Navegando por Assunto "Estresse oxidativo"

Agora exibindo 1 - 3 de 3
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Analysis of the Sars-cov-2 virus spike protein in 2D and 3D neuronal models of Alzheimer's disease associated with photobiomodulation treatment
    (2026-04-17) Soares, Cristina Pacheco; Sant'Anna, Luciana Barros; Ito, Cristiane Yumi Koga; Andrade, Erick José Nogueira de; São José dos Campos
    Alzheimer's disease (AD) is the leading cause of dementia worldwide, characterized by a complex pathophysiological scenario involving neuroinflammation and intense oxidative stress. At the same time, the COVID-19 pandemic has raised concerns about the neurodegenerative effects of the SARS-CoV-2 spike protein. Considering that oxidative stress is a central mechanism shared by both AD and the sequelae of COVID-19, this work used hydrogen peroxide (H2O2) as an experimental model of oxidative insult. The objective was to investigate how the spike protein enhances cellular damage and to evaluate the neuroprotective potential of photobiomodulation (PBM) with red LED (660 nm) in these contexts. For this, SHSY5Y cells differentiated into two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) neuronal models were used. The cells were exposed to recombinant spike protein (0.5 µg/mL) and H2O2 (200 µM), either individually or in combination, to simulate an aggravated toxicity environment. Cell viability and metabolism were monitored using the Alamar Blue assay and flow cytometry (Live/Dead). Confocal microscopy analyses allowed for the evaluation of nuclear (Hoechst), mitochondrial (MitoTracker), cytoskeletal (rhodamine-phalloidin), and focal adhesion (FAK) integrity. Additionally, a model of neuronal spheroids (3D) was standardized to mimic a more physiologically relevant microenvironment. The results in the 2D model indicated that the spike protein and H2O2 significantly reduced cell viability, with intensified cytotoxic effects upon co-exposure. In contrast, the 3D model exhibited an adaptive response, maintaining viability and increasing metabolic activity, suggesting that tissue architecture modulates neuronal resilience. PBM (3 J/cm²) proved effective in preserving mitochondrial and structural morphology, reducing apoptosis both under basal conditions and oxidative stress, especially in the 3D model. Together, the data reinforce that the Spike protein exerts distinct effects depending on the cellular model and highlight PBM as a promising therapeutic strategy to mitigate oxidative stress and preserve neuronal function in neurodegenerative pathologies and viral sequelae.
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Efeito sinérgico da fotobiomodulação com LED 660 E 850 nm em células L929 induzidas ao estresse oxidativo com peróxido de hidrogênio
    (2025-09-09) Soares, Luís Eduardo Silva; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Oliveira, Luciane Dias de; Segismondi, Larissa Cavallieri; Soares, Cristina Pacheco; São José dos Campos
    A pele está constantemente exposta a agressões externas, tornando-se um alvo para a geração excessiva de espécies reativas de oxigênio (ROS), que induzem danos oxidativos principalmente na região dérmica. A fotobiomodulação (FBM) mostra-se uma terapia eficiente para biomodulação de sistemas biológicos, capaz de modular processos oxidativos e inflamatórios. No presente estudo, buscou-se elucidar o possível efeito fotoprotetor in vitro da aplicação simultânea da FBM com LED 660 e 850 nm em células fibroblásticas L929 diante do tratamento com peróxido de hidrogênio como modelo de estresse oxidativo. Os fibroblastos foram pré-irradiados com LED e em seguida incubados com 200 µM de H2O2 diluído em meio de cultura pelo período de 3 horas. Após 24 horas dos tratamentos, foram observadas alterações quanto à atividade mitocondrial pelo ensaio colorimétrico Alamar Blue e quanto à morfologia celular por microscopia invertida. Também foi realizada a marcação de mitocôndrias e núcleos em células vivas por fluorescência utilizando Tetrametilrodamina (TMRM) e Tricloridrato de bisbenzimida (HOESCHT), além da detecção de ROS por fluorescência utilizando CellRox Orange. Os resultados obtidos indicam que o pré-tratamento com LED promove aumento da atividade mitocondrial, do potencial da membrana mitocondrial, redução da geração de ROS intracelular e induz alterações morfológicas nas células. Dessa maneira, conclui-se que o sinergismo entre os LEDs 660 e 850 nm exerce efeito protetor contra a ação do H2O2 em células fibroblásticas L929, demonstrando que a FBM pode ser utilizada para auxiliar a prevenir e mitigar danos oxidativos.
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Estresse oxidativo em células SH-SY5Y diante da exposição ao peróxido de hidrogênio
    (CDRR Editors) Zabeu, Antonieta Marques Caldeira; Rossato, Rafaella Carvalho; Pacheco-Soares, Cristina; Silva, Newton Soares da
    O estresse oxidativo é consequência da formação excessiva de espécies reativas de oxigênio geradas normalmente pelo metabolismo celular. Essa produção excessiva ocasiona a perda de capacidade de defesa e de reparo, levando a danos nas biomoléculas (DNA, lipídios, proteínas) celulares. Quando estes danos não são reparados, acabam comprometendo o funcionamento da célula, levando-a a morte por apoptose ou necrose. O estresse oxidativo está associado à morte de células neurais como sendo uma das principais causas de doenças neurodegenerativas, incluindo doença de Alzheimer e doença de Parkinson. O objetivo deste estudo é verificar a ação do peróxido de hidrogênio sendo um modelo de estresse oxidativo em células de neuroblastoma humano. Busca-se analisar a partir de qual concentração ocorre um estresse significante nas células e, em conjunto, verificar esse limiar de concentração em diferentes tempos de ação nas células. Os experimentos realizados compreenderam as análises de atividade mitocondrial obtido por meio do teste de corante tetrazólio (MTT), teste de viabilidade celular utilizando o ensaio de azul de tripano, obtendo-se assim dados quantitativos e qualitativos. Foi possível observar que, a partir da concentração de 0,2 mM durante um intervalo de tempo de 2 horas houve uma diminuição significativa no número de células viáveis em relação ao grupo controle. E, acima dessa concentração, em relação ao tempo, ocorreram mais danos celulares.