Análise de glicoproteínas de superfície e matriz extracelular em esferoides de células tumorais de mama MCF-7 após terapia fotodinâmica
| dc.contributor.advisor | Pacheco-Soares, Cristina | |
| dc.contributor.author | Santos, Mariela Inês Batista dos | |
| dc.contributor.event2 | São José dos Campos | |
| dc.contributor.referee | Ferreira-Strixino, Juliana | |
| dc.contributor.referee | Junqueira, Juliana Campos | |
| dc.date.accessioned | 2025-04-04T15:36:06Z | |
| dc.date.available | 2025-04-04T15:36:06Z | |
| dc.date.issued | 2025-02-04 | |
| dc.description.abstract | O câncer de mama é a forma mais comum de câncer entre as mulheres em todo o mundo. Estima-se que haja milhões de casos diagnosticados a cada ano, com um número significativo de mortes relacionadas à doença. No Brasil, o câncer de mama é o segundo mais diagnosticado, ficando atrás apenas do câncer de pele. A incidência é maior em mulheres entre 40 e 60 anos, mas também pode ocorrer em homens, embora em uma proporção muito menor. O diagnóstico precoce é essencial para melhorar as taxas de sobrevivência e oferecer tratamentos menos invasivos. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma abordagem terapêutica promissora no tratamento do câncer de mama, esta técnica se baseia na utilização de uma substância fotossensibilizante e uma fonte de luz que gera espécies reativas de oxigênio causando danos permanentes aos compartimentos celulares. Os objetivos do trabalho se baseiam em analisar os efeitos da terapia fotodinâmica em marcadores de células epiteliais e na fisiologia de esferoides de células tumorais de mama MCF-7 e na linhagem não tumoral MCF-10A, além de estabelecer uma metodologia para o cultivo tridimensional de células. Utilizou-se linhagens celulares de câncer de mama (MCF-7), células de tecido mamário saudável (MCF-10A) e linhagem de macrófagos (RAW-264.7). Para a TFD foi utilizado a Alumínio Ftalocianina Tetrasulfonada (AlPcS4) na concentração de 5 µM. mL-1 , com tempo de incubação de 1 h em estufa ao abrigo da luz, o tempo de irradiação foi de 1 minuto e 45 segundos no comprimento de onda de 660 nm. Para os testes foram feitos ensaios de taxa de atividade metabólica (MTT), ensaios de glicosilação para determinar a presença de glicoproteínas como manosamina, galactosamina e glucosamina, além de glicoproteínas de matriz extracelular como laminina e fibronectina. Testes de interação celular entre células e macrófagos, fotografias por microscópio eletrônico de varredura (MEV) e marcação de atividade nuclear e mitocondrial por microscopia confocal. Os resultados demonstram a efetividade da TFD nas células de câncer de mama, no qual a morte celular foi detectada em todos os testes feitos, os resultados foram obtidos por meios quantitativos pelo MTT e qualitativos pelas fotografias feitas em microscopia de fluorescência, confocal e de varredura. Conclui-se que as análises pós TFD dos marcadores celulares demonstraram a significativa redução da atividade de células de câncer. Sendo assim, a TFD é eficaz para a redução da população celular cancerígena. | |
| dc.description.abstract2 | Breast cancer is the most common form of cancer among women worldwide. It is estimated that millions of cases are diagnosed each year, with a significant number of deaths related to the disease. In Brazil, breast cancer is the second most diagnosed, behind only skin cancer. The incidence is higher in women between the ages of 40 and 60, but it can also occur in men, although at a much lower rate. Early diagnosis is essential to improve survival rates and offer less invasive treatments. Photodynamic therapy (PDT) is a promising therapeutic approach in the treatment of breast cancer. This technique relies on the use of a photosensitizing substance and a light source that generates reactive oxygen species, causing permanent damage to cellular compartments. The objectives of this work are based on analyzing the effects of photodynamic therapy on markers of epithelial cells and the physiology of MCF-7 breast tumor cell spheroids and the non-tumor MCF-10A cell line, as well as establishing a methodology for the three-dimensional cultivation of cells. Breast cancer cell lines (MCF-7), healthy mammary tissue cells (MCF-10A), and macrophage cell lines (RAW-264.7) were used. For PDT, Aluminum Phthalocyanine Tetrasulfonate (AlPcS4) was used at a concentration of 5 µM. mL-1, with an incubation time of 1 hour in a light-protected incubator. The irradiation time was 1 minute and 45 seconds at a wavelength of 660 nm. For the tests, metabolic activity rate assays (MTT), glycosylation assays to determine the presence of glycoproteins such as mannose, galactosamine, and glucosamine, as well as extracellular matrix glycoproteins such as laminin and fibronectin, were performed. Cellular interaction tests between cells and macrophages, scanning electron microscopy (SEM) imaging, and nuclear and mitochondrial activity labeling by confocal microscopy were conducted. The results demonstrate the effectiveness of PDT in breast cancer cells, where cell death was detected in all tests performed. The results were obtained quantitatively through MTT assays and qualitatively through images taken with fluorescence, confocal, and scanning electron microscopy. It is concluded that the post-PDT analyses of cellular markers showed a significant reduction in cancer cell activity. Thus, PDT is effective for reducing the cancer cell population. | |
| dc.description.physical | 48 f. | |
| dc.format.mimetype | ||
| dc.identifier.affiliation | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.identifier.affiliation | Unesp | |
| dc.identifier.bibliographicCitation2 | SANTOS, Mariela Inês Batista dos. Análise de glicoproteínas de superfície e matriz extracelular em esferoides de células tumorais de mama MCF-7 após terapia fotodinâmica. São José dos Campos, SP, 2025. 48 f.; PDF. Dissertação (Mestrado em Engenharia Biomédia) - Universidade do Vale do Paraíba, Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento, São José dos Campos, 2025. | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.univap.br/handle/123456789/806 | |
| dc.language.iso | pt_BR | |
| dc.publisher.country | Brasil | |
| dc.publisher.initials | Univap | |
| dc.publisher.institution | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.publisher.program | Mestrado em Engenharia Biomédica | |
| dc.publisher.spatial | São José dos Campos | |
| dc.subject.keyword | Câncer de mama | |
| dc.subject.keyword | Microscopia | |
| dc.subject.keyword | Fluorescência | |
| dc.subject.keyword | Glicoproteínas | |
| dc.title | Análise de glicoproteínas de superfície e matriz extracelular em esferoides de células tumorais de mama MCF-7 após terapia fotodinâmica | |
| dc.title.alternative | Analysis of surface glycoproteins and extracellular matrix in MCF-7 breast tumor cell spheroids after photodynamic therapy | |
| dc.type | Dissertação | |
| dc.type.masterDegree | Mestrado Acadêmico |