Ação da Terapia Fotodinâmica em linhagem celular de gliossarcoma 9L/lacZ utilizando baixas fluências e concentrações de Fotoenticine e Photodithazine

dc.contributor.advisorFerreira-Strixino, Juliana
dc.contributor.authorVitório, Gabrielle dos Santos
dc.contributor.coadvisorPinto, Juliana Guerra
dc.contributor.event2São José dos Campos
dc.contributor.refereeSoares, Cristina Pacheco
dc.contributor.refereeCastilho, Maiara Lima
dc.contributor.refereeTada, Dayane Batista
dc.date.accessioned2024-04-25T12:44:25Z
dc.date.available2024-04-25T12:44:25Z
dc.date.issued2022-03-22
dc.description.abstractO Gliossarcoma é um câncer agressivo, com alta propensão metastática. Atualmente seu tratamento consiste em ressecção cirúrgica seguida de radio-quimioterapia, oferecendo baixa expectativa e qualidade de vida. Como proposta alternativa, a Terapia Fotodinâmica (TFD) se apresenta como método seletivo de tratamento, combinando o uso de um fotossensibilizador (FS), oxigênio molecular e luz. Esses três elementos geram as espécies reativas de oxigênio, levando à morte celular. O objetivo desse estudo foi avaliar a ação da TFD utilizando as clorinas Fotoenticine (FTC) e Photodithazine (PDZ) em baixas concentrações e fluências, verificando a diferença entre seus efeitos. Foram utilizadas células 9L/lacZ e concentrações de 1,55 µg.mL -12,50 µg.mL -1 e 50,00 µg.mL-1de ambas clorinas. As células foram irradiadas com um dispositivo a base de LED em 660 nm nas fluências de 1 J/cm², 5 J/cm² e 10 J/cm², em 25 mW/cm². Observou-se que ambas clorinas apresentam indícios da formação de fotoprodutos após irradiação e são internalizadas em toda extensão citoplasmática, com restrição ao núcleo. Os testes de citotoxicidade demonstraram redução >98% da viabilidade celular e queda na atividade mitocondrial >86% nas concentrações de 50,00 µg.mL-1 e 12,50 µg.mL-1 em todas as fluências de luz testadas, entretanto a concentração de 1,55 µg.mL-1não apresentou um resultado tão eficaz na fluência de 1 J/cm². Houve alteração na adesão celular após TFD conforme diminuição da concentração, no qual as células desprendidas se apresentavam mortas, indicando que o desprendimento celular corresponde à uma característica do processo de morte celular, assim como as alterações morfológicas apresentadas, como a perda da extensão citoplasmática, adquirindo formato arredondado. A imunodetecção de HSP70 diminuiu, enquanto a de HSP27 aumentou após TFD com o FTC. Com isso, conclui-se que ambos FS foram eficazes na TFD em células de gliossarcoma, com destaque para a concentração de 50,00 µg.mL-1 na fluência de 5 J/cm². Além disso, levando em consideração a elevada imunodetecção da HSP27 na TFD com o FTC, o PDZ se apresenta como um promissor FS para ser empregado na TFD com células 9L/lacZ, encorajando estudos in vivo.
dc.description.abstract2Gliosarcoma is an aggressive cancer with a high metastatic propensity. Currently, its treatment consists of surgical resection followed by radiochemotherapy, offering low life expectancy and quality. As an alternative proposal, Photodynamic Therapy (PDT) is presented as a selective method of treatment, combining the use of a photosensitizer (PS), molecular oxygen and light. These three elements generate the reactive oxygen species, leading to cell death. The objective of this study was to evaluate the action of PDT using the chlorins Fotoenticine (FTC) and Photodithazine (PDZ) at low concentrations and fluences, verifying the difference between their effects. 9L/lacZ cells and concentrations of 1.55 µg.mL-1, 12.50 µg.mL-1and 50.00 µg.mL -1of both chlorines were used. Cells were irradiated with an LED-based device at 660 nm at fluences of 1 J/cm², 5 J/cm² and 10 J/cm², at 25 mW/cm². It was observed that both chlorines show evidence of the formation of photoproducts after irradiation and are internalized throughout the cytoplasm, with restriction to the nucleus. The cytotoxicity tests showed a >98% reduction in cell viability and a >86% decrease in mitochondrial activity at concentrations of 50.00 µg.mL-1and 12.50 µg.mL-1in all light fluences tested, however the concentration of 1.55 µg.mL-1did not present such an effective result at the fluence of 1 J/cm². There was a change in cell adhesion after PDT as the concentration decreased, in which the detached cells were dead, indicating that cell detachment corresponds to a characteristic of the cell death process, as well as the morphological alterations presented, such as the loss of cytoplasmic extension, acquiring a rounded shape. Immunodetection of HSP70 decreased, while that of HSP27 increased after PDT with FTC. Thus, it is concluded that both FS were effective in PDT in gliosarcoma cells, with emphasis on the concentration of 50.00 µg.mL-1 at a fluence of 5 J/cm². Furthermore, taking into account the high immunodetection of HSP27 in PDT with FTC, PDZ presents itself as a promising FS to be used in PDT with 9L/lacZ cells, encouraging in vivo studies.
dc.description.physical76 f.
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
dc.format.mimetypePDF
dc.identifier.affiliationUniversidade do Vale do Paraíba
dc.identifier.bibliographicCitation2VITÓRIO, Gabrielle dos Santos. Ação da Terapia Fotodinâmica em linhagem celular de gliossarcoma 9L/lacZ utilizando baixas fluências e concentrações de Fotoenticine e Photodithazine. São José dos Campos, 2022. 20 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Biomédica) - Universidade do Vale do Paraíba, Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento, 2022
dc.identifier.urihttps://repositorio.univap.br/handle/123456789/374
dc.language.isopt_BR
dc.publisher.countryBrasil
dc.publisher.initialsUNIVAP
dc.publisher.institutionUniversidade do Vale do Paraíba
dc.publisher.programMestrado em Engenharia Biomédica
dc.publisher.spatialSão José dos Campos
dc.subject.keywordTerapia Fotodinâmica
dc.subject.keywordGliossarcoma
dc.subject.keywordProteína de choque
dc.titleAção da Terapia Fotodinâmica em linhagem celular de gliossarcoma 9L/lacZ utilizando baixas fluências e concentrações de Fotoenticine e Photodithazine
dc.title.alternativeAction of Photodynamic Therapy in gliosarcoma cell line 9L/lacZ using low fluences and concentrations of Fotoenticine and Photodithazine
dc.typeDissertação
dc.type.masterDegreeAcadêmico

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