Navegando por Assunto "Doença de Alzheimer"

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    Analysis of the Sars-cov-2 virus spike protein in 2D and 3D neuronal models of Alzheimer's disease associated with photobiomodulation treatment
    (2026-04-17) Soares, Cristina Pacheco; Sant'Anna, Luciana Barros; Ito, Cristiane Yumi Koga; Andrade, Erick José Nogueira de; São José dos Campos
    Alzheimer's disease (AD) is the leading cause of dementia worldwide, characterized by a complex pathophysiological scenario involving neuroinflammation and intense oxidative stress. At the same time, the COVID-19 pandemic has raised concerns about the neurodegenerative effects of the SARS-CoV-2 spike protein. Considering that oxidative stress is a central mechanism shared by both AD and the sequelae of COVID-19, this work used hydrogen peroxide (H2O2) as an experimental model of oxidative insult. The objective was to investigate how the spike protein enhances cellular damage and to evaluate the neuroprotective potential of photobiomodulation (PBM) with red LED (660 nm) in these contexts. For this, SHSY5Y cells differentiated into two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) neuronal models were used. The cells were exposed to recombinant spike protein (0.5 µg/mL) and H2O2 (200 µM), either individually or in combination, to simulate an aggravated toxicity environment. Cell viability and metabolism were monitored using the Alamar Blue assay and flow cytometry (Live/Dead). Confocal microscopy analyses allowed for the evaluation of nuclear (Hoechst), mitochondrial (MitoTracker), cytoskeletal (rhodamine-phalloidin), and focal adhesion (FAK) integrity. Additionally, a model of neuronal spheroids (3D) was standardized to mimic a more physiologically relevant microenvironment. The results in the 2D model indicated that the spike protein and H2O2 significantly reduced cell viability, with intensified cytotoxic effects upon co-exposure. In contrast, the 3D model exhibited an adaptive response, maintaining viability and increasing metabolic activity, suggesting that tissue architecture modulates neuronal resilience. PBM (3 J/cm²) proved effective in preserving mitochondrial and structural morphology, reducing apoptosis both under basal conditions and oxidative stress, especially in the 3D model. Together, the data reinforce that the Spike protein exerts distinct effects depending on the cellular model and highlight PBM as a promising therapeutic strategy to mitigate oxidative stress and preserve neuronal function in neurodegenerative pathologies and viral sequelae.
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    Fotobiomodulação e taurina em neuroblastoma humano: estudo in vitro da doença de Alzheimer
    (2022-03-04) Soares, Cristina Pacheco; Ferreira-Strixino, Juliana; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Salles, Geisa Nogueira; Rossato, Rafaella Carvalho; São José dos Campos
    A capacidade de reparo limitada do sistema nervoso central (SNC) é um desafio considerável. A Doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurodegenerativa progressiva e altamente prevalente que afeta milhões de pessoas em todo o mundo. A regeneração completa do SNC ainda não é possível e é procurada por diferentes meios, incluindo terapias medicamentosas e irradiações com LED (light emission diode), que são algumas alternativas promissoras para a prevenção, contenção do avanço acelerado das doenças neurodegenerativas e uma possível reconstrução das estruturas do tecido neural. Neste trabalho, propusemos estabelecer e padronizar um modelo in vitro da DA utilizando o peróxido de hidrogênio (H2O2) para simular o estresse oxidativo característico da DA, realizado em linhagem celular de neuroblastoma humano (SH-SY5Y). Deste modo, o estudo explora os efeitos da taurina em conjunto com LED sob estresse oxidativo, com objetivo de avaliar o efeito neuroprotetor e também a capacidade de restauração celular posterior ao estresse oxidativo. Pesquisas recentes apontam que o LED tem grande potencial para ser incluído como parte do tratamento da DA, entretanto, tendo a combinação de duas terapias (LED e suplementação com taurina) o resultado poderá ser promissor. Neste trabalho, foi realizada a avaliação do LED no comprimento de onda em 660 nm e taurina como modelo de pré-tratamento e tratamento em células estressadas oxidativamente, avaliando a atividade mitocondrial pelo teste colorimétrico de MTT (quantitativo) e marcação das mitocôndrias de células vivas por fluorescência utilizando MitoTracker Orange (qualitativo). Foi avaliada também a viabilidade celular pelo teste de azul de Tripan (quantitativo e qualitativo) e a verificação das estruturas celulares por meio do microscópio eletrônico de varredura (MEV) (qualitativo). Ao realizar as análises estatísticas e analisar as imagens, o LED em conjunto com a taurina apresentaram efeitos neuroprotetores somente no pré-tratamento, ou seja, quando a célula é exposta ao LED e taurina e posteriormente estressada com H2O2. Comparando a ação dos dois pré-tratamentos em contato com a célula e também quando são expostos ao H2O2, pode-se observar que o LED tem maior efeito proliferativo celular em comparação com a taurina.