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    Efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana com photodithazine® sobre Staphylococcus aureus resistente à Meticilina (MRSA): estudos em biofilmes e modelo experimental de Galleria mellonella
    (2022-02-24) Souza, Beatriz Müller Nunes; Ferreira-Strixino, Juliana; Simioni, Andreza Ribeiro; Junqueira, Juliana Campos; Pacheco-Soares, Cristina; Miñán, Alejandro Guillermo; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
    Infecções por Staphylococcus aureus são consideradas um grave problema de saúde, gerando altos índices de mortalidade. O tratamento convencional para essas infecções é feito por meio da administração de antibióticos, porém o uso indiscriminado destes fármacos pode selecionar microrganismos resistentes. Por este motivo, é necessário o desenvolvimento de alternativas para a antibioticoterapia, como a Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) que se baseia em um método terapêutico que emprega um fotossensibilizador (FS) e uma fonte de luz com comprimento de onda adequado ao FS, capazes de interagir com o oxigênio molecular formando espécies reativas de oxigênio, responsáveis pela inativação celular. O trabalho teve como objetivo analisar, in vitro e in vivo, a ação da TFDa com Photodithazine® (PDZ) em cepa de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA). Para o método in vitro, o biofilme de S. aureus foi incubado com PDZ nas concentrações de 50 e 75 µg.mL-1 durante 15 minutos e a irradiação foi realizada com as fluências de 25, 50 e 100 J/cm². Foram avaliadas a internalização do FS, a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC/mL), a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), o metabolismo bacteriano, a aderência e a estrutura do biofilme por microscopia eletrônica de varredura, antes e após aplicação da terapia. No método in vivo, inicialmente a cepa foi inoculada em modelos de Galleria mellonella e após a aplicação da TFDa foi analisada curva de sobrevivência, escala de saúde, análise hemócitária e UFC/mL de S. aureus na hemolinfa. Nos resultados in vitro, foi observada a redução bacteriana nas diferentes concentrações de PDZ, destacando os parâmetros de 75 µg.mL-1 de PDZ e 100 J/cm². Já nos resultados in vivo, a TFDa aumentou a sobrevida e estimulou o sistema imune das larvas de G. mellonella infectadas por S. aureus. A TFDa em ambos os métodos foi eficaz, demonstrando o potencial da terapia como uma alternativa no tratamento de infecções bacterianas por MRSA.
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    Efeito antimicrobiano da membrana amniótica isolada e associada à terapia fotodinâmica
    (2023-03-02) Sant'Anna, Luciana Barros; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Tada, Dayane Batista; Santos, Amanda Cerquearo Rodrigues dos; Ferreira-Strixino, Juliana; São José dos Campos
    Devido ao avanço da resistência bacteriana aos tratamentos convencionais, a busca por terapias alternativas isoladas ou combinadas, como a utilização da membrana amniótica (MA), produtos antimicrobianos e a terapia fotodinâmica (TFD), vem aumentando a fim de alcançar um controle microbiano eficaz e adequado. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito antimicrobiano da MA isolada e associada à TFD utilizando a solução de PHTALOX® (PHTX) como fotossensibilizador (FS), frente a biofilmes de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. Foram realizados dois experimentos independentes em triplicata dos grupos experimentais: Grupo C+, Grupo L, Grupo PHTX, Grupo TFD, Grupo MA, Grupo MA+L, Grupo MA+PHTX, Grupo MA+TFD. A montagem dos biofilmes foi realizada a partir do preparo de inóculos de S. aureus e P. aeruginosa (108 células/mL), e incubação de 48 horas a 37 ºC. Para obtenção da MA, cinco placentas humanas foram obtidas a partir de cesárias eletivas, após consentimento prévio e todos os exames sorológicos negativos (5.200.827/CEP/2021). Após o processamento e a criopreservação, a MA permaneceu em contato com os biofilmes por 24 horas a 37 ºC, nos grupos que envolviam este tratamento. O FS de estudo foi uma ftalocianina comercial (PHTALOX®), com tempo de incubação de 15 minutos a 37 ºC em ausência de luz. Nos grupos onde se realizou TFD, o tempo de incubação foi seguido de irradiação a partir de um dispositivo com 24 LEDs, com emissão de luz em 660 nm, densidade de potência de 30 mW.cm-², densidade de energia de 50 J.cm-2 e tempo de irradiação de 28 minutos e 18 segundos. Os resultados obtidos foram analisados por meio da contagem de UFC/mL, teste de atividade metabólica por MTT, e análise estatística, considerado estatisticamente significante p<0,05. A internalização do FS foi verificada por meio da fluorescência, e foi também realizado o espectro de absorção, quantificação de espécies reativas de oxigênio (ERO) e rendimento quântico de oxigênio singleto (1O2) da solução de PHTALOX®. A verificação da integridade da MA foi verificada após os tratamentos por microscópio eletrônico de varredura (MEV). A solução de PHTALOX® apresentou pico máximo de absorção em 228, 333 e 690 nm e baixa fluorescência se concentrando superficialmente nas células bacterianas. Em relação à geração de ERO, foi obtida diferença estatística (p<0,05) nos grupos PHTX e TFD quando comparados ao grupo C+, contudo não foi observada geração de 1O2. Os grupos MA, MA+PHTX, PHTX, TFD e MA+TFD demonstraram diferença estatística (p<0,05) quando comparados ao C+ em relação à diminuição de UFC/mL e da atividade metabólica. Entretanto, não foi observada diferença estatística em relação à diminuição de UFC/mL na análise entre os grupos PHTX e TFD, e, MA+PHTX e MA+TFD. A análise por MEV em ambas as faces da MA demonstrou alterações morfológicas relevantes nos grupos MA+PHTX e MA+TFD, contudo tal alteração não impossibilitou seu efeito antimicrobiano. Com isso, conclui-se que o tratamento isolado com a MA e com a solução de PHTALOX® foram eficazes contra biofilme de S. aureus e P. aeruginosa, e que a associação destes potencializou o efeito antimicrobiano desse tratamento. Contudo, as demais análises apontaram que a fotoatividade da PHTALOX® foi menor do que ftalocianinas encontradas na literatura.
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    Efeito da terapia fotodinâmica com azul de toluidina sobre biofilme multiespécie de C. albicans E C. krusei
    (2023-03-08) Costa, Maricília Silva; Soares, Luís Eduardo Silva; Silva, Carlos Alberto; Rodrigues, Ana Beatriz Furtado; São José dos Campos
    Biofilmes são agrupamentos de microrganismos que garantem vantagens e alto nível de organização, elevado índice de sobrevivência a condições adversas, além de proteção contra a ação de antimicrobianos e evasão do sistema imunológico. Podem ser formados por uma ou mais espécies, sendo que aqueles constituídos por diferentes espécies são mais resistentes a ação das drogas. Até o presente momento estão disponíveis para terapia convencional um pequeno número de antifúngicos, divididos em três classes: polienos, azóis e equinocandinas. São tratamentos que podem apresentar efeitos colaterais como nefrotoxicidade. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma técnica que se baseia na interação da luz com o fotossensibilizador (FS) e oxigênio molecular, acarretando numa reação fotoquímica que gera espécies citotóxicas que promovem morte celular. Há algum tempo vem sendo empregada no tratamento de infecções cutâneas, pois apresenta poucos efeitos adversos para o paciente. Tendo em vista o desafio de tratar infecções causadas por microrganismos resistentes e que estejam acompanhadas de biofilmes, torna-se necessária a busca por tratamentos para infecções com múltiplas espécies, sobretudo que tragam menos riscos. Com isso, o presente estudo visa analisar os efeitos da TFD com azul de toluidina (AT) sobre biofilme multiespécie formado de C. albicans e C. krusei. Para realização dos experimentos as culturas foram cultivadas em ágar Sabouraud e incubadas em estufa bacteriológica por 48h, a 37°C. Após este período, uma amostra de cada espécie foi recolhida e suspensa em solução fisiológica estéril. Como fonte de luz visível foi empregado um diodo emissor de luz (LED) com potência de 0,068 W, iluminando uma área de 0,38 cm², comprimento de onda de 630nm e densidade de energia de 30 J.cm-2, e tempo de irradiação de 2 minutos e 45 segundos. A atividade metabólica do biofilme foi determinada por reação de redução do sal XTT, além de observação ao microscópio. Pode-se concluir que, com base nos dados obtidos no presente estudo, a TFD com AT apresentou efeito sobre o biofilme multiespécie formado, promovendo redução de sua atividade metabólica.
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    Eficácia da terapia fotodinâmica com ácido 5-aminolevulínico e metil 5-aminolevulinato no rejuvenescimento da pele utilizando Led âmbar e infravermelho
    (2024-05-08) Ferreira-Strixino, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Canevari, Renata de Azevedo; Menezes, Priscila Fernanda Campos de; Pedroso, Juliana Teixeira; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
    A pele é a principal barreira de defesa do organismo humano, atua na homeostase corporal, proteção contra microrganismos, substâncias e radiações, prevenção de perda excessiva de água, produção de vitamina D e influencia fatores psicossociais. O envelhecimento intrínseco da pele, pode acarretar a perda ou redução de muitas dessas funções, podendo ser ainda mais acentuado na pele fotoenvelhecida. A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma técnica não invasiva usada no tratamento de câncer, infecções microbianas, lesões pré-cancerosas e para fins estéticos da pele. Pesquisas sobre a atividade da TFD tópica sugerem efeitos antibacterianos, anti-inflamatórios e imunomoduladores em queranócitos, fibroblastos, glândulas sebáceas e folículos pilosos. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi comparar a eficiência da TFD na redução dos sinais de fotoenvelhecimento, com ácido 5-aminolevulínico (ALA) e metil 5-aminolevulinato (MAL) a 2% e luz de LED âmbar (590 +/- 10 nm) e laser infravermelho (808 nm +/- 10 nm) associados em mulheres entre 40 e 55 anos. Além disso, objetiva-se identificar o tempo ótimo de incubação dos fármacos e quantificar a produção de protoporfirina IX (PpIX) e avaliar alterações nos sinais de fotoenvelhecimento após a TFD. As participantes recrutadas foram submetidas ao protocolo clínico por quatro sessões com intervalo de aproximadamente um mês. A análise de produção de PpIX foi realizada pela conversão de imagens do evidenciador Lince em histogramas de cor e a documentação fotográfica foi analisada qualitativamente quanto aos sinais de fotoenvelhecimento. A TFD se mostrou eficiente no rejuvenescimento facial, demonstrando redução de linhas finas, suavização de rugas, maciez e firmeza da pele e melhora da flacidez. Dentre os fármacos, o efeito maior de rejuvenescimento foi atribuído ao ALA, a concentração de 2% e a interação com os comprimentos de onda âmbar e infravermelho associados permitiram que tais resultados fossem atingidos com efeitos colaterais mínimos.
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    O uso da inativação fotodinâmica como alternativa para descontaminação de fragmentos de pele destinados a transplantes: modelo experimental em pele de suínos
    (2020-11-13) Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes; Lima, Fernanda Pupio Silva; Ribeiro, Martha Simões; Núñez, Silvia Cristina; Araújo, Dhenise Mikaelly Meneses de; São José dos Campos
    A cobertura temporária por pele biológica ou sintética é importante para a cura completa e mais rápida de queimaduras e outros defeitos de pele. Atualmente é utilizada a radioesterilização para garantir a qualidade dos tecidos usados em transplantes e outras aplicações clínicas. Alterações morfológicas e funcionais no tecido podem ser devido à absorção da energia ionizante liberada durante a radiação, além de acarretar danos ao profissional habilitado, como também o alto custo empregado nessa técnica. Diferentemente a inativação fotodinâmica mostra evidências de ser viável, tem baixo custo e com danos mínimos à saúde do profissional que está operando. Então levantamos a questão, a utilização da inativação fotodinâmica pode ser uma alternativa em banco de tecidos para descontaminação de pele? A inativação fotodinâmica é uma abordagem multifatorial que envolve três componentes principais, fotossensibilizador, luz e oxigênio, e tem sido utilizada como um método alternativo para erradicar microrganismos patogênicos, como bactérias e fungos. Este estudo tem por objetivo avaliar os efeitos da inativação fotodinâmica na pele suína, visando o seu uso para descontaminação da pele destinadas a transplantes. Foram utilizados umtotalde47 fragmentos de pele suína com dimensões de tamanho 1x1 cm, provenientes da região da orelha do suíno. Foi realizado o experimento em duas etapas, sendo diluído o azul de metileno na água destilada estéril a partir de 10 milimolar para concentração de 50, 75 e 100 micromolar na primeira etapa e 12,5 e 25 micromolar na segunda etapa. As placas tiveram um tempo de pré-irradiaçãode 20 minuto. Para este trabalho foi utilizado o equipamento LEDbox, emitindo660nm. As placas foram expostas à radiação durante um período de 20 minutos. Foi adotada a diluição seriada de 1:10 e o método de escorrimento na placa conforme adaptação da metodologia de Tippelskircha et al. (2018). Após 24 h de incubação, as placas foram retiradas da incubadora para fazer a contagem das unidades formadoras de colônias. Para a análise morfológica foi utilizada a tomografia por coerência óptica. Os resultados obtidos apontam que os grupos das concentrações de azul de metileno de 12,5 e 25 µM são estatisticamente diferentes (p<0,05), do grupos das concentrações de 75 e 100 µM, sendo os grupos das concentrações de 12,5 e 25 µM apresentaram-se uma maior eficácia na redução das UFCs. As imagens da tomografia de coerência óptica mostraram que é possível observar a camada do epitélio nos diferentes grupos, sem alteração ou deformação em comparação com a pele do grupo controle. A literatura apresenta poucos estudos voltados na área e com isso houve uma dificuldade maior e limitação no desenvolvimento da metodologia. Os resultados obtidos são conflitantes, pois demonstram o potencial da inativação fotodinâmica e do azul de metileno isolado, para a descontaminação da pele, embora haja a necessidade de mais ensaios laboratoriais para desempenhar uma maior inativação dos microrganismos na pele. É um estudo inovador, teve como objetivo estabelecer um modelo de protocolo de baixo custo para investigação de descontaminação da pele com o uso da inativação fotodinâmica em modelo animal. A metodologia foi bem definida e detalhada, sendo possível a repetição de mais testes, e foi alcançado objetivo de estabelecer um modelo de procedimento operacional padrão para a realização de descontaminação da pele.
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    Preparação e caracterização de nanopartícula polieletrolítica de BSA como sistema de liberação para compostos ativos em terapia fotodinâmica
    (2020-04-30) Simioni, Andreza Ribeiro; Gonçalves, Érika Peterson; Sibelino, Sônia Khouri; Liu, Andréa Santos; Mazzilli, Mariana Ribeiro Farah; São José dos Campos
    Este trabalho descreve a síntese e caracterização de nanopartículas polieletrolíticasde albumina sérica bovina(BSA) para liberação controlada utilizando a ftalocianina de silício di-hidróxido [SiPc(OH)2] como modelo de fotossensibilizador para aplicação em Terapia Fotodinâmica (TFD). As nanopartículas de BSA foram preparadas pelo processo de dessolvatação em um passo e o sistema nanoparticulado foi recoberto com polieletrólitos utilizando o poli-(4-estireno sulfonato de sódio) como um poliânion forte e o hidrocloreto de poli-alilamina como um policátion fraco pela técnica de automontagemcamada por camada(conhecida como layer-by-layer-LbL). O sistema nanoparticulado funcionalizado com a camada de biofilme polieletrolítico apresentou um diâmetro hidrodinâmico médio de volume de 226,9 ± 88,74 nmcom índice de polidispersividade de 0,153. Amudança do potencial zeta indica alternância bem-sucedida na deposição do policátion PAH e do poliânion diretamente nas nanopartículas de BSA. A investigação de liberação de drogas in vitroconstatou que a bicamada de polieletrólito depositada via LbL é muito eficiente na redução da taxa de liberação inicial (burstinicial) para os medicamentos carregados nas nanopartículas de BSA. A atividade fotobiológica para o sistema nanoparticuladofoi avaliada em linhagem celular de melanoma murinho de camundongo (B-16). Os estudo in vitromostraram que o sistema não é citotóxico no escuro, mas exibe uma fototoxicidade substancial quando combinadosna proporção de1,2mol.L-1de fotossensibilizadorencapsulado e 10,0 J.cm-2de luz. Estas condiçõessão suficientes para matar cerca de 90% das células. Os resultados demonstram que a adsorção do fotossensibilizador nas nanopartículas de BSA juntamente com a montagem camada a camada de polieletrólitosfornece uma forma de fabricação de materiais nanoestruturados biocompatíveis,que visam a sua utilização como biomaterial para aplicação em Terapia Fotodinâmicae visandocontribuir para o aprimoramento tecnológico e científico do país em área inovadora e com potencial elevado de impacto social.
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    Synthesis and characterization of photosensitive gelatin-based hydrogels for photodynamic therapy in HeLa-CCL2 cell line
    (Elsevier) Ambrósio, Jéssica Aparecida Ribeiro; Pinto, Bruna Cristina dos Santos; Marmo, Vitor Luca Moura; Santos, Kennedy Wallace dos; Beltrame Junior, Milton; Pinto, Juliana Guerra; Ferreira-Strixino, Juliana; Raniero, Leandro José; Simioni, Andreza Ribeiro
    Background: Hydrogel systems are increasingly gaining visibility involving biomedicine, tissue engineering, environmental treatments, and drug delivery systems. These systems have a three-dimensional network composition and high-water absorption capacity, are biocompatible, allowing them to become an option as photosensitizer carriers (PS) for applications in Photodynamic Therapy (PDT) protocols. Methods: A nanohydrogel system (NAHI), encapsulated with chloroaluminium phthalocyanine (ClAlPc) was synthesized for drug delivery.. NAHI was synthesized using gelatin as based polymer by the chemical cross-linking technique. The drug was encapsulated by immersing the hydrogel in a 1.0 mg.mL􀀀 1 ClAlPc solution. The external morphology of NAHI was examined by scanning electron microscopy (SEM). The degree of swelling of the synthesized system was evaluated to determine the water absorption potential. The produced nanohydrogel system was characterized by photochemical, photophysical and photobiologial studies. Results: The images from the SEM analysis showed the presence of three-dimensional networks in the formulation. The swelling test demonstrated that the nanohydrogel freeze-drying process increases its water holding capacity. All spectroscopic results showed excellent photophysical parameters of the drug studied when served in the NAHI system. The incorporation efficiency was 70%. The results of trypan blue exclusion test have shown significant reduction (p < 0.05) in the cell viability for all groups treated with PDT, in all concentrations tested. In HeLa cells, PDT mediated by 0,5 mg.mL􀀀 1 ClAlPc encapsulated in NAHI showed a decrease in survival close to 95%. In the internalization cell study was possible to observe the internalization of phthalocyanine after one hour of incubation, at 37 ◦C, with the the accumulation of PS in the cytoplasm and inside the nucleus at both concentrations tested. Conclusions: Given the peculiar performance of the selected system, the resulting nanohydrogel is a versatile platform and display potential applications as controlled delivery systems of photosensitizer for photodynamic therapy application.
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    Avaliação da Curcumina na terapia fotodinâmica sobre biofilme de Staphylococcus Aureus resistente à Meticilina: estudo in vitro
    (2021-10-05) Ferreira-Strixino, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Simioni, Andreza Ribeiro; Junqueira, Juliana Campos; Ribeiro, Isabelle de Paula; Pinto, Juliana Guerra; São José dos Campos
    O aumento do número de bactérias multirresistentes aos antibióticos em ambientes de prestação de serviços à saúde vem se tornando um problema global de saúde pública. Os biofilmes são estruturas que conferem às bactérias uma maior resistência antimicrobiana. Por isso, os estudos com biofilmes bacterianos tornaram-se objeto de extrema relevância, uma vez que essas estruturas reduzem a penetração dos antibióticos, comprometendo a resposta imunológica do hospedeiro. A terapia fotodinâmica (TFD) é um tratamento que que combina a luz, uma substância fotossensível (FS) e o oxigênio molecular, gerando espécies reativas de oxigênio, levando à morte celular, surge como uma alternativa na inativação desses microrganismos. O objetivo deste trabalho foi avaliar, em estudo in vitro, a ação antimicrobiana da TFD, mediada pela curcumina (Curcuma Longa), em biofilme de cepa Staphylococcus aureus, resistentes à Meticilina (MRSA). Os grupos experimentais foram divididos em Controle, Controle Escuro, Fotossensibilizador (FS), Irradiado (claro), TFD. Os grupos FS e TFD foram incubados com curcumina durante 20 minutos. Em seguida, o grupo TFD foi irradiado utilizando dispositivo de LED em 450 nm, com irradiância de 110 mW/cm2 e fluência de 50 J/cm2. Foram avaliadas a internalização do FS por microscopia confocal, as unidades formadoras de colônia (UFC), a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), o metabolismo bacteriano por meio do Resazurin, a estrutura do biofilme por microscopia eletrônica de varredura (MEV), antes e após a PDT. Os resultados demonstraram que a TFD mediada pela curcumina foi capaz de reduzir o crescimento de biofilme de cepa MRSA, alterar a atividade metabólica e aumentar a produção de ERO. Pela microscopia confocal foi observada a presença da curcumina no biofilme e o MEV demonstrou que a estrutura do biofilme foi alterada após TFD. O estudo mostrou que a TFD é capaz de reduzir o crescimento do biofilme de cepa MRSA, evidenciando a eficácia da curcumina como FS a ser utilizado na TFD
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    Comparação de abordagens terapêuticas para gerenciamento de rosácea: estudo clínico
    (2023-12-13) Ferreira-Strixino, Juliana; Simioni, Andreza Ribeiro; Canevari, Renata de Azevedo; Nicolau, Renata Amadei; Tada, Dayane Batista; Sebbe-Santos, Priscilla Fróes; Menezes, Priscila Fernanda Campos de; São José dos Campos
    A rosácea é uma disfunção estética que apresenta um quadro inflamatório crônico que afeta predominantemente a face. A Terapia Fotodinâmica Tópica (TFD Tópica) combina uma fonte de luz, um fotossensibilizador (FS) e oxigênio molecular presente nos tecidos, gerando uma reação fotoquímica capaz de promover uma destruição tecidual e vascular, levando ao reparo tecidual, estruturando a barreira cutânea comprometida, diminuindo a vascularização excessiva. O procedimento inclui aplicação tópica cosmética de uma substância precursora do FS endógeno, o Ácido-5-aminolevulínico (ALA) e o Metilaminolevulinato (MAL), que são metabolizados no tecido em protoporfirina IX (PpIX). O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da TFD Tópica utilizando-se ALA e MAL a 2% em diferentes grupos associados ao LED âmbar e laser Infravermelho, simultaneamente, para o tratamento de rosácea subtipo I e II. Com aprovação do Parecer Consubstanciado do CEP nº4.539.318, vinte e quatro participantes foram submetidas a três sessões de tratamento, com intervalo de 15 dias entre elas, e avaliação final, 15 dias após a última aplicação. Os parâmetros usados na irradiação, nos grupos TFD Tópica e Fotobiomodulação foram: LED âmbar (590 nm ±10 nm) na fluência de 81 J/cm2 e laser Infravermelho (808 nm ±10 nm) na fluência de 2 J/cm2. No grupo controle foi utilizado cosmético Melan Clean® com aplicações diárias. Foram realizadas análises fotográficas, por fluorescência e termografia. Pode-se inferir que os tratamentos com a aplicação do Melan Clean®, Fotobiomodulação e TFD Tópica, apresentam benefícios no tratamento da rosácea, melhorando o quadro inflamatório e vascular da pele, sendo apresentados pelas análises termográficas e lâmpada de wood. A melhora clínica utilizando TFD Tópica com ALA 2% e MAL 2% associados ao LED âmbar e laser Infravermelho na rosácea é comprovada. Embora a Fotobiomodulação e o Melan Clean®, também tenham apresentado resultados no tratamento da rosácea, a TFD Tópica demonstrou ser uma alternativa melhor para rosácea, uma vez que é capaz de induzir a produção de espécies reativas de oxigênio molecular gerando uma reação fotoquímica que leva a destruição tecidual, favorecendo a melhora da vascularização e gerenciamento da rosácea modulando o processo inflamatório.
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    Comparação dos efeitos do photodithazine, fotoenticine e protoporfirina IX aplicado à terapia fotodinâmica em gliossarcoma
    (2020-03-02) Ferreira-Strixino, Juliana; Nicolau, Renata Amadei; Tada, Dayane Batista; Inada, Natalia Mayumi; Fontana, Letícia Corrêa; Soares, Cristina Pacheco; São José dos Campos
    A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma terapia promissora, que emprega um agente fotossensível (FS), luz e oxigênio molecular, produzindo espécies reativas de oxigênio(ERO’s)com o objetivo de induzir a célula cancerígena à morte, sendo um tratamento de interesse à Tumores Cerebrais. O objetivo desse trabalho foi avaliar a ação da TFD em células de gliossarcoma, utilizando como FS as clorinas russa (Photodithazine -PDZ) e espanhola (Fotoenticine -FTC)e o precursor da protoporfirina IX, ácido aminolevulínico (ALA). Foram realizados testes in vitro, a fonte de luz foi um dispositivo LED (Biopdi/Irrad-Led 660) para as clorinas e um dispositivo LED (Biopdi/Irrad-Led 630) para o ALA. Foram realizados testes de viabilidade celular com células 9L (gliossarcoma) e L929 (fibroblastos), e foi demonstrado que o sucesso da terapia é dependente da concentração do FS utilizado. Para o ALA, o período de incubação mínimo para que haja resposta eficaz, foi o período de 4h. Por meio do teste de internalização das clorinas, foi constatado a presença dos FSs no interior das células após 1h de incubação. Ao se observar os tipos de morte celular induzidos pela TFD com os três FSs, foi demonstrada a prevalência de morte celular por necrose ou apoptose tardia, com ausência de apoptose inicial. Por fim, houve um aumento na produção de ERO’s após a TFD para todos os FSs, porém quando visto o ALA, o tempo de incubação é fator chave para a produção dessas espécies. Entre as clorinas, o PDZ apresentou maior rendimento quântico de oxigênio singleto, sendo considerado o melhor fármaco entre os 3 testados. O PDZ foi utilizado para análise in vivo de acúmulo da clorina em tumores xenográficos induzidos em ratos Fischer, com células 9L.Com 1h observou-se acúmulo do FS no tumor, sendo crescente no tempo de 3h. Além disso, se apresentou um fármaco de fácil transporte via sistêmica ou local. Por fim, foi constatado presença do FS na região do crânio, porém novos estudos devem ser realizados para comprovar sua passagem pela barreira hematoencefálica.