O uso da inativação fotodinâmica como alternativa para descontaminação de fragmentos de pele destinados a transplantes: modelo experimental em pele de suínos
| dc.contributor.advisor | Martins, Rodrigo Álvaro Brandão Lopes | |
| dc.contributor.author | Araújo, Dhenise Mikaelly Meneses de | |
| dc.contributor.event2 | São José dos Campos | |
| dc.contributor.referee | Lima, Fernanda Pupio Silva | |
| dc.contributor.referee | Ribeiro, Martha Simões | |
| dc.contributor.referee | Núñez, Silvia Cristina | |
| dc.date.accessioned | 2025-01-27T14:09:36Z | |
| dc.date.available | 2025-01-27T14:09:36Z | |
| dc.date.issued | 2020-11-13 | |
| dc.description.abstract | A cobertura temporária por pele biológica ou sintética é importante para a cura completa e mais rápida de queimaduras e outros defeitos de pele. Atualmente é utilizada a radioesterilização para garantir a qualidade dos tecidos usados em transplantes e outras aplicações clínicas. Alterações morfológicas e funcionais no tecido podem ser devido à absorção da energia ionizante liberada durante a radiação, além de acarretar danos ao profissional habilitado, como também o alto custo empregado nessa técnica. Diferentemente a inativação fotodinâmica mostra evidências de ser viável, tem baixo custo e com danos mínimos à saúde do profissional que está operando. Então levantamos a questão, a utilização da inativação fotodinâmica pode ser uma alternativa em banco de tecidos para descontaminação de pele? A inativação fotodinâmica é uma abordagem multifatorial que envolve três componentes principais, fotossensibilizador, luz e oxigênio, e tem sido utilizada como um método alternativo para erradicar microrganismos patogênicos, como bactérias e fungos. Este estudo tem por objetivo avaliar os efeitos da inativação fotodinâmica na pele suína, visando o seu uso para descontaminação da pele destinadas a transplantes. Foram utilizados umtotalde47 fragmentos de pele suína com dimensões de tamanho 1x1 cm, provenientes da região da orelha do suíno. Foi realizado o experimento em duas etapas, sendo diluído o azul de metileno na água destilada estéril a partir de 10 milimolar para concentração de 50, 75 e 100 micromolar na primeira etapa e 12,5 e 25 micromolar na segunda etapa. As placas tiveram um tempo de pré-irradiaçãode 20 minuto. Para este trabalho foi utilizado o equipamento LEDbox, emitindo660nm. As placas foram expostas à radiação durante um período de 20 minutos. Foi adotada a diluição seriada de 1:10 e o método de escorrimento na placa conforme adaptação da metodologia de Tippelskircha et al. (2018). Após 24 h de incubação, as placas foram retiradas da incubadora para fazer a contagem das unidades formadoras de colônias. Para a análise morfológica foi utilizada a tomografia por coerência óptica. Os resultados obtidos apontam que os grupos das concentrações de azul de metileno de 12,5 e 25 µM são estatisticamente diferentes (p<0,05), do grupos das concentrações de 75 e 100 µM, sendo os grupos das concentrações de 12,5 e 25 µM apresentaram-se uma maior eficácia na redução das UFCs. As imagens da tomografia de coerência óptica mostraram que é possível observar a camada do epitélio nos diferentes grupos, sem alteração ou deformação em comparação com a pele do grupo controle. A literatura apresenta poucos estudos voltados na área e com isso houve uma dificuldade maior e limitação no desenvolvimento da metodologia. Os resultados obtidos são conflitantes, pois demonstram o potencial da inativação fotodinâmica e do azul de metileno isolado, para a descontaminação da pele, embora haja a necessidade de mais ensaios laboratoriais para desempenhar uma maior inativação dos microrganismos na pele. É um estudo inovador, teve como objetivo estabelecer um modelo de protocolo de baixo custo para investigação de descontaminação da pele com o uso da inativação fotodinâmica em modelo animal. A metodologia foi bem definida e detalhada, sendo possível a repetição de mais testes, e foi alcançado objetivo de estabelecer um modelo de procedimento operacional padrão para a realização de descontaminação da pele. | |
| dc.description.abstract2 | Temporary coverage by biological or synthetic skin is important for the complete and faster healing of burns and other skin defects. Currently, radio-sterilization is used to ensure the quality of tissues used in transplants and other clinical applications. Morphological and functional changes in the tissue may be due to the absorption of ionizing energy released during radiation, in addition to causing damage to the qualified professional, as well as the high cost employed in this technique. In contrast, photodynamic inactivation shows evidence of being viable, has low cost and has minimal damage to the health of the professional who is operating. So we raised the question, can the use of photodynamic inactivation be an alternative in a tissue bank for skindecontamination? Photodynamic inactivation is a multifactorial approach that involves three main components, photosensitizer, light and oxygen, and has been used as an alternative method to eradicate pathogenic microorganisms, such as bacteria and fungi. This study aims to evaluate the effects of photodynamic inactivation on swine skin, aiming at its use for skin decontamination for transplantation. A total of 47 porcine skin fragments with dimensions of 1x1 cm were used, from the region of the pig's ear. The experiment was carried out in two stages, with methylene blue diluted in sterile distilled water from 10 millimolar to a concentration of 50, 75 and 100 micromolar in the first stage and 12.5 and 25 micromolar in the second stage. The plates had a pre-irradiation time of 20 minutes. For this work, the LEDbox equipment, emitting 660 nm, was used. The plates were exposed to radiation for a period of 20 minutes. The serial dilution of 1:10 was adopted and the method of draining on the plate as adapted fromthe methodology of Tippelskircha et al. (2018). After 24 h of incubation, the plates were removed from the incubator to count the colony-forming units. Optical coherence tomography was used for morphological analysis. The results obtained show that the groups of concentrations of methylene blue of 12.5 and 25 µM are statistically different (p <0.05), from the groups of concentrations of 75 and 100 µM, being the groups of concentrations of 12.5 and 25 µM were more effective in reducing CFUs. The optical coherence tomography images showed that it is possible to observe the epithelium layer in the different groups, without alteration or deformation in comparison with the skin of the control group. The literature presents few studies focused on the area and with that there was a greater difficulty and limitation in the development of the methodology. The results obtained are conflicting, as they demonstrate the potential of photodynamic inactivation and isolated methylene blue, for skin decontamination, althoughthere is a need for more laboratory tests to perform a greater inactivation of microorganisms in the skin. It is an innovative study, aimed at establishing a low-cost protocol model for investigating skin decontamination with the use of photodynamic inactivation in an animal model. The methodology was well defined and detailed, making it possible to repeat more tests, and the objective was achieved to establish a standard operating procedure model for performing skin decontamination. | |
| dc.description.physical | 76 f. | |
| dc.description.sponsorship | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) | |
| dc.format.mimetype | ||
| dc.identifier.affiliation | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.identifier.bibliographicCitation2 | ARAÚJO, Dhenise Mikaelly Meneses de. O uso da inativação fotodinâmica como alternativa para descontaminação de fragmentos de pele destinados a transplantes: modelo experimental em pele de suínos. São José dos Campos, 2020. 77 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Biomédica) - Universidade do Vale do Paraíba, Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento, São José dos Campos, 2020. | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.univap.br/handle/123456789/519 | |
| dc.language.iso | pt_BR | |
| dc.publisher.country | Brasil | |
| dc.publisher.initials | UNIVAP | |
| dc.publisher.institution | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.publisher.program | Mestrado em Engenharia Biomédica | |
| dc.publisher.spatial | São José dos Campos | |
| dc.subject.keyword | Fotoquimioterapia | |
| dc.subject.keyword | Microbiologia | |
| dc.title | O uso da inativação fotodinâmica como alternativa para descontaminação de fragmentos de pele destinados a transplantes: modelo experimental em pele de suínos | |
| dc.title.alternative | The use of photodynamic inactivation as an alternative for decontamination of skin fragments intended for transplants: experimental model in swine skin | |
| dc.type | Dissertação | |
| dc.type.masterDegree | Acadêmico |