Desenvolvimento de método de detecção múltipla e simultânea de anticorpos da classe IGM contra Toxoplasma Gondii, rubéola e citomegalovírus
| dc.contributor.advisor | Soares, Cristina Pacheco | |
| dc.contributor.author | Almeida, Rainara Moreno Sanches de | |
| dc.contributor.coadvisor | Silva, Newton Soares da | |
| dc.contributor.event2 | São José dos Campos | |
| dc.contributor.referee | Ferreira, Juliana | |
| dc.contributor.referee | Raniero, Leandro José | |
| dc.contributor.referee | Ogawa, Guilherme Maerschner | |
| dc.date.accessioned | 2024-11-22T16:19:14Z | |
| dc.date.available | 2024-11-22T16:19:14Z | |
| dc.date.issued | 2022-12-14 | |
| dc.description.abstract | O diagnóstico sorológico durante a triagem pré e neonatal é de extrema importância na prevenção de doenças. Dentre as doenças infecciosas, as mais comuns são a toxoplasmose, rubéola e citomegalovírus. Os métodos tradicionais de diagnóstico utilizados na triagem neonatal detectam por ensaio um único agente infeccioso. A utilização de métodos de detecção múltipla e simultânea aumenta a produtividade e diminui a quantidade de material utilizado, resultando em um ensaio mais eficiente do ponto de vista técnico, ambiental e econômico. O objetivo do nosso estudo é desenvolver um método de detecção simultânea de anticorpos da classe IgM contra Toxoplasma gondii, rubéola e citomegalovírus. Para isso foram realizados acoplamentos de diferentes antígenos em microesferas magnéticas, seguido de ensaios de desempenho para identificar os melhores parâmetros a serem utilizados, como melhor concentração e tampão. Após definido os acoplamentos, foram realizados ensaios para obtenção dos valores de corte, sensibilidade e especificidade de cada antígeno acoplado. Em seguida, foram realizados ensaios de desempenho para validação analítica dos produtos diagnósticos seguindo as normas na Agência Nacional de Vigilancia sanitaria (ANVISA). Os parâmetros avaliados foram repetibilidade, reprodutibilidade, linearidade, robustez, alta dose, limite mínimo de detecção, especificidade analítica e estabilidade acelerada. Todos os dados obtidos atenderam aos critérios de aceitação da RDC 166/17 para utilização do produto diagnóstico em território nacional. Os ensaios de repetibilidade e reprodutibilidade apresentaram Constante de Variação (CV) menor que 15% entre as replicatas do mesmo operador e operadores distintos. O kit apresentou linearidade em toda a faixa de trabalho com R2 acima de 0.990 e não foi observado efeito de alta dose de anticorpos na diluição de trabalho escolhida. Além disso, o kit não apresentou interferência da matriz com os resultados e foi observado que pequenas e deliberadas alterações no tempo de incubação de cada reagente não afetam de forma significativa nos dados obtidos. | |
| dc.description.abstract2 | Serological diagnosis during neonatal screening is extremely important in disease prevention. Among the infectious diseases, the most common are toxoplasmosis, rubella, and cytomegalovirus. Traditional diagnostic methods used in neonatal screening detect a single infectious agent per test. The use of multiple and simultaneous detection methods increases productivity and reduces the amount of material used, resulting in a more efficient test from a technical, environmental, and economic point of view. The aim of our study is to develop a method for the simultaneous detection of antibodies of the IgM class against Toxoplasma gondii, rubella and cytomegalovirus. For this purpose, couplings of different antigens to magnetic microspheres were carried out, followed by performance tests to identify the best parameters to be used, such as the best concentration and buffer. After defining the couplings, tests were performed to obtain the cutoff values, sensitivity, and specificity of each coupled antigen. Then, performance tests were carried out for the analytical validation of the diagnostic products, following the norms of the National Health Surveillance Agency (ANVISA). The evaluated parameters were repeatability, reproducibility, linearity, robustness, high dose, minimum detection limit, analytical specificity, and accelerated stability. All data obtained met the acceptance criteria of RDC 166/17 for the use of the diagnostic product in the national territory. The repeatability and reproducibility tests showed a Constant Variation (CV) of less than 15% between replicates of the same operator and different operators. The kit showed linearity throughout the working range with R2 above 0.990 and no effect of high antibody dose was observed in the chosen working dilution. In addition, the kit did not show interference from the matrix with the results, and it was observed that small and deliberate changes in the incubation time of each reagent do not significantly affect the data obtained. | |
| dc.description.physical | 63 f. | |
| dc.format.mimetype | ||
| dc.identifier.affiliation | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.identifier.bibliographicCitation2 | ALMEIDA, Rainara Moreno Sanches de. Desenvolvimento de método de detecção múltipla e simultânea de anticorpos da classe IGM contra Toxoplasma Gondii, rubéola e citomegalovírus. São José dos Campos, 2022. 63 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Biomédica) - Universidade do Vale do Paraíba, Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento, São José dos Campos, 2022. | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.univap.br/handle/123456789/421 | |
| dc.language.iso | pt_BR | |
| dc.publisher.country | Brasil | |
| dc.publisher.initials | UNIVAP | |
| dc.publisher.institution | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.publisher.program | Mestrado em Engenharia Biomédica | |
| dc.publisher.spatial | São José dos Campos | |
| dc.subject.keyword | Triagem neonatal | |
| dc.subject.keyword | Microesferas magnéticas | |
| dc.subject.keyword | Validação analítica | |
| dc.title | Desenvolvimento de método de detecção múltipla e simultânea de anticorpos da classe IGM contra Toxoplasma Gondii, rubéola e citomegalovírus | |
| dc.title.alternative | Development of a method for multiple and simultaneous detection of IGM class antibodies against Toxoplasma Gondii, rubella and cytomegalovirus | |
| dc.type | Dissertação | |
| dc.type.masterDegree | Acadêmico |