Análise do potencial protetor da membrana amniótica em modelo experimental de desmielinização in vitro de fatias organotípicas de cérebro de camundongos
| dc.contributor.advisor | Sant'Anna, Luciana Barros | |
| dc.contributor.author | Oliveira, Melissa Guimarães de | |
| dc.contributor.event2 | São José dos Campos | |
| dc.contributor.referee | Arisawa, Emília Angela Lo Schiavo | |
| dc.contributor.referee | Silva, Tania Mara | |
| dc.date.accessioned | 2025-05-27T18:02:21Z | |
| dc.date.available | 2025-05-27T18:02:21Z | |
| dc.date.issued | 2025-02-28 | |
| dc.description.abstract | A membrana amniótica (MA) é amplamente reconhecida por suas propriedades regenerativas, anti-inflamatórias e imunomoduladoras, sendo uma alternativa promissora no tratamento de doenças associadas à desmielinização, como a Esclerose Múltipla (EM). A desmielinização é caracterizada pela perda da mielina, estrutura responsável pela condução de impulsos nervosos, comprometendo a funcionalidade neuronal. Neste contexto, este estudo objetivou avaliar a eficácia da MA em proteger o tecido nervoso contra os efeitos desmielinizantes da lisolecitina, utilizando fatias organotípicas de cérebro de camundongos C57BL/6 como modelo experimental in vitro. Para isso, quatro grupos experimentais foram estabelecidos: Controle Sadio/C-S (fatias sadias); Desmielinização/C-DESM (fatias desmielinizadas pela aplicação de lisolecitina); Controle Membrana/C-MA (fatias sadias que receberam apenas MA); e Membrana Desafio Lisolecitina/MA-LISO (fatias que foram recobertas pela MA e submetidas à ação da lisolecitina). As análises incluíram colorações histológicas (Hematoxilina e Eosina, Luxol Fast Blue) para avaliação da integridade estrutural, teste metabólico com TTC para mensurar viabilidade celular, e MEV para avaliação da topografia de superfície tecidual. Os resultados demonstraram que a MA preservou a integridade da mielina e a arquitetura tecidual nas fatias desafiadas pela lisolecitina, enquanto as fatias do grupo C-DESM apresentaram microcavitações, desorganização da arquitetura histológica e perda da distinção entre substância branca e cinzenta. O ensaio TTC mostrou que as fatias protegidas pela MA mantiveram alta atividade metabólica, em contraste com a baixa atividade observada no grupo C-DESM. A análise por MEV reforçou a eficácia da MA, evidenciando a preservação da estrutura tecidual do parênquima cerebral, além de evidências de interação com o tecido que podem estar associados ao seu potencial bioativo. Essas propriedades incluem a modulação do microambiente neural e a liberação de fatores solúveis, que podem contribuir para a manutenção da viabilidade celular e integridade estrutural, mesmo em condições desafiadoras como a exposição à lisolecitina. Conclui-se que a MA atuou como barreira física eficaz contra a desmielinização induzida por lisolecitina, protegendo o tecido cerebral. Além disso, sugere-se que houve possível regeneração tecidual devido às suas propriedades bioativas, que devem ser mais investigadas para potencial aplicação no tratamento de doenças desmielinizantes, como a EM. | |
| dc.description.abstract2 | The amniotic membrane (AM) is widely recognized for its regenerative, anti- inflammatory, and immunomodulatory properties, making it a promising alternative for treating demyelination-associated diseases, such as Multiple Sclerosis (MS). Demyelination is characterized by the loss of myelin, a structure responsible for the conduction of nerve impulses, leading to impaired neuronal functionality. In this context, this study aimed to evaluate the efficacy of MA in protecting nervous tissue against the demyelinating effects of lysolecithin, using organotypic brain slices from C57BL/6 mice as an in vitro experimental model. Four experimental groups were established: Healthy Control/C-H (intact slices); Demyelination (demyelinated slices by application of lysolecithin); Membrane Control/C-AM (healthy slices treated only with AM); and AM Challenge Lysolecithin/AM-LPC (AM-protected slices before lysolecithin application). The analyses included histological staining (Hematoxylin and Eosin, Luxol Fast Blue) to assess structural integrity, a metabolic assay with 2,3,5- triphenyltetrazolium chloride (TTC) to measure cell viability, and scanning electron microscopy (SEM) to evaluate tissue surface topography. The results demonstrated that the amniotic membrane (AM) preserved myelin integrity and tissue architecture in slices challenged with lysolecithin. In contrast, slices in the Demyelination group exhibited microcavities, disorganization of histological architecture, and loss of distinction between white and gray matter. The TTC assay revealed that slices protected by the AM maintained high metabolic activity, in contrast to the reduced activity observed in the Demyelination group. SEM analysis further reinforced the efficacy of the AM, showing preserved cerebral parenchyma organization, along with evidence of interaction with the tissue, potentially linked to its bioactive properties. These features include modulation of the neural microenvironment and the release of soluble factors, which may contribute to maintaining cellular viability and structural integrity, even under challenging conditions such as exposure to lysolecithin. It is concluded that AM acted as an effective physical barrier against lysolecithin-induced demyelination, protecting brain tissue. Furthermore, it is suggested that there was possible tissue regeneration due to its bioactive properties, which should be further investigated for potential application in the treatment of demyelinating diseases, such as MS. | |
| dc.description.physical | 88 f. | |
| dc.description.sponsorship | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) | |
| dc.format.mimetype | ||
| dc.identifier.affiliation | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.identifier.affiliation | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.identifier.affiliation | Universidade de Taubaté | |
| dc.identifier.bibliographicCitation2 | OLIVEIRA, Melissa Guimarães de. Análise do potencial protetor da membrana amniótica em modelo experimental de desmielinização in vitro de fatias organotípicas de cérebro de camundongos. São José dos Campos, SP, 2025. 83 f.; PDF. Dissertação (Mestrado em Engenharia Biomédica) - Universidade do Vale do Paraíba, Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento, São José dos Campos, 2025. | |
| dc.identifier.uri | https://repositorio.univap.br/handle/123456789/972 | |
| dc.language.iso | pt_BR | |
| dc.publisher.country | Brasil | |
| dc.publisher.initials | UNIVAP | |
| dc.publisher.institution | Universidade do Vale do Paraíba | |
| dc.publisher.program | Mestrado em Engenharia Biomédica | |
| dc.publisher.spatial | São José dos Campos | |
| dc.subject.keyword | Engenharia Biomédica | |
| dc.subject.keyword | Membrana amniótica | |
| dc.subject.keyword | Imunomodulação | |
| dc.subject.keyword | Agentes anti-inflamatórios | |
| dc.subject.keyword | Esclerose múltipla | |
| dc.subject.keyword | Culturas organotípicas | |
| dc.title | Análise do potencial protetor da membrana amniótica em modelo experimental de desmielinização in vitro de fatias organotípicas de cérebro de camundongos | |
| dc.title.alternative | Analysis of the protective potential of the amniotic membrane in an in vitro experimental model of demyelination using organotypic brain slices from mice | |
| dc.type | Dissertação | |
| dc.type.masterDegree | Mestrado em Engenharia Biomédica |