Navegando por Assunto "Engenharia Biomédica"
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Item Análise do potencial protetor da membrana amniótica em modelo experimental de desmielinização in vitro de fatias organotípicas de cérebro de camundongos(2025-02-28) Sant'Anna, Luciana Barros; Arisawa, Emília Angela Lo Schiavo; Silva, Tania Mara; Oliveira, Melissa Guimarães de; São José dos CamposA membrana amniótica (MA) é amplamente reconhecida por suas propriedades regenerativas, anti-inflamatórias e imunomoduladoras, sendo uma alternativa promissora no tratamento de doenças associadas à desmielinização, como a Esclerose Múltipla (EM). A desmielinização é caracterizada pela perda da mielina, estrutura responsável pela condução de impulsos nervosos, comprometendo a funcionalidade neuronal. Neste contexto, este estudo objetivou avaliar a eficácia da MA em proteger o tecido nervoso contra os efeitos desmielinizantes da lisolecitina, utilizando fatias organotípicas de cérebro de camundongos C57BL/6 como modelo experimental in vitro. Para isso, quatro grupos experimentais foram estabelecidos: Controle Sadio/C-S (fatias sadias); Desmielinização/C-DESM (fatias desmielinizadas pela aplicação de lisolecitina); Controle Membrana/C-MA (fatias sadias que receberam apenas MA); e Membrana Desafio Lisolecitina/MA-LISO (fatias que foram recobertas pela MA e submetidas à ação da lisolecitina). As análises incluíram colorações histológicas (Hematoxilina e Eosina, Luxol Fast Blue) para avaliação da integridade estrutural, teste metabólico com TTC para mensurar viabilidade celular, e MEV para avaliação da topografia de superfície tecidual. Os resultados demonstraram que a MA preservou a integridade da mielina e a arquitetura tecidual nas fatias desafiadas pela lisolecitina, enquanto as fatias do grupo C-DESM apresentaram microcavitações, desorganização da arquitetura histológica e perda da distinção entre substância branca e cinzenta. O ensaio TTC mostrou que as fatias protegidas pela MA mantiveram alta atividade metabólica, em contraste com a baixa atividade observada no grupo C-DESM. A análise por MEV reforçou a eficácia da MA, evidenciando a preservação da estrutura tecidual do parênquima cerebral, além de evidências de interação com o tecido que podem estar associados ao seu potencial bioativo. Essas propriedades incluem a modulação do microambiente neural e a liberação de fatores solúveis, que podem contribuir para a manutenção da viabilidade celular e integridade estrutural, mesmo em condições desafiadoras como a exposição à lisolecitina. Conclui-se que a MA atuou como barreira física eficaz contra a desmielinização induzida por lisolecitina, protegendo o tecido cerebral. Além disso, sugere-se que houve possível regeneração tecidual devido às suas propriedades bioativas, que devem ser mais investigadas para potencial aplicação no tratamento de doenças desmielinizantes, como a EM.Item Análise multiescala da fotobiomodulação e membrana amniótica no reparo medular: da preservação da mielina à recuperação cinética(2026-04-24) Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Sant'Anna, Luciana Barros; Vieira, Lúcia; Canevari, Renata de Azevedo; Laranjo, Mafalda; Marcos, Rodrigo Labat; Correia, Débora Campos Chaves; São José dos CamposAs lesões medulares traumáticas (LM) representam uma condição clínica devastadora, com fisiopatologia complexa, que abrange eventos primários e secundários, culminando em déficits neurológicos severos, perdas funcionais permanentes e elevado impacto socioeconômico. Ante a escassez de terapias regenerativas definitivas, esta tese investigou estratégias terapêuticas inovadoras e de baixo custo com foco na fotobiomodulação (PBM) e na aplicação de fragmento da membrana amniótica (MA). O objetivo central foi avaliar e comparar a eficácia dessas terapias, isoladas ou associadas, no reparo de lesões medulares e na recuperação funcional locomotora. Utilizou-se um modelo experimental de lesão medular por contusão em 45 ratos Wistar, distribuídos nos grupos Controle (C), Lesão (L), PBM, MA e PBM+AM, subdivididos em dois tempos experimentais, 7 e 14 dias. A fotobiomodulação foi aplicada usando parâmetros específicos (808 nm, 72 J/cm2, 100 mW, pontual, transcutânea, e em dias alternados), e o fragmento de MA (4 cm²) foi implantado com a face mesenquimal voltada para o tecido neural. Após 7 e 14 dias da lesão medular, realizou-se avaliação multiescala incluindo histomorfometria (Hematoxilina e Eosina e Luxol Fast Blue) para mensuração da área de cavitação e integridade da mielina, além da análise biomecânica da marcha via Força de Reação do Solo (FRS). A análise dos dados demonstrou que, na fase aguda (7 dias), todos os grupos tratados exibiram redução significativa na área de cavitação comparados ao grupo L, com superioridade estatística para a PBM isolada (p<0,05). Na fase subaguda (14 dias), embora as diferenças morfométricas tenham se estabilizado entre os grupos tratados, a análise biomecânica revelou que o grupo PBM+AMII apresentou recuperação funcional significativamente superior ao grupo L (p<0,05). Conclui-se que os protocolos propostos exerceram efeitos neuroprotetores relevantes, distintos e complementares: a fotobiomodulação demonstrou maior eficácia na modulação da fase aguda, enquanto a associação terapêutica mostrou-se fundamental para a otimização da recuperação funcional a longo prazo.Item Analysis of the Sars-cov-2 virus spike protein in 2D and 3D neuronal models of Alzheimer's disease associated with photobiomodulation treatment(2026-04-17) Soares, Cristina Pacheco; Sant'Anna, Luciana Barros; Ito, Cristiane Yumi Koga; Andrade, Erick José Nogueira de; São José dos CamposAlzheimer's disease (AD) is the leading cause of dementia worldwide, characterized by a complex pathophysiological scenario involving neuroinflammation and intense oxidative stress. At the same time, the COVID-19 pandemic has raised concerns about the neurodegenerative effects of the SARS-CoV-2 spike protein. Considering that oxidative stress is a central mechanism shared by both AD and the sequelae of COVID-19, this work used hydrogen peroxide (H2O2) as an experimental model of oxidative insult. The objective was to investigate how the spike protein enhances cellular damage and to evaluate the neuroprotective potential of photobiomodulation (PBM) with red LED (660 nm) in these contexts. For this, SHSY5Y cells differentiated into two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) neuronal models were used. The cells were exposed to recombinant spike protein (0.5 µg/mL) and H2O2 (200 µM), either individually or in combination, to simulate an aggravated toxicity environment. Cell viability and metabolism were monitored using the Alamar Blue assay and flow cytometry (Live/Dead). Confocal microscopy analyses allowed for the evaluation of nuclear (Hoechst), mitochondrial (MitoTracker), cytoskeletal (rhodamine-phalloidin), and focal adhesion (FAK) integrity. Additionally, a model of neuronal spheroids (3D) was standardized to mimic a more physiologically relevant microenvironment. The results in the 2D model indicated that the spike protein and H2O2 significantly reduced cell viability, with intensified cytotoxic effects upon co-exposure. In contrast, the 3D model exhibited an adaptive response, maintaining viability and increasing metabolic activity, suggesting that tissue architecture modulates neuronal resilience. PBM (3 J/cm²) proved effective in preserving mitochondrial and structural morphology, reducing apoptosis both under basal conditions and oxidative stress, especially in the 3D model. Together, the data reinforce that the Spike protein exerts distinct effects depending on the cellular model and highlight PBM as a promising therapeutic strategy to mitigate oxidative stress and preserve neuronal function in neurodegenerative pathologies and viral sequelae.Item Associação de microesferas de hidroxiapatita com hidrogel polimérico para aplicação em Terapia Fotodinâmica(2026-04-23) Simioni, Andreza Ribeiro; Pacheco-Soares, Cristina; Castilho, Maiara Lima; Moura, Marigilson Pontes de Siqueira; Primo, Fernando Lucas; Ambrósio, Jéssica Aparecida Ribeiro; Ferreira-Strixino, Juliana; São José dos CamposA hidroxiapatita (HAp) é uma cerâmica que apresenta semelhanças com a estrutura óssea humana, biocompatibilidade e bioatividade, além de capacidade de remodelação (em nanoescala). Os hidrogéis apresentam a propriedade de intumescimento, resultante de ligações cruzadas estruturais do polímero (ou biopolímero). A combinação destes dois sistemas configura uma alternativa de sistema de liberação controlada (Drug Delivery Systems – DDS), promissor para o uso em tratamentos envolvendo a terapia fotodinâmica (TFD). O objetivo do trabalho foi a síntese de microesferas de hidroxiapatita (meHAp), o encapsulamento com Cloro Alumínio Ftalocianina (ClAlPc), a síntese de um sistema hidrogel de álcool polivinilico (PVA)/Gelatina e o encapsulamento com a ClAlPc e os derivados da meHAp. As caracterizações realizadas foram: microscopia eletrônica de Varredura (MEV), espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), espectroscopia RAMAN, difratometria de raios-X (DRX), espectroscopia no Uv-Visível, Termogravimetria (TGA) e calorimetria exploratória diferencial (DSC), grau de intumescimento (%GI) e estudos in vitro em culturas de gliosarcoma e melanoma (apenas para o hidrogel). As formulações de meHAp apresentaram formato esférico, bandas características do sistema nas análises de FTIR e RAMAN. A técnica de DRX permitiu a comparação com fichas de HAp correspondentes. As meHAp apresentaram comportamento térmico condizente com a literatura. Os estudos espectroscópicos não apontaram alteração no perfil espectral da ClAlPc quando encapsulada. As meHApClAlPc foram internalizadas pelas células de gliosarcoma 9L/lacZ e apresentaram redução da viabilidade em mais de 98%. Os hidrogeís sintetizados apresentaram morfologia em rede tridimensional, comportamento térmico condizente com a literatura, picos condizentes com os componentes base no FTIR e grau de intumescimento médio de 5- 613%. Os resultados do UV- Visível confirmaram que não houve alteração no perfil da ClAlPc quando encapsulada e permitiram a avaliação do perfil de liberação dos sistemas (45% - hidrogel meHApClAlPc e de 94% hidrogel ClAlPc). Nas células 9L/lacZ o hidrogel apresentou redução média de 97% na viabilidade. Já para a cultura de melanoma a redução média de 96%. Os resultados reiteram a eficácia do sistema desenvolvido, destacando que a incorporação de microesferas de hidroxiapatita no hidrogel permitiu uma redução de 20 vezes na concentração mínima necessária do fotossensibilizador para alcançar o efeito fotodinâmico desejado. Essa potencialização da atividade antitumoral posiciona a formulação como uma alternativa altamente eficiente e menos invasiva para o tratamento de linhagens neoplásicas. Com base nos resultados obtidos espera-se que os sistemas sintetizados possam ser utilizados como modelo para novos DDS e contribuam para o tratamento de diversas neoplasias, destacando o potencial terapêutico, redução de toxicidade e inovação estrutural do sistema proposto.Item Avaliação da ação antimicrobiana da água ativada por plasma sobre membrana amniótica(2023-03-07) Almeida, Felipe Santos de; Sant'Anna, Luciana Barros; Ferreira-Strixino, Juliana; Doria, Anelise Cristina Osório César; Pessoa, Rodrigo Sávio; São José dos CamposO potencial de utilização da Membrana Amniótica (MA) em diferentes aplicações tem sido amplamente estudado, e a necessidade de garantir a esterilidade desse material é essencial para o seu uso. Por causa do aumento da resistência bacteriana é importante a pesquisa de novas técnicas de esterilização, sendo o uso de água ativada por plasma (PAW) uma alternativa, que consiste em uma técnica onde se aplica o plasma elétrico na água a fim de funcionalizá-la, eliminando assim os pontos negativos do uso direto do plasma, como a temperatura. O objetivo do trabalho foi analisar a ação antimicrobiana da água de osmose reversa (OR) ativada por plasma, sobre Membrana Amniótica contaminada com cepa padrão ATCC® de Escherichia coli (25922), Klebsiella pneumoniae (13883), e Staphylococcus aureus (6538). A MA foi contaminada por um inóculo a 1x106 UFC/mL em salina, que ficou em contato por 3 min, após esse período a PAW foi colocada em contato com a MA por 90 min. Para a ativação da água foi utilizado o plasma, gliding arc de Argônio e ar comprimido com um tempo de ativação de 30 min, estudando a viabilidade celular após a exposição das amostras da Membrana Amniótica à ação da PAW. Os principais resultados obtidos foi a viabilidade celular de 11% com a PAW refrigerada e 15% com a PAW ambiente para a K. pneumoniae, 9% com a PAW refrigerada e 13% com a PAW ambiente para o S. aureus e 10% com a PAW refrigerada e 14% com a PAW ambiente para a E. coli, observando uma melhor ação antimicrobiana da PAW refrigerada. Foi observado uma maior redução das UFC quando utilizado a PAW refrigerada + MA e uma redução do pH de 7,04 para 3,41 da PAW refrigerada e uma redução de 7,05 para 3,61 com a PAW ambiente. A utilização da MA + PAW apresentou um melhor resultado do que utilizando apenas a PAW e a MA. Assim, conclui-se que as PAWs possuem uma ação antimicrobiana significativa, porém não o suficiente para realizar a esterilização da MA.Item Avaliação dos Efeitos da Fotobiomodulação com LEDs de Diferentes Comprimentos de Onda em Fibroblastos In Vitro(2025-11-26) Pinto, Juliana Guerra; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Soares, Cristina Pacheco; Nicolau, Renata Amadei; Santos, Emília Pio Ferrari dos; Ferreira, Juliana; São José dos CamposA fotobiomodulação (FBM) é uma terapia não invasiva que utiliza luz em diferentes comprimentos de onda para modular processos celulares e estimular a regeneração tecidual. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da irradiação com LED em fibroblastos L929 cultivados in vitro, empregando os comprimentos de onda de 420, 450, 530, 590 e 630 nm, todos aplicados com fluência padronizada de 5 J/cm². As análises incluíram viabilidade celular (azul de Trypan), atividade metabólica (ensaio de MTT), morfologia (Giemsa) e perfil bioquímico (FTIR-ATR), com tratamento estatístico por ANOVA/Tukey (p < 0,05). Os tempos de irradiação variaram conforme o diodo emissor: 420 nm (114 s; 43,7 mW/cm²), 450 nm (149 s; 33,6 mW/cm²), 530 nm (60 s; 83,3 mW/cm²), 590 nm (333 s; 15 mW/cm²) e 630 nm (129 s; 38,6 mW/cm²). Os resultados indicaram respostas distintas conforme o comprimento de onda. O LED de 420 nm reduziu discretamente a atividade metabólica sem comprometer a viabilidade; 450 nm manteve perfil semelhante ao controle, com alterações bioquímicas sutis; 530 nm promoveu aumento significativo da atividade metabólica e padrões compatíveis com estímulo ao reparo celular; 590 nm apresentou efeito inibitório; e 630 nm preservou a viabilidade, com indícios de incremento na síntese proteica. Conclui-se que a resposta dos fibroblastos à FBM é dependente do comprimento de onda e da parametrização utilizada, reforçando a importância da padronização dos parâmetros de irradiação para alcançar efeitos terapêuticos desejáveis sem comprometer a integridade celular. Os achados contribuem para o entendimento dos mecanismos celulares da fotobiomodulação e fornecem suporte para sua aplicação segura e eficaz em protocolos clínicos, especialmente na dermatologia regenerativa.Item Caracterização das porções cranial e caudal de lesões medulares tratadas com fotobiomodulação por Espectroscopia Raman por transformada de Fourier(2026-03-05) Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Lima, Mário Oliveira; Carvalho, Luis Felipe das Chagas e Silva de; Lima, Leonardo Borges de; Raniero, Leandro José; São José dos CamposA lesão medular (LM) é uma condição neurológica grave que compromete a transmissão de impulsos motores e sensitivos pela medula espinhal, resultando em déficits funcionais permanentes, de elevado impacto social e econômico. As terapias atualmente disponíveis são limitadas quanto à capacidade de preservar o microambiente tecidual e promover regeneração neural efetiva. A fotobiomodulação (PBM) tem sido investigada como estratégia terapêutica promissora, baseada na estimulação mitocondrial, promovendo aumento da produção de ATP, modulação inflamatória e estímulo ao reparo tecidual. Paralelamente, a espectroscopia Raman por Transformada de Fourier (FT-Raman) destaca-se como ferramenta analítica sensível para a avaliação de alterações moleculares em tecidos biológicos, permitindo identificar modificações em proteínas, lipídeos e ácidos nucleicos. Este estudo teve como objetivo avaliar, por meio da espectroscopia FT-Raman associada a análises multivariadas (PCA-LDA), o perfil molecular das porções cranial e caudal da lesão medular, em ratos Wistar, submetidos à contusão medular, tratados ou não com PBM (808 nm, 100 mW, 2 J por ponto, por 14 dias, dias alternados). Foram analisadas 20 amostras teciduais, das porções cranial e caudal, com processamento espectral padronizado e aplicação de métodos estatísticos para discriminação dos grupos. Os resultados demonstraram maior capacidade de discriminação molecular na porção cranial, com acurácia global de 77,8% na classificação por LDA, enquanto a porção caudal apresentou menor discriminação (55,6%). As análises espectrais indicaram maior preservação de proteínas estruturais e melhor organização das moléculas dos lipídios no grupo tratado com PBM, especialmente na porção cranial, evidenciando possível efeito neuroprotetor localizado. Conclui-se que a espectroscopia FT-Raman foi eficaz na detecção de alterações bioquímicas decorrentes da LM e na avaliação dos efeitos terapêuticos da PBM. Os achados reforçam o potencial da fotobiomodulação como terapia adjuvante no tratamento da lesão medular e evidenciam a aplicabilidade da análise espectroscópica como ferramenta de monitoramento molecular em modelos experimentais.Item Conversão de câmara climática para uma câmara de refrigeração(2025) Santos, Patricia Marcondes dos; Castro, Pedro Augusto Rodrigues Ribeiro de; São José dos CamposO projeto visa modificar uma câmara climática em uma câmara de resfriamento com atuação dupla, capaz de operar nas faixas de 2 à 8 °C para resfriamento e 20 a 30 ºC para incubação. Esta modificação atenderá à indústria farmacêutica humana e veterinária, realizando estudos de estabilidade exigidos pela ANVISA (RDC 318/19), que envolvem o armazenamento de medicamentos e princípios ativos durante um período estabelecido para gerar evidências sobre a validade dos produtos. Com esta modificação, é possível alcançar flexibilidade e economia, pois um equipamento poderá operar em duas faixas de temperatura, algo que não é oferecido por equipamentos disponíveis no mercado. O retrofit do equipamento fora de operação reduzirá o impacto ambiental e proporcionará economia ao laboratório, podendo substituir duas câmaras distintas.Item Desenvolvimento de um curativo eletrofiado com álcool polivinílico associado à nanoparticulas de prata para tratamento de microorganismos resistentes presentes nas feridas(2025-11-24) Castilho, Maiara Lima; Rebouças, Lara Silva Souza; Vieira, Lúcia; São José dos CamposO surgimento de infecções bacterianas resistentes tem impulsionado o estudo de novas formas de tratamento que sejam mais eficientes, principalmente para pacientes que apresentam alguma comorbidade que torna as infecções mais propensas de acontecer, como é o caso dos diabéticos. Com base nisso, este trabalho descreve a produção de não tecidos à base de álcool polivinílico (PVA) funcionalizados com nanopartículas de prata (AgNPs) e antibiótico, tanto isolados quanto em associação, para avaliação de atividade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus (S. aureus) e Escherichia coli (E. coli). Para o desenvolvimento do não tecido foram realizados ensaios de halo de inibição para definição das concentrações que foram incorporadas nas formulações para eletrofiação, e o produto final foi caracterizado por MEV, EDS, UV-vis e FTIR, comprovando integridade química e física, que houve interação entre os componentes e mostrando que as AgNPs usadas tinham em média 77,7nm de tamanho, ficando aderidas entre as fibras do não tecido que tem um tamanho médio de 384,3nm. Os testes de efetividade do não tecido evidenciaram ausência de inibição do PVA puro, atividade moderada com PVA+AgNPs com a formação de halo de 5,95mm na S. aureus e 5,47mm na E. coli e quando testado o não tecido de PVA+antibiótico houve a formação de halo de 16,06mm na S. aureus e 8,96mm na E. coli) e efeito sinérgico proeminente na combinação dos agentes (formando halos de 20,52mm na S.s aureus e 15,64mm na E. coli). Análises estatísticas das medidas de halo (média ± desviopadrão) reforçam a consistência e reprodutibilidade dos dados. O estudo demonstra que a combinação de AgNPs e antibiótico em matriz de PVA representa uma estratégia promissora para aplicações médicas que exigem liberação controlada e eficácia antimicrobiana otimizada.Item Desenvolvimento de uma ferramenta de aprendizado de máquina para apoio a detecção de câncer de mama(2025) Castilho, Maiara Lima; Marques, Luiz Henrique Pinto; Lopes, Filipe Loyola; São José dos CamposO câncer de mama é um dos tumores mais comuns entre mulheres, causando grande impacto social e demandando estratégias eficazes para a detecção precoce. Diante disso, este trabalho propõe o desenvolvimento de uma ferramenta baseada em redes neurais convolucionais (CNN) para auxiliar na detecção precoce do câncer de mama, a partir de imagens de ultrassom, com a integração de técnicas de aprendizado profundo com um protótipo full-stack. Ao todo foram utilizados nove bancos de dados, totalizando 8.474 imagens de ultrassonografia categorizadas em benigno, maligno e normal. Para o balanceamento das três classes, foi aplicado a técnica de oversampling com a aumentação de dados, resultando em 4.212 imagens por classe e um total de 12.636 imagens. O pré-processamento das imagens incluiu a padronização para o formato PNG, normalização dos pixels e redimensionamento para 128×128 pixels. A rede neural foi treinada com divisão estratificada dos dados (76% treino, 12% validação, 12% teste) e avaliada pelas métricas de avaliação (acurácia, precisão, recall, F1-score e curva ROC) alcançando acurácia final de 87%. Além disso, foram empregadas técnicas de inteligência artificial explicável, como Grad-CAM e LIME, que geraram mapas de calor para permitir a interpretação das decisões do modelo, destacando regiões relevantes nas imagens. Por fim, a ferramenta foi implementada com backend em FastAPI para processamento de imagens via REST API e frontend em Tkinter para interface gráfica, possibilitando o upload das imagens e a visualização dos resultados com mapas de calor interpretativos.Item Desenvolvimento e caracterização de membrana híbrida composta por membrana amniótica e nanofibras de policaprolactona para terapia regenerativa(2026-04-08) Sant'Anna, Luciana Barros; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Vasconcellos, Luana Marotta Reis de; Calheiro, Gabriela Antonia Tie; Oliveira, Ivone Regina de; São José dos CamposA membrana amniótica humana (MAh) apresenta propriedades que atendem os principais pilares da engenharia de tecidos: células, estrutura e fatores de crescimento. Nesta área, a aplicação da MAh expandiu-se, mas com limitações devido à sua espessura reduzida e a rápida taxa de degradação comparada a outros scaffolds. Para superar essas limitações e ampliar a aplicabilidade, estratégias vêm sendo propostas para criação de biomateriais híbridos derivados de MAh. Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver uma membrana híbrida composta de multicamadas de MAh combinadas por eletrofiação de fibras ultrafinas de policaprolactona (PCL) para uso na terapia regenerativa. Para isso, foram coletadas 7 placentas, a MAh foi processada sob condições estéreis e dividida em três grupos experimentais: controle (MAh-C), descelularizada (MAh-D) e membrana híbrida com policaprolactona (MAh-PCL). O grupo MAh-C, correspondeu a MAh in natura criopreservada a -80°C em solução de DMEM/glicerol; o grupo MAh-D foi composto pela membrana descelularizada por método químico/físico; e o grupo MAh-PCL correspondeu a membrana híbrida de MAh associada a fibras eletrofiadas de PCL. A membrana eletrofiada de policaprolactona sem associação da MAh correspondeu ao grupo PCL controle (PCL-C). Os grupos MAh-C e MAh-D foram avaliados por microscopia óptica pela coloração de Hematoxilina e Eosina (HE) e teste de viabilidade celular (MTT) para análise da eficácia do processo de descelularização. O grupo PCL-C foi analisado antes e após a modificação da membrana para a confecção da MAh-PCL. As amostras foram caracterizadas quanto à morfologia superficial por microscopia eletrônica de varredura, composição biomolecular por espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR-ATR), molhabilidade, análise termogravimétrica, degradação in vitro e resistência mecânica nos quatro grupos experimentais. A coloração de HE demonstrou a eficácia do processo de descelularização do grupo MAh-D, com a remoção das células, exposição da membrana basal e preservação das demais estruturas. O ensaio de MTT demonstrou redução significativa da atividade mitocondrial no grupo MAh-D, confirmando a efetividade do protocolo. As eletromicrografias apresentaram a remoção de microvilos e a exposição da membrana basal, além da preservação da arquitetura colágena após a descelularização, assim como do padrão de fibras do grupo PCL-C. A espectroscopia FTIR- ATR, demonstrou preservação da integridade predominantemente proteica da MAh após a descelularização, a adição de novos picos associados à modificação das membranas de PCL, assim como alterações espectrais referentes a integração da MAh-D e da PCL-C modificada na MAh-D. A análise de molhabilidade indicou maior hidrofobicidade da PCL-C em contraste à hidrofilia da MAh-D, enquanto a membrana híbrida apresentou comportamento hidrofílico com menor capacidade de absorção que a MAh-D, mas com maior capacidade que o PCL. Os ensaios térmicos evidenciaram novos eventos de degradação da PCL associados aos grupos funcionais enxertados, os quais também se manifestaram na membrana híbrida. A degradação in vitro mostrou menor perda de massa de MAh-D em relação à MAh-C, aumento da taxa de degradação do PCL após modificação e comportamento intermediário da MAh-PCL entre os grupos controle. A membrana híbrida aumentou a espessura das amostras e mostrou desempenho mecânico melhor que a PCL-C modificada, porém inferior à MAh-D. Os protocolos de descelularização da MAh e de modificação da membrana de PCL foram eficazes, gerando uma membrana híbrida MAh-PCL estável e com potencial uso para terapia regenerativa.Item Efeito sinérgico da fotobiomodulação com LED 660 E 850 nm em células L929 induzidas ao estresse oxidativo com peróxido de hidrogênio(2025-09-09) Soares, Luís Eduardo Silva; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Oliveira, Luciane Dias de; Segismondi, Larissa Cavallieri; Soares, Cristina Pacheco; São José dos CamposA pele está constantemente exposta a agressões externas, tornando-se um alvo para a geração excessiva de espécies reativas de oxigênio (ROS), que induzem danos oxidativos principalmente na região dérmica. A fotobiomodulação (FBM) mostra-se uma terapia eficiente para biomodulação de sistemas biológicos, capaz de modular processos oxidativos e inflamatórios. No presente estudo, buscou-se elucidar o possível efeito fotoprotetor in vitro da aplicação simultânea da FBM com LED 660 e 850 nm em células fibroblásticas L929 diante do tratamento com peróxido de hidrogênio como modelo de estresse oxidativo. Os fibroblastos foram pré-irradiados com LED e em seguida incubados com 200 µM de H2O2 diluído em meio de cultura pelo período de 3 horas. Após 24 horas dos tratamentos, foram observadas alterações quanto à atividade mitocondrial pelo ensaio colorimétrico Alamar Blue e quanto à morfologia celular por microscopia invertida. Também foi realizada a marcação de mitocôndrias e núcleos em células vivas por fluorescência utilizando Tetrametilrodamina (TMRM) e Tricloridrato de bisbenzimida (HOESCHT), além da detecção de ROS por fluorescência utilizando CellRox Orange. Os resultados obtidos indicam que o pré-tratamento com LED promove aumento da atividade mitocondrial, do potencial da membrana mitocondrial, redução da geração de ROS intracelular e induz alterações morfológicas nas células. Dessa maneira, conclui-se que o sinergismo entre os LEDs 660 e 850 nm exerce efeito protetor contra a ação do H2O2 em células fibroblásticas L929, demonstrando que a FBM pode ser utilizada para auxiliar a prevenir e mitigar danos oxidativos.Item Fotobiomodulação como terapia adjuvante pós-esternotomias: impacto na analgesia, cicatrização e qualidade de vida(2026-03-05) Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Lima, Fernanda Pupio Silva; Carvalho, Luis Felipe das Chagas e Silva de; Boy, Lucas da Silva; São José dos CamposA fotobiomodulação (FBM) tem sido investigada como terapia adjuvante no pós- operatório de cirurgias cardíacas devido ao seu potencial de modular a dor, estimular o reparo tecidual e favorecer a recuperação funcional. O presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da FBM na analgesia, no processo de cicatrização da ferida operatória e na qualidade de vida de pacientes submetidos à cirurgia cardíaca. Trata- se de um estudo clínico experimental, prospectivo, de natureza quali-quantitativa, realizado em um hospital do município de São José dos Campos, São Paulo. A amostra foi composta por sete participantes submetidos à cirurgia cardíaca eletiva, alocados em dois grupos: Grupo Controle (GC), submetido ao tratamento convencional, e Grupo Fotobiomodulação (GFBM), submetido ao tratamento convencional associado à aplicação de FBM. Foram realizadas quatro sessões de FBM: no pós-operatório imediato e após 24, 48 e 72 horas da cirurgia. As avaliações clínicas foram realizadas aos 7, 14 e 21 dias de pós-operatório. A intensidade da dor foi avaliada por meio da Escala Visual Analógica (EVA), a evolução da cicatrização pela Pressure Ulcer Scale for Healing (PUSH) e a qualidade de vida pelo Medical Outcomes Study 36-Item Short-Form Health Survey (SF-36). As análises estatísticas foram realizadas no software Statistical Package for the Social Sciences (SPSS), adotando-se nível de significância de 5% (p < 0,05). Observou-se menor intensidade de dor no grupo submetido à FBM em todos os momentos avaliados. Na análise da qualidade de vida, verificou-se melhora dos escores no grupo FBM, com diferença estatisticamente significativa no domínio vitalidade. Em relação à cicatrização, observou-se redução progressiva dos escores da escala PUSH ao longo do acompanhamento em ambos os grupos, com valores inferiores no grupo FBM e diferença significativa no 21º dia de pós-operatório. A análise morfológica das feridas demonstrou epitelização mais precoce, melhor organização tecidual e aspecto estético mais favorável nas lesões tratadas com FBM. Conclui-se que a fotobiomodulação, quando utilizada como terapia adjuvante ao tratamento convencional, apresenta efeitos positivos na modulação da dor, na aceleração do processo cicatricial e na melhora de parâmetros relacionados à qualidade de vida, configurando-se como estratégia terapêutica promissora no pós-operatório de cirurgias cardíacas.Item Fotobiomodulação em células musculares e na articulação glenoumeral em simulação da puxada em técnicas de judô(2023-06-15) Lima, Elessandro Váguino de; Silva, Newton Soares da; Ferreira-Strixino, Juliana; Lima, Mário Oliveira; Franchini, Emerson; Ribeiro, Martha Simões; São José dos Campos,Pesquisas com fotobiomodulação tem apresentado resultados positivos no desempenho muscular, além de modular atividades a nível celular. Os objetivos da pesquisa foram: verificar o comportamento em células musculares C2C12, a partir da irradiaçao com LED; analisar o efeito da fotobiomodulação no torque e na fadiga muscular. Tanto as células musculares quanto o músculo deltoide, foram irradiados com LED Sportllux Advanced Pro, intercalados no comprimento de onda vermelho (660±20nm) infravermelho (850±20nm), simultaneamente. O tempo de exposição à irradiação foi de 600s. Para o ensaio de viabilidade as células foram incubadas com 100 ?L de soluomo de Cristal Violeta (CV); a atividade mitocondrial foi avaliada pelo ensaio colorimétrico MTT; o ensaio de fluorescência de núcleo (marcador DAPI) e citoesqueleto (marcador rodamina faloidina) foi realizado para estudar o citoesqueleto com base na alteração nos filamentos de actina. Os resultados da irradiação no estudo in vitro demonstraram: sinergismo da irradiação LED com indução na proliferação de células; efeito significativo (p<0,05) na cultura de células; aumento significativo (p<0,05) na atividade mitocondrial e viabilidade celular. A microscopia de fluorescência apresentou alinhamento dos componentes do citoesqueleto das células após a irradiação. Para analisar o desempenho muscular no estudo clínico, participaram 14 judocas masculinos. O protocolo consistiu em abdução e adução oblíquoa da articulação glenoumeral no dinamômetro isocinético. Os participantes realizaram 8 séries do movimento com a seguinte dinâmica: uma série de 5 repetições na velocidade angular de 90º/s; 4 séries de 10 repetições na velocidade angular de 240º/s; 3 séries de 5 repetições na velocidade angular de 90º/s. O intervalo de recuperação entre as 7 primeiras séries foi de 10s, e entre a 7ª e a 8ª série de 600s. Os participantes foram submetidos a três condições com intervalo de uma semana entre elas: sem aplicação de LED (No-LED), Grupo Controle; com aplicação de LED desligado (LED-Off), Grupo Placebo; com aplicação de LED ligado (LED-On), Grupo Irradiado. Os atletas foram avaliados quanto à percepção subjetiva de esforço após cada série do protocolo e antes do início da última série do protocolo, quanto à percepção subjetiva de recuperação. O atleta teve sua concentração de lactato dosada em 3 momentos: imediatamente, após 300s e após 600s do término da 7ª série do protocolo. Os resultados apontaram que houve instalação gradual de fadiga entre as séries em sequência, porém sem diferença significativa (p>0,05) entre os grupos com ou sem irradiação; houve aumento gradual da percepção de esforço com a dinâmica entre as séries, porém sem diferença significativa (p>0,05) nas condições com ou sem irradiação entre os grupos; a concentração de lactato aumentou após as 7 séries com relação aos valores de repouso, mas sem apresentar diferença significativa (p>0,05) entre os grupos controle, placebo ou irradiado. A conclusão foi de que houve influência no comportamento das células musculares C2C12 para o estudo in vitro; para o estudo clínico a fotobiomodulação pelo dispositivo LED não apresentou diferença significativa em nenhum dos parâmetros analisados.Item Nanopartículas de óxido de ferro revestidas com curcumina como ferramenta de terapia para o câncer de mama(2025) Raniero, Leandro José; Ferreira, Virginia Rezende; São José dos CamposNeste trabalho, é abordado o câncer de mama, neoplasia de alta incidência e o subtipo triplo negativo (TNBC), particularmente agressivo, como desafios globais na saúde, apresentando a Terapia Fotodinâmica (TFD) como uma alternativa promissora aos tratamentos tradicionais que causam efeitos adversos significativos. Neste estudo, nanopartículas de óxido de ferro (IONPs) foram sintetizadas e revestidas com curcumina (IONPs@curcumina), buscando avaliar o potencial citotóxico e de TFD desse nanocomplexo na linhagem celular MDA-MB-468 (TNBC). A metodologia empregada consistiu na síntese das IONPs por co-precipitação química e posterior revestimento com curcumina, utilizando etanol como solvente mais adequado após testes de solubilidade. O nanocomplexo foi caracterizado por DLS, UV-Visível e FT-IR, e a otimização da estabilidade foi determinada em 1 mmol.L -1 de curcumina e pH 9, condições que resultaram no melhor revestimento e menor diâmetro hidrodinâmico. Os ensaios de citotoxicidade in vitro mostraram que as IONPs@curcumina não são citotóxicas na ausência de luz (viabilidade celular > 70%), mas a TFD induziu morte celular significativa (atividade mitocondrial < 70%) sob irradiação de LED 450 nm. A concentração de 0,5 µg.mL-1 resultou na menor viabilidade celular (41%), confirmando o potencial terapêutico do nanocomplexo e sugerindo a importância de pesquisas futuras que alinhem o comprimento de onda do LED à absorção máxima da curcumina para otimizar a eficácia.Item Seda de Aranha na Cultura 3D: Aplicação da Seda de Trichonephila clavipes como scaffold(2025-10-08) Soares, Cristina Pacheco; Raniero, Leandro José; Ferreira, Juliana; Ramos, Lucas de Paula; Aranha, Guilherme Dias; São José dos CamposOs fios de seda produzidos pelas aranhas são um material que apresenta propriedades únicas como alta elasticidade e resistência a tensão, super-contração, fluorescência, entre outras, sendo então uma fonte de inspiração para a área de pesquisa e desenvolvimento, servindo tanto como matéria prima para trabalhos com o material, como meta para trabalhos que buscam produzir materiais artificiais com propriedades análogas ou superiores. Uma espécie de aranha amplamente utilizada em estudos envolvendo seda é a Trichonephila clavipes, que tece grandes teias orbiculares que apresentam uma coloração dourada e foi escolhida como foco principal deste trabalho. O presente estudo buscou avaliar a utilidade da seda produzida por essas aranhas para aplicação na cultura 3D de células de fibroblasto de camundongo como scaffold natural. Oito espécimes foram coletados da natureza e mantidos em laboratório para obtenção dos fios de seda, que durante o período de manutenção das aranhas, apresentou mudança de coloração de dourado para branco. Foram realizadas análises dos fios por microscopia eletrônica de varredura, EDS, microscopia de fluorescência, DSC e TG para avaliar essa variação. Após isso, células L929 foram cultivadas em meio contendo a seda esfoliada, objetivando a formação de esferoides, que foram avaliados no período de 5 dias e 10 dias para observar o impacto dessa interação. As culturas foram observadas pelos mesmos métodos de microscopia anteriormente aplicados aos fios. Como resultados, foi observada uma afinidade das células com os fragmentos de seda presentes no meio de cultura, com o material não só tendo as células aderidas a ele, mas sendo englobado e até certo ponto sendo absorvido pelos esferoides. Os esferoides, além de se ancorarem a seda, também incorporaram fluoróforos presentes no material, apresentando fluorescência ao serem observados sob o microscópio de fluorescência. Conclui-se que a seda de T. clavipes apresenta potencial como scaffold para a cultura de células bem como capacidade fluorescente que deve ser aplicada dentro da área de cultura de células e na área de engenharia biomédica.Item Síntese e Caracterização de SPIONs@APTES Conjugados com Clorina E6 via Química Carbodiimida para Terapia Fotodinâmica(2025-09-22) Raniero, Leandro José; Soares, Cristina Pacheco; Liu, Andréa Santos; Gonçalves, Giulia Capizzani; São José dos CamposO câncer é uma das principais causas de morte no mundo e continua sendo um grande desafio para os sistemas de saúde, principalmente em países com poucos recursos. Os tratamentos tradicionais, como cirurgia, quimioterapia, radioterapia e terapia hormonal, ainda são amplamente utilizados, mas apresentam limitações importantes, como baixa seletividade e efeitos colaterais severos. Com os avanços no entendimento dos mecanismos do câncer, novas terapias mais específicas e menos agressivas estão sendo desenvolvidas destacando-se a Terapia Fotodinâmica (TFD). Apesar das vantagens, como menor toxicidade e maior precisão, a TFD ainda enfrenta problemas, principalmente relacionados à baixa solubilidade e instabilidade dos fotossensibilizadores. Para minimizar essas limitações, o uso de nanopartículas superparamagnéticas de óxido de ferro (SPIONs) têm se destacado por sua biocompatibilidade, estabilidade, baixo custo e possibilidade de serem modificadas para se ligarem a moléculas específicas. Uma estratégia promissora é a incorporação da Clorina E6 (Ce6) às SPIONs. A Ce6 tem alta eficácia e baixa toxicidade, mas sua baixa solubilidade compromete seu uso. Neste contexto, essa dissertação propõe a síntese e a caracterização de SPIONs pelo método de coprecipitação, a síntese e caracterização de nanossondas funcionalizadas com o fotossensibilizador Ce6 e sua aplicação na TFD. As dimensões das nanoestruturas foram caracterizadas por diâmetro hidrodinâmico, estabilidade coloidal e composição química. Posteriormente foram realizados estudos in vitro para avaliação da atividade antitumoral e toxicológica da TFD na linhagem celular de glioblastoma humano (M059J).Item Terapia fotodinâmica com curcumina nanoencapsulada como fotossensibilizador associada à tetraciclina na inativação do biofilme de staphylococcus aureus resistente à meticilina : estudo in vitro(2025-07-29) Ferreira, Juliana; Soares, Cristina Pacheco; Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Junqueira, Juliana Campos; Azevedo, Maria Clara Barbosa Silva de; Pinto, Juliana Guerra; São José dos CamposStaphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) é uma bactéria Gram-positiva que constitui um dos maiores desafios para a saúde pública global, sendo sua sobrevivência potencialmente aumentada pela formação de biofilme. Isso evidencia a urgência no desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas, como a Terapia Fotodinâmica (TFD). O objetivo do trabalho foi analisar o efeito antimicrobiano da TFD usando a curcumina nanoencapsulada em albumina sérica bovina (BSA), podendo estar associada à tetraciclina, em biofilme de MRSA. A NanoBSA nas formas catiônica e aniônica, foi avaliada nas concentrações de 3,0, 2,0 e 1,0 x 10?6 mol.L?¹, assim como sua associação com tetraciclina (30 µg.mL?¹). A irradiação foi realizada com luz LED azul (450 nm, 93,9 mW/cm², 50 J/cm², 532 segundos). A atividade metabólica foi significativamente reduzida tanto na TFD com antibióticos (ATB) quanto sem antibióticos, contudo, no ensaio de contagem de unidades formadoras de colônias, apenas os grupos tratados com TFD associada à tetraciclina apresentaram inibição do crescimento bacteriano. A concentração de 2,0 x 10?6 mol.L?¹ se destacou como a mais eficaz. A combinação de TFD com antibioticoterapia apresenta potencial terapêutico promissor no tratamento de infecções causadas por S. aureus resistente à meticilina.Item Tratamento de feridas experimentais com aplicação de curativos eletrofiados associados à nanopartículas de prata e plasma não térmico(2025-09-05) Arisawa, Emília Angela Loschiavo; Sant'Anna, Luciana Barros; Lima, Mário Oliveira; Alves, Paulo Jorge Pereira; Contini, Rita de Cássia Mendonça Sales; Alves, Paulo Jorge Pereira; Pereira, Jonalba Mendes; Vieira, Lúcia; São José dos CamposFeridas são definidas como qualquer ruptura na integridade de um tecido que pode atingir a epiderme, a camada superficial, ou estruturas mais profundas, como fáscias, músculos, aponeuroses e órgãos cavitários. Curativos eletrofiados e plasma não térmico se destacam como novas abordagens no tratamento de feridas. Curativos eletrofiados, formados a partir de fibras poliméricas, promovem a regeneração celular, enquanto o plasma não térmico, gerado à temperatura ambiente, apresenta propriedades antimicrobianas e de modulação celular. Este estudo teve como objetivo avaliar o tratamento de feridas experimentais com curativos eletrofiados, isolados ou associados à nanopartículas de prata (Ag) e plasma não térmico (PNT). Trinta e seis ratos foram divididos em seis grupos: Controle (C), Álcool Polivinílico-Ácido Cítrico (PVA-CA), PVA-AC combinado com nanopartículas de prata (PVA-AC+AG), Plasma Não Térmico (PNT) e suas associações: PVA-CA + PNT e PVA-CA + Ag + PNT. Foram realizadas no dorso de cada animal três lesões de 1,9 cm de diâmetro, aos quais foram aplicados os protocolos de tratamento propostos. Análises macroscópicas e microscópicas aos 3, 7 e 14 dias avaliaram o processo de cicatrização. Todos os protocolos de tratamento foram mais eficazes que o grupo C (não tratado). Os melhores resultados das análises macroscópica e histológica foram observados com PNT associado ao curativo PVA-AC, mostrando redução significativa (p<0,05) no tamanho da ferida, aumento da deposição de colágeno e angiogênese e epitelização mais rápidas. O grupo tratado com PVA-AC associado a nanopartículas de prata obteve resultados menos evidentes, com redução da hidratação no processo de cicatrização comparado ao grupo PVA-AC+PNT. A redução da ferida no grupo C (89,7%) foi superada por todos os outros protocolos de tratamento: PVA-AC+PNT (96,6%); PVA-AC (95,9%), PVA-AC+Ag (95,1%) e PNT (91,3%). O estudo demonstrou que a associação de PNT com o curativo eletrofiado com PVA-AC favoreceu a cicatrização da ferida, destacando-se como alternativa promissora para o tratamento de feridas. Os resultados demonstram a eficácia da combinação PNT mais PVA-AC no processo de cicatrização.Item Validação da espectroscopia ATR-FTIR associada ao Machine Learning para identificação de um polimorfismo genético(2026-03-02) Canevari, Renata de Azevedo; Castilho, Maiara Lima; Santos, Laurita dos; Diniz, Ramon Varella; São José dos CamposPolimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) desempenham um papel central na suscetibilidade genética a distúrbios multifatoriais, como obesidade e diabetes mellitus tipo 2 (DM2), o que evidencia a necessidade de estratégias de genotipagem escaláveis e de baixo custo. Este estudo avaliou a viabilidade da espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier por reflexão total atenuada (ATR-FTIR) combinada a machine learning (ML) para discriminar os diferentes tipos de genótipos do SNP -3826A/G localizado no gene UCP1. A genotipagem do SNP foi realizada pela PCR quantitativa em tempo real (qPCR) utilizando ensaios TaqMan em amostras de DNA extraído do sangue de 190 participantes para a definição dos grupos genotípicos (AA, AG e GG). A PCR qualitativa foi realizada em todas as amostras e nos controles negativos de reação (NTCs). Os amplicons da PCR e os NTCs foram utilizados na análise espectral. As análises de componentes principais (PCA), modelos supervisionados de ML e deep learning (DL) foram aplicadas diretamente aos espectros normalizados por Variância Normal Padrão (SNV) nos intervalos espectrais de 2800–3800 cm?¹ , 950–1200 cm?¹ e 900 – 1100 cm?¹ . A viabilidade da técnica de ATR-FTIR associada ao ML foi avaliada por meio da comparação com a qPCR e o sequenciamento de nova geração (NGS), ambas técnicas de genotipagem consideradas atualmente padrão ouro. O melhor desempenho observado na discriminação entre os genótipos AA e GG foi obtido com o modelo de DL de perceptron multicamdas com arquitetura residual simulada na região de 2800–3800 cm?¹, área sob a curva (AUC) de 0,654 e acurácia de 0,716. Nas regiões de fingerprint do DNA de 900–1100 cm?¹ e 950–1200 cm?¹, o melhor desempenho foi observado com o modelo de regressão logística, com AUC de 0,635 e 0,644 e acurácia de 0,696 e 0,720, respectivamente. A técnica de ATR-FTIR associada ao ML apresentou melhor viabilidade de execução em relação as técnicas de sequenciamento e qPCR, com um tempo de processamento por amostra similar a qPCR e menor que o NGS e um custo inferior a ambas as técnicas. Este estudo é pioneiro na aplicação da espectroscopia ATR-FTIR associada ao ML na discriminação de SNPs do genoma humano, mostrando ser uma abordagem com um alto potencial de rastreamento, relativamente rápida e de baixo custo. O estabelecimento de novos critérios e modelos de ML poderão aumentar significativamente o desempenho da técnica na identificação desses polimorfismos genéticos.