Navegando por Assunto "Nanopartículas"
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Item Desenvolvimento e caracterização de nanopartículas de poli-ԑ-caprolactona contendo cloro-alumínio-ftalocianina para potencial uso na terapia fotodinâmica em células(2022-03-08) Pinto, Bruna Cristina dos Santos; Beltrame Junior, Milton; Gonçalves, Érika Peterson; Liu, Yao Cho; Naal, Rose Mary Zumstein Georgetto; Rosseti, Isabela Bueno; Simioni, Andreza Ribeiro; São José dos CamposNeste trabalho, nanopartículas do polímero poli-ԑ-caprolactona (PCL) foram desenvolvidas para encapsular a cloro-alumínio ftalocianina (ClAlPc), como modelo fotossensibilizador para aplicação em terapia fotodinâmica (TFD). O método de nanoprecipitação foi aplicado para produzir nanopartículas de PCL-ClAlPc que foram caracterizadas por medidas no estado estacionário, tamanho de partícula, potencial zeta, espalhamento dinâmico de luz, morfologia e eficiência de carregamento. A análise da microscopia eletrônica de varredura (MEV) mostra claramente a formação de nanopartículas uniformes, de formato esférico, com superfície regular e lisa. O tamanho médio das nanopartículas apresentadas foi de 266,7 ± 83,1 nm com índice de polidispersidade (PDI) de 0,105 nm e com a eficiência de encapsulamento de 81,8%. As formulações de nanopartículas apresentaram valores de potencial zeta negativos (-28,31 ± 1,25 mV), explicando sua estabilidade coloidal. O perfil espectral de absorção mostrou que o fotossensibilizador carregado nas nanopartículas não sofre alteração em suas propriedades fotofísicas após o processo de encapsulamento. A ClAlPc encapsulada nas nanopartículas poliméricas apresentou estabilidade física adequada, boas propriedades fotofísicas e fotoquímicas demonstrando a eficiência do carregamento do fármaco. O estudo de liberação de drogas in vitro constatou uma taxa de liberação inicial de forma sustentada e eficiente, típica para os medicamentos carregados nas nanopartículas de PCL. A biocompatibilidade e o efeito fotodinâmico das nanopartículas de PCL-ClAlPc foram avaliados por experimentos in vitro utilizando a linhagem celular HeLa CCL-2, adenorcarcinoma, como modelo biológico. Os estudos mostraram que o sistema não é citotóxico no escuro, mas possuem uma fototoxicidade significativa a 3 μmol.L-1 de concentração de fotossensibilizador encapsulado e 10J.cm-2 de luz, mostrando, nestas condições, diminuição de sobrevida maior que 95%. A localização intracelular demonstrou que as nanopartículas encapsuladas com a cloro- alumínio ftalocianina podem ser internalizadas nas células de adenocarcinoma de maneira efetiva. Com isso, os resultados permitem reforçar a proposta de que as nanopartículas de PCL encapsuladas com ClAlPc é um sistema promissor para o uso em protocolos de aplicação em TFD.Item Efeito da terapia fotodinâmica com curcumina em promastigotas e curcumina nanoencapsulada em amastigotas de Leishmania braziliensis e Leishmania major(2021-09-24) Ferreira-Strixino, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Sant'Anna, Luciana Barros; Ribeiro, Martha Simões; Tada, Dayane Batista; Marcolino, Luciana Maria Cortez; São José dos CamposA leishmaniose tegumentar é uma doença zoonótica, transmitida por fêmeas de flebotomíneos e causada por protozoários do gênero Leishmania. É considerada pela OMS um problema de saúde pública que nos últimos anos apresentou aumento significativo, tanto no número de casos quanto na distribuição geográfica. O tratamento convencional é tóxico e contraindicado para pacientes que apresentam algumas comorbidades e pode causar diversos efeitos colaterais graves. Tendo em vista uma alternativa de tratamento não agressivo vem se estudando a Terapia Fotodinâmica, que consiste em um tratamento não invasivo, não apresenta efeitos colaterais, de fácil acesso que utiliza substâncias de baixo custo, como a curcumina. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da curcumina livre em promastigotas e curcumina nanoencapsuladas em amastigotas de espécies de Leishmanias. Para isso os promastigotas foram incubados com curcumina livre divididos em grupo escuro e irradiado, além do grupo controle escuro e apenas irradiado. A viabilidade celular foi avaliada pelo teste de exclusão com azul de tripan, a atividade mitocondrial por MTT, as alterações morfológicas por MEV. Para analisar o tipo de morte celular utulizou-se os marcadores Anexina V e iodeto de propídio e para avaliar o potencial de membrana mitocondrial o JC-1, para isso foram obtidas as imagens por microscopia confocal e a fluorescência emitida pelos marcadores foram quantificadas utilizando o software ImageJ. Para analisar a produção de espécies reativas de oxigênio utilizou-se o reagente H2DCF-DA e a fragmentação de DNA foi verificada pelo teste do cometa. Verificou-se a diminuição da viabilidade dos parasitas bem como alterações na atividade mitocondrial. A TFD provocou alterações no potencial de membrana mitocondrial das duas espécies, independentemente do tempo de análise (imediatamente ou 18 horas após tratamento). A produção de ERO foi concentraçãodependente e foi observada apenas nos grupos submetidos à TFD e a espécie L. braziliensis apresentou maior produção de ERO que L. major, no entanto L. braziliensis foi mais resistente que L. major quando analisada a viabilidade após TFD. Os danos no DNA também foram observados nas duas espécies, é sugestivo que a apoptose prevaleceu na espécie L. braziliensis. A morfologia das células foi afetada, principalmente na concentração mais elevada de curcumina, deixando as células arredondadas e flagelo encurtado. Os resultados apoiam o uso da curcumina como fotossensibilizador na TFD contra células de Leishmania. Foram testadas também nanopartículas de BSA associada a curcumina em amastigotas de L. braziliensis e L. major. Para isso macrófagos e macrófagos infectados com Leishmanias foram incubados com a curcumina encapsulada em BSA catiônica e aniônica. Foram realizados testes de viabilidade pelo método de exclusão com azul de tripan, onde foi verificado que apenas a concentração 0,7 µmol. L1 da BSA-Cur catiônica demonstrou redução na viabilidade das células e as concentrações de 0,1 e 0,08 µmol. L-1 da BSA-Cur aniônica reduziu a viabilidade das células, já a concentração de 0,7 µmol. L-1 foi citotóxica. A análise através da microscopia confocal foi realizada para verificar se as nanopartículas eram internalizadas pelos macrófagos e pode-se verificar que as nanopartículas catiônicas e aniônicas se encontravam dentro dos macrófagos e protozoários. Por fim foi realizado teste de viabilidade com os fibroblastos e verificou-se que as nanopartículas não afetaram a viabilidade dessa linhagem celular, no entanto a curcumina livre promoveu diminuição da viabilidade dos fibroblastos após tratamento. Os resultados obtidos foram satisfatórios, demonstrando a capacidade das nanopartículas reduzirem a viabilidade das células em menores concentrações do que a curcumina livre.Item Estudo da Atividade Antioxidante de Hibiscus Sabdariffa e sua Possível Aplicação na Conservação dos Alimentos(2023) Carvalho, Janicy Arantes; Abreu, Alexandro da Silva; Beltrame Junior, Milton; Simioni, Andreza RibeiroItem Estudo da Atividade Antioxidante de Hibiscus Sabdariffa e sua Possível Aplicação na Conservação dos Alimentos(2023-05-12) Carvalho, Janicy Arantes; Abreu, Alexandro da Silva; Beltrame Junior, Milton; Simioni, Andreza RibeiroItem Fabricação, Caracterização Fotofísica e Fotoquímica de Nanopartículas de Gelatina Carregadas com Azul de Toluidina para Material Nanoestruturado Promissor para Sistema de Liberação de Fármacos(2023) Ambrósio, Jéssica Aparecida Ribeiro; Carvalho, Janicy Arantes; Beltrame Junior, Milton; Simioni, Andreza RibeiroItem Fabricação, caracterização fotofísica e fotoquímica de nanopartículas de gelatina carregadas com azul de toluidina para material nanoestruturado promissor para sistema de liberação de fármacos(2023-12-05) Ambrósio, Jéssica Aparecida Ribeiro; Carvalho, Janicy Arantes; Beltrame Junior, Milton; Simioni, Andreza RibeiroItem Iron oxide nanoparticles synthesis optimized by design of experiments and magnetic particle imaging performance of magnetoliposomes(2021-08-25) Raniero, Leandro José; Ramirez Ramos, Marco Antonio; Dors Junior, Oli Luiz; Espírito Santo, Ana Maria do; Rost, Nathanne Cristina Vilela; Rinaldi-Ramos, Carlos M.; São José dos CamposIron oxide nanoparticles are clinically approved by Food and Drug Administration (FDA) in the United States of America, where are already used in cases of iron deficiency and as contrast agents for magnetic resonance imaging, highlighting the relevance of such nanomaterials in society. Liposomes are also accepted by FDA and the entrapment of iron oxide nanoparticles originates magnetoliposomes that represents one of the ways for combining magnetic nanoparticles and hydrophilic or hydrophobic molecules. Such combination can be useful for applications in combinatorial therapies, for instance, magnetic hyperthermia and Magnetic Particle Imaging (MPI), a new imaging modality. In this work, magnetic nanoparticles were synthesized by chemical coprecipitation, evaluating the effects of reactional parameters over the hydrodynamic diameter and composition of the samples by using Plackett-Burman experimental design. The results allowed a more reliable protocol, considering the experimental combinations that lead to smaller particles composed mostly of magnetite. Next, magnetoliposomes were prepared from magnetic nanoparticles stabilized by peptization. Characterization techniques were widely used and physical models were applied to data processing of magnetometry, magnetic susceptibility, and transmission electron microscopy. The magnetoliposomes performance as MPI tracers were compared to the nanoparticles (as-synthesized) and Ferucarbotran, the benchmark formulation. The results of this second stage of the work indicated improvement in the MPI physical signal per iron mass after the encapsulation, even though the most representative fraction of particles was governed by the Brownian relaxation mechanism. The magnetoliposomes had shown a signal more intense than Ferucarbotran, even with poorer resolution. This study can be useful for future works because one of the challenges in MPI researches is the production of tracers with performance equivalent to Ferucarbotran.Item Nanopartículas polieletrolíticas de poli(ácido lático-co-ácido glicólico) contendo um derivado de ftalocianina para aplicação em terapia fotodinâmica(2020-07-08) Toledo, Maria Cristina Modesto Clementino de; Simioni, Andreza Ribeiro; Gonçalves, Érika Peterson; Sakane, Kumiko Koibuchi; Liu, Andréa Santos; São José dos CamposA Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma modalidade alternativa para tratamento de tecidos neoplásicos, que se baseia na administração de um fármaco fotossensível e irradiação de luz em um comprimento de onda adequado, visando localizar e destruir a célula alvo do tratamento, a partir da formação de espécies reativas de oxigênio. A tecnologia de nanoencapsulação se apresenta como uma ferramenta para incorporação de substâncias bioativas,visando melhorar a sua solubilidade em ambiente fisiológico, obter um maior tempo de circulação no organismo, administração de menores dosagens e a minimização de efeitos colaterais. O presente trabalho visou o desenvolvimento de nanopartículas depoli(ácido lático-co-ácido glicólico) (PLGA)revestidas com camadas de filmes de polieletrólitos para o encapsulamento da zinco ftalocianina tetrassulfonada (ZnPcSO4), como modelo de substância bioativa. As nanopartículas de PLGA foram produzidas pela técnica de dupla emulsão/evaporação do solvente e o recobrimento polieletrolítico foi realizado utilizando o hidrocloreto de poli-alilamina(PAH)como um policátion fraco e o poli-(4-estireno sulfonato de sódio)(PSS)como um poliânion forte pela técnica de automontagem camada por camada (conhecida como layer-by-layer-LbL)As nanopartículas de PLGA revestidas por polieletrólitos apresentaram diâmetro médio de 384,7 ± 138,6 nm, tamanho de distribuição restrito com um índice de polidispersidade de 0,180. A mudança óbvia do potencial zeta indica alternância bem-sucedida na deposição do policátion (PAH) e do poliânion (PSS) diretamente nas nanopartículas de PLGA.A análise por microscopia eletrônica de varredura (MEV) mostrou que o sistema formado apresenta morfologia esférica, típica destes sistemas de liberação. A eficiência de carregamento foi de 82,1% ± 1,2%. As nanopartículas polieletrolíticas carregadas com a ftalocianina mantiveram seu comportamento fotofísico após o encapsulamento. A viabilidade celular foi determinada, obtendo-se 90% de morte celular. Todas as caracterizaçõesfísico-químicas, fotofísicas e fotobiológicas indicaram que as nanopartículas polieletrolíticas carregadas com a ftalocianina são um sistema promissor de administração de medicamentos para terapia fotodinâmica e fotoprocessos .Item Síntese de nanopartícula de ácido poliláctico (PLA) por dupla emulsificação para aplicação em fotoprocessos(2021-04-05) Simioni, Andreza Ribeiro; Costa, Maricília Silva; Vieira, Lúcia; Liu, Andréa Santos; Oliveira Junior, Benedito Marcio de; Ferreira-Strixino, Juliana; São José dos CamposA Terapia Fotodinâmica (TFD) é proposta como um procedimento terapêutico promissor minimamente invasivo que emprega três elementos essenciais para induzir a morte celular: um fotossensibilizador, luz de um comprimento de onda específico e oxigênio molecular. Os fotossensibilizadores clássicos usados no protocolo de TFD apresentam algumas desvantagens que limitam sua aplicação clínica, como a baixa solubilidade em meio aquoso. O uso da nanotecnologia tem sido considerado, uma vez que fornece muitas ferramentas que podem ser aplicadas à TFD para contornar essas limitações e trazer novas perspectivas para a aplicação desta terapia para diferentes tipos de doenças. Neste trabalho, nanopartículas de poli (ácido lático) (PLA) foram desenvolvidas para encapsular a zinco ftalocianina (ZnPc), um fotossensibilizador hidrofóbico, utilizado em TFD. O método de emulsificação dupla foi aplicado para produzir nanopartículas de NPLA-ZnPc que foram caracterizadas por medidas de estado estacionário, tamanho de partícula, potencial zeta, espalhamento dinâmico de luz, morfologia, eficiência de carregamento e liberação de fármaco. Na sequência, estudos in vitro foram realizados com e sem luz, conforme descrito pelos protocolos de TFD, utilizando células de gliossarcoma (9 L/LacZ) como modelo biológico, para avaliar o fotodano do fotossensibilizador quando incorporado na formulação polimérica. O tamanho médio das nanopartículas apresentadas foi de 384,7 ± 84,2 nm, com índice de polidispersidade (PDI) de 0,150 ± 0,015 nm, e a eficiência de encapsulação foi de 83%. As formulações de nanopartículas apresentaram valores de potencial zeta negativos (- 27,5 ± 1,0 mV), explicando sua estabilidade coloidal. Os parâmetros fotofísicos característicos foram analisados: o perfil do espectro de absorção mostra que o fotossensibilizador carregado nas nanopartículas não sofre alteração em suas propriedades fotofísicas após o processo de encapsulamento. Um perfil de liberação sustentada ao longo de 168 h foi obtido, com um perfil de liberação de ZnPc bifásico. Um efeito fototóxico in vitro na faixa de 80% foi observado em células de gliossarcoma 9 L/LacZ em doses de luz laser (10 J.cm-2) com 3,0 µg.mL-1 de ZnPc. A ZnPc carregada nas nanopartículas poliméricas apresentou estabilidade física adequada, boas propriedades fotofísicas, perfil de liberação sustentada e atividade in vitro adequada para ser considerada uma formulação promissora para TFD. Com base nos resultados obtidos, é esperado que a utilização de nanopartículas de PLA encapsuladas com ZnPc possa ser um adjuvante promissor no tratamento de neoplasias baseadas na aplicação de protocolos utilizando TFD, sendo que este modelo de sistema de liberação para aplicações em TFD visa contribuir para o aprimoramento tecnológico e científico do país em área inovadora e com potencial elevado de impacto social.Item Síntese de nanopartículas de prata funcionalizadas com amicacina aplicadas contra cepas resistentes de Acinetobacter baumannii(2021-12-07) Camargo, Larissa de Oliveira; Castilho, Maiara Lima; Raniero, Leandro José; Silva, Newton Soares da; Oliveira, Luciane Dias de; São José dos CamposA humanidade se depara com um dos maiores problemas de saúde após décadas de terapia bem-sucedida de acordo com a Organização Mundial da Saúde: bactérias multidrogas resistentes. Dessa maneira, inúmeras pesquisas têm sido realizadas com a intenção de melhorar o espectro de ação dos agentes antimicrobianos existentes e ainda, desenvolver novos fármacos. Há duas substâncias antibacterianas bastante conhecidas, os sais de prata usados desde a Antiguidade e a amicacina, um aminoglicosídeo desenvolvido nos anos 70 com potente atividade contra microrganismos Gram-negativos. Entretanto, devido aos mecanismos evolutivos bacterianos, ambas as drogas perderam a eficácia contra algumas bactérias como Acinetobacter baumannii, um bacilo Gram-negativo nosocomial que pode ser letal em pacientes imunologicamente comprometidos. Objetivando reverter essa problemática, esta pesquisa prevê o desenvolvimento de um nanofármaco a partir de nanopartículas de prata funcionalizadas ao antibiótico amicacina e a avaliação do seu potencial bactericida/bacteriostático contra cepas resistentes de Acinetobacter baumannii. As nanopartículas de prata (AgNPs) foram sintetizadas por meio da redução química entre nitrato de prata e borohidreto de sódio, sendo caracterizadas por espectroscopia UV-Visível na faixa entre 380-400 nm e pelo espalhamento dinâmico de luz. A reação química da carbodiimida foi utilizada para a modificação da amicacina a fim de introduzir grupos dissulfetos no fármaco favorecendo a ligação com as nanopartículas, formando o nanofármaco. A caracterização do processo de modificação do fármaco foi confirmada pela observação dos grupos funcionais moleculares por espectroscopia no infravermelho. Os testes de suscetibilidade como concentração inibitória mínima determinada pela técnica de microdiluição em caldo e concentração bactericida mínima foram realizados de acordo com a padronização internacional ISO 20776-1 usando quatro cepas clínicas de Acinetobacter baumannii multidroga resistentes e uma cepa ATCC (19606) sensível à amicacina para avaliar o potencial bacteriostático e bactericida do nanofármaco (AgNPs@Amicacina) desenvolvido. As AgNPs sintetizadas apresentaram um diâmetro hidrodinâmico de aproximadamente 37nm com uma distribuição bimodal e boa estabilidade química. A conjugação da amicacina com a nanopartícula de prata foi efetiva apresentando bandas de absorção especificas caracterizando o nanofármaco sintetizado. Os testes de susceptibilidade mostram uma grande eficácia das AgNPs@Amicacina contra cepas resistentes de Acinetobacter baumannii apresentando uma concentração bactericida e bacteriostática de 0,5 µg/mL. Esses estudos demonstram dados promissores para o desenvolvimento de um novo antimicrobiano com dosagens mais baixas de aminoglicosídeos, menores efeitos adversos e maior eficácia aplicados em cepas com perfil multidrogas resistentesItem Síntese e caracterização de lipossomas furtivos para a incorporação de extrato de jambu(2024-11-04) Raniero, Leandro José; Simioni, Andreza Ribeiro; Sciamareli, Jairo; Liu, Andréa Santos; Melo, Josué David Gimenez de; Oliveira, Ivone Regina de; São José dos CamposOs lipossomas têm se demonstrado uma excelente ferramenta no carreamento de medicamentos e no uso em cosméticos, minimizando os efeitos colaterais, como por exemplo reações alérgicas, tornando-os mais eficazes na entrega de princípios ativos, aumentando a biodisponibilidade e biossegurança. Este estudo tem como objetivo de desenvolver e investigar a composição do lipossoma e as possíveis interações entre os seus constituintes: lipídio S75, colesterol e polivinilpirrolidona. Foram realizadas formulações e análises laboratoriais, buscando caracterizar e maximizar a resistência mecânica e avaliar a estabilidade, que se refere tanto à preservação da integridade física e química dos lipossomas ao longo do tempo quanto à sua eficiência em encapsular compostos ativos, como o Jambu. Foi utilizado o método de hidratação de película fina na formulação dos lipossomas. Para a caracterização foram empregadas técnicas de análises instrumentais como a espectroscopia no infravermelho médio, análise de calorimetria exploratória diferencial, espalhamento dinâmico de luz, microscopia eletrônica de varredura com emissão FEG, Além do uso da quimiometria para otimização dos dados. Os resultados mostram partículas esféricas na escala nanométrica e uma boa integração entre o colesterol, polivinilpirrolidona e a matriz lipídica, conferindo maior estabilidade e resistência à matriz lipossomática. Portanto, as formulações desenvolvidas neste trabalho demonstraram fiabilidade, ou seja, à capacidade dos lipossomas de manterem seu desempenho e consistência ao longo do tempo, mesmo sob diferentes condições, no controle dos componentes, assim como o encapsulamento da erva medicinal Jambu, o potencial de novos desenvolvimentos em fármacos, proporcionando maior biodisponibilidade e controle de liberação dos compostos encapsulados em futuras aplicações terapêuticas e cosméticas.