Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana com photodithazine® sobre Staphylococcus aureus resistente à Meticilina (MRSA): estudos em biofilmes e modelo experimental de Galleria mellonella

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dc.contributor.advisorFerreira-Strixino, Juliana
dc.contributor.author2Souza, Beatriz Müller Nunes
dc.contributor.coadvisorPinto, Juliana Guerra
dc.contributor.event2São José dos Campospt_BR
dc.contributor.refereeSimioni, Andreza Ribeiro
dc.contributor.refereeJunqueira, Juliana Campos
dc.contributor.refereePacheco-Soares, Cristina
dc.contributor.refereeMiñán, Alejandro Guillermo
dc.date.accessioned2022-10-07T18:38:55Z
dc.date.available2022-10-07T18:38:55Z
dc.date.issued2022-02-24
dc.description.abstractInfecções por Staphylococcus aureus são consideradas um grave problema de saúde, gerando altos índices de mortalidade. O tratamento convencional para essas infecções é feito por meio da administração de antibióticos, porém o uso indiscriminado destes fármacos pode selecionar microrganismos resistentes. Por este motivo, é necessário o desenvolvimento de alternativas para a antibioticoterapia, como a Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) que se baseia em um método terapêutico que emprega um fotossensibilizador (FS) e uma fonte de luz com comprimento de onda adequado ao FS, capazes de interagir com o oxigênio molecular formando espécies reativas de oxigênio, responsáveis pela inativação celular. O trabalho teve como objetivo analisar, in vitro e in vivo, a ação da TFDa com Photodithazine® (PDZ) em cepa de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA). Para o método in vitro, o biofilme de S. aureus foi incubado com PDZ nas concentrações de 50 e 75 µg.mL-1 durante 15 minutos e a irradiação foi realizada com as fluências de 25, 50 e 100 J/cm². Foram avaliadas a internalização do FS, a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL), a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), o metabolismo bacteriano, a aderência e a estrutura do biofilme por microscopia eletrônica de varredura, antes e após aplicação da terapia. No método in vivo, inicialmente a cepa foi inoculada em modelos de Galleria mellonella e após a aplicação da TFDa foi analisada curva de sobrevivência, escala de saúde, análise hemócitária e UFC/mL de S. aureus na hemolinfa. Nos resultados in vitro, foi observada a redução bacteriana nas diferentes concentrações de PDZ, destacando os parâmetros de 75 µg.mL-1 de PDZ e 100 J/cm². Já nos resultados in vivo, a TFDa aumentou a sobrevida e estimulou o sistema imune das larvas de G. mellonella infectadas por S. aureus. A TFDa em ambos os métodos foi eficaz, demonstrando o potencial da terapia como uma alternativa no tratamento de infecções bacterianas por MRSA.pt_BR
dc.description.abstract2Staphylococcus aureus infections are considered a serious health problem, generating high mortality rates. Conventional treatment for these infections is done through the administration of antibiotics, but the indiscriminate use of these drugs can select resistant microorganisms. For this reason, it is necessary to develop alternatives for antibiotic therapy, such as Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT), which is based on a therapeutic method that employs a photosensitizer (PS) and a source of light with adequate wavelength to PS, capable of interact with molecular oxygen forming reactive oxygen species, responsible for cell inactivation. The objective of this study was to analyze, in vitro and in vivo, the action of aPDT with Photodithazine® (PDZ) on a strain of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). For the in vitro method, the S. aureus biofilm was incubated with PDZ at concentrations of 50 and 75 µg.mL-1 for 15 minutes and irradiation was performed with fluences of 25, 50 and 100 J/cm². PS internalization, colony forming unit count (CFU/mL), formation of reactive oxygen species (ROS), bacterial metabolism, adherence and biofilm structure were evaluated by scanning electron microscopy, before and after application of therapy. In the in vivo method, initially the strain was inoculated in Galleria mellonella models and after the application of the aPDT survival curve, health scale, hemocytic analysis and CFU/mL of S. aureus in the hemolymph were analyzed. In the in vitro results, bacterial reduction was observed at different concentrations of PDZ, highlighting the parameters of 75 µg.mL-1 of PDZ and 100 J/cm². In the in vivo results, aPDT increased survival and stimulated the immune system of G. mellonella larvae infected by S. aureus. aPDT in both methods was effective, demonstrating the potential of the therapy as an alternative in the treatment of bacterial infections caused by MRSA.pt_BR
dc.description.physical88 f.pt_BR
dc.format.mimetypepdfpt_BR
dc.identifier.bibliographicCitation2SOUZA, Beatriz Müller Nunes Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana com photodithazine® sobre Staphylococcus aureus resistente à Meticilina (MRSA): estudos em biofilmes e modelo experimental de Galleria mellonella. 2022. 88f. Dissertação (mestrado em Engenharia Biomédica) - Universidade do Vale do Paraíba, Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento, 2022. Disponível em: Acesso em:pt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.univap.br/handle/123456789/200
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.publisher.countryBrasil,pt_BR
dc.publisher.initialsUnivap,pt_BR
dc.publisher.institutionUniversidade do Vale do Paraíba,pt_BR
dc.publisher.programMestrado em Engenharia Biomédicapt_BR
dc.publisher.spatialSão José dos Campos,pt_BR
dc.rightsAcesso Abertopt_BR
dc.subject.keywordFotoquimioterapiapt_BR
dc.subject.keywordBactérias Gram-Positivaspt_BR
dc.subject.keywordStaphylococcus aureuspt_BR
dc.titleEfeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana com photodithazine® sobre Staphylococcus aureus resistente à Meticilina (MRSA): estudos em biofilmes e modelo experimental de Galleria mellonellapt_BR
dc.title.alternativeEffects of antimicrobial photodynamic therapy with photodithazine® on methicillin-resistant staphylococcus aureus (mrsa): studies in biofilms and experimental model of Galleria mellonellapt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
dc.type.masterDegreeMestrado Acadêmicopt_BR

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