudo é desenvolver um método de detecção simultânea de anticorpos da classe IgM contra Toxoplasma gondii, rubéola e citomegalovírus. Para isso foram realizados acoplamentos de diferentes antígenos em microesferas magnéticas, seguido de ensaios de desempenho para identificar os melhores parâmetros a serem utilizados, como melhor concentração e tampão. Após definido os acoplamentos, foram realizados ensaios para obtenção dos valores de corte, sensibilidade e especificidade de cada antígeno acoplado. Em seguida, foram realizados ensaios de desempenho para validação analítica dos produtos diagnósticos seguindo as normas na Agência Nacional de Vigilancia sanitaria (ANVISA). Os parâmetros avaliados foram repetibilidade, reprodutibilidade, linearidade, robustez, alta dose, limite mínimo de detecção, especificidade analítica e estabilidade acelerada. Todos os dados obtidos atenderam aos critérios de aceitação da RDC 166/17 para utilização do produto diagnóstico em território nacional. Os ensaios de repetibilidade e reprodutibilidade apresentaram Constante de Variação (CV) menor que 15% entre as replicatas do mesmo operador e operadores distintos. O kit apresentou linearidade em toda a faixa de trabalho com R2 acima de 0.990 e não foi observado efeito de alta dose de anticorpos na diluição de trabalho escolhida. Além disso, o kit não apresentou interferência da matriz com os resultados e foi observado que pequenas e deliberadas alterações no tempo de incubação de cada reagente não afetam de forma significativa nos dados obtidos.
Desenvolvimento de pirulito com fotossensibilizador para aplicação oral da terapia fotodinâmica
(2024-05-03) Ferreira-Strixino, Juliana; Canevari, Renata de Azevedo; Soares, Cristina Pacheco; Carvalho, Danielle Lima Corrêa de; Saud, Larissa Fogaça; São José dos Campos
A saliva desempenha funções cruciais na cavidade bucal, como a formação do bolo alimentar, lubrificação da região de faringe/laringe e prevenção de cáries e doenças oportunistas. A hipossalivação, redução na produção salivar, é um efeito colateral frequente em pacientes submetidos a quimioterapia (QT) e radioterapia (RT), especialmente quando afeta a região de cabeça e pescoço. Esse quadro resulta em toxicidade, interações medicamentosas e dificuldades no manejo dos sintomas, impactando negativamente a qualidade de vida dos pacientes. As alternativas terapêuticas, como a saliva artificial, têm mostrado limitações, como a piora de náuseas e o "gosto metálico" persistente após a QT, dificultando a adesão ao tratamento. Este estudo teve como objetivo o desenvolvimento de um pirulito contendo azul de metileno (AM) para tratar infecções oportunistas e melhorar a xerostomia, com maior adesão, praticidade e melhoria na qualidade de vida do paciente. O AM atua como fotossensibilizador na terapia fotodinâmica, proporcionando uma solução prática e eficaz. Lollipops compostos por corantes, como o AM, tornam a forma de apresentação do produto mais atraente, atendendo de maneira lúdica e eficaz a demanda de pacientes pediátricos, acamados ou em regime homecare. Foram produzidos 67 pirulitos, nos quais foram realizados testes para avaliar sua qualidade. A espectrofotometria foi utilizada para analisar as diferentes concentrações de AM, obtendo-se a curva de calibração necessária. A análise de pH foi realizada com um potenciômetro digital, e os resultados das amostras variaram entre 4,7 e 4,8, indicando consistência na quantidade de ácido cítrico. Para avaliar a umidade residual, que é essencial para a estabilidade do produto, utilizou-se estufa a vácuo. Os valores de umidade residual obtidos foram de 1,1% para a amostra 1, 1,5% para a amostra 2 e 1,2% para a amostra 3, o que é considerado adequado para garantir a durabilidade do pirulito. Além disso, o estudo de estabilidade foi realizado em três temperaturas diferentes (5°C, 30°C e 40°C) ao longo de 12 semanas. Os pirulitos mantiveram-se estáveis a 25°C por até 90 dias. No entanto, quando armazenados a 30°C e 40°C, o produto sofreu deformações nas semanas seguintes, indicando que a temperatura ideal de armazenamento é 25°C. Esses resultados demonstram que o produto desenvolvido é eficiente, com boa estabilidade e praticidade, tornando-se uma solução inovadora para melhorar a adesão ao tratamento de xerostomia e infecções oportunistas em pacientes oncológicos.
Desenvolvimento e avaliação de uma estufa microbiológica para geração de conjuntos de dados utilizados em aprendizado de máquina
(2024-03-08) Ferreira-Strixino, Juliana; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Raniero, Leandro José; Miñán, Alejandro Guillermo; Mendes, Alessandro Corrêa; Godoi, Bruno Henrique; Soares, Cristina Pacheco; São José dos Campos
A identificação microbiológica desempenha um papel fundamental em diversas áreas, desde a segurança alimentar até a pesquisa médica, entendendo a sua importância este estudo visa otimizar a identificação microbiológica, superando limitações dos métodos tradicionais que apresentam demoras e custos operacionais elevados. O trabalho propõe o desenvolvimento e avaliação de uma estufa microbiológica inteligente voltada para a geração de conjuntos de dados utilizados em aprendizado de máquina. A inovação central do projeto reside na integração de um sistema de câmeras avançadas dentro da estufa, capaz de capturar imagens de culturas microbiológicas. Estas imagens são processadas e analisadas por um modelo de Rede Neural Convolucional (CNN), projetado para classificar as imagens com precisão em diferentes intervalos de tempo. O objetivo principal é fornecer um dispositivo avançado, porém acessível, que facilite e aprimore os processos de identificação microbiológica. Resultados experimentais indicam precisão do modelo CNN na classificação de imagens de Staphylococcus aureus com até 80% de acerto no processo no período de 24 horas de cultivo, porém com menor eficácia para Escherichia coli, sugerindo a necessidade de aprimoramento contínuo do modelo. Este trabalho apresenta um método viável e pronto para ser utilizado para criação de bancos de dados aplicados a microbiologia, mesmo com as limitações apresentadas no trabalho, o equipamento foi validado e encontra-se operacional. A tecnologia desenvolvida possui margem para ajustes no modelo de aprendizado de máquina, contudo espera-se que o sistema proposto ofereça uma ferramenta para a identificação rápida e precisa de uma ampla gama de microrganismos, potencializando seu uso em diversas aplicações científicas e industriais.
Desenvolvimento e validação de dispositivo de fotobiomodulação com leds em manta, através de seu efeito agudo sobre músculos do quadril em bailarinas clássicas
(2022-03-31) Duque, Mariana Aparecida do Nascimento; Ferreira-Strixino, Juliana; Lima, Fernanda Pupio Silva; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Soares, Picon, Andreja Paley; São José dos Campos
As atividades inerentes ao Ballet Clássico geram estresse mecânico em toda estrutura musculoesquelética, sendo tornozelo, joelho e o quadril as mais solicitadas. Toda essa exigência e uso excessivo tornam essas articulações propensas a lesões, que regularmente são tratadas preventivamente com o fortalecimento de abdutores do quadril. Essa pesquisa teve como objetivo o desenvolvimento de uma manta a base de Diodos Emissores de Luz (LED) de 660 nm e 850 nm, com irradiações independentes e combinadas, e avaliando seu efeito agudo sobre os músculos abdutores do quadril em bailarinas clássicas, com o auxílio do dinamômetro como instrumento de avaliação. A intervenção com fotobiomodulação tem efeitos positivos de potencializar a função muscular e pode auxiliar na recuperação muscular e na prevenção de lesões. Foram avaliadas 60 bailarinas clássicas com idade entre 18 e 30 anos, alocadas em 3 grupos conforme a intervenção do LED, sendo Grupo Vermelho (660 nm) Grupo Infravermelho (850 nm) e Grupo Infravermelho e Vermelho. Todas as bailarinas fizeram parte do Grupo Controle, ao qual não foi aplicada a fotobiomodulação. As participantes realizaram aquecimento específico para os músculos abdutores do quadril com auxílio do miniband, em seguida realizaram a avaliação dos músculos abdutores com o Dinamômetro Isocinético, executando uma série de movimentos de abdução do quadril a 45º, grau permitido anatomicamente, e com velocidade angular de 120 °/s. Uma segunda coleta foi realizada após uma semana, repetindo o procedimento, sendo que metade de cada grupo recebeu a intervenção com LED na primeira coleta, e outra metade na segunda, a fim de verificar a adaptação ao equipamento e/ou efeito placebo. Após o tratamento de dados, utilizando o software Matlab, verificou-se que a utilização da Manta de LEDs permitiu o aumento da potência nos músculos abdutores direito e esquerdo com intervenção do LED Infravermelho, e aumento da potência nos músculos abdutores do lado esquerdo com LED Vermelho; mesmo a Manta não recobrindo todos os músculos responsáveis pelo movimento de abdução do quadril e, após recálculo dos parâmetros de irradiação, observou-se que a densidade de energia entregue não era a recomendada pelos achados literários. Concluiu-se que não houve adaptação das bailarinas ao equipamento, nem efeito placebo; houve resultado significativo com o aumento da potência após a intervenção; mas é importante dar continuidade ao trabalho alterando os parâmetros de irradiação a área de cobertura da manta de LEDs, e até mesmo o número de sessões

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